An in vitro study was conducted to examine the effect of sources and the addition levels of carbohydrates on fermentation characteristics, bacterial growth, and hydrogenation of linoleic acid ($C_{18:2}$) by mixed ruminal bacteria. Starch and cellobiose were added to the 200 ml non-selective basal media at the levels of 0.20 and 0.35% (w/v), respectively. Linoleic acid (66.8~79.6 mg) in the absorbed form into the pieces of nylon cloth was also added to the media of 5 treatments including control which was not added with carbohydrate. Three mls of rumen fluid strained through 12 layers of cheese cloth were added to each medium, and were incubated anaerobically in the shaking incubator of $39^{\circ}C$ for 24 hours. During 24 h incubation the pH in incubation media of all treatments was maintained above 6.6 by the addition of sodium bicarbonate. The pH and ammonia concentration of incubation media were not clearly influenced by the sources and addition levels of carbohydrates while additions of carbohydrates increased (p<0.0001) VFA concentration at the 24 h incubation. Molar proportions of acetate were reduced (p<0.0004) while those of propionate were increased (p<0.0006) by the addition of carbohydrates. But the differences in concentration and molar proportions of the VFA were small between the sources or the addition levels. Bacterial growth was faster (p<0.0004) in the starch added treatments than in the cellobiose added ones and control, but no differences were found between addition levels. Increased (p<0.0487) hydrogenation was observed from the starch added treatments compared to the cellobiose added ones, but there was no difference between addition levels.
Kim, Dong-Hyeon;Amanullah, Sadar M.;Yoon, Hee;Lee, Hyuk-Jun;Kong, Il-Keun;Kim, Sam-Churl;Cho, Kyu-Woan;Kim, Sang-Bum
농업생명과학연구
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제46권3호
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pp.79-85
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2012
This study was conducted to examine the effect of dietary n-3/n-6 fatty acid (FA) ratio on in vitro dry matter digestibility (IVDMD), fermentation indices and FA profile. Rice bran was mixed with oil sources (cotton seed oil and linseed oil) to make the diets at 0.02, 0.29 and 0.61 of dietary n-3/n-6 FA ratio. These diets (0.5g) were placed into the incubation bottles with 40 ml of anaerobic culture medium, which contained rumen fluid and Van Soest medium at 1:2 ratio. Five replicates of each diet and two blanks were incubated at $39^{\circ}C$ for 48 hours. After incubation, the incubated contents were centrifuged. The residues were freeze-dried for DMD and FA analyses. The supernatant was used for pH, $NH_3-N$ and volatile fatty acid analyses. The concentrations of lactate (p<0.001) and iso-valerate (p<0.001) decreased linearly with increasing dietary n-3/n-6 FA ratio, but acetate concentration (p=0.056) and the ratio of acetate to propionate (p=0.005) was increased linearly. The concentrations of n-3, n-6 FA and the ratio of n-3/n-6 FA in residues increased (p<0.001) linearly with increasing dietary n-3/n-6 FA ratio, but C18:1n-9 FA concentration was decreased (p<0.001) linearly. With these results, it could affect fermentation characteristics and FA profile of rumen content by dietary n-3/n-6 FA ratio.
Chemical analysis and in vitro studies were conducted to investigate the nutritive value for ruminants of cell mass from lysine production (CMLP) which is a by-product of the lysine manufacturing process. Proximate analysis, protein fractionation, and in vitro protein degradation using protease from Streptomyces griseus and strained ruminal fluid were carried out to estimate ruminal protein degradability of CMLP with two reference feedstuffs-soybean meal (SBM) and fish meal (FM). Amino acid composition and pepsin-HCl degradability were also determined to evaluate postruminal availability. CMLP contained 67.8% crude protein with a major portion being soluble form (45.4% CP) which was composed of mainly ammonium nitrogen (81.8% soluble CP). The amount of nucleic acids was low (1.15% DM). The total amount of amino acids contained in CMLP was 40.60% DM, which was lower than SBM (47.69% DM) or FM (54.08% DM). CMLP was composed of mainly fraction A and fraction B2, while the protein fraction in SBM was mostly B2 and FM contained high proportions of B2 and B3 fractions. The proportion of B3 fraction, slowly degradable protein, in CP was the highest in fish meal (23.34%), followed by CMLP (7.68%) and SBM (1.46%). CMLP was degraded up to 51.40% at 18 h of incubation with Streptomyces protease, which was low compared to FM (55.23%) and SBM (83.01%). This may be due to the insoluble portion of CMLP protein being hardly degradable by the protease. The in vitro fermentation by strained ruminal fluid showed that the amount of soluble fraction was larger in CMLP (40.6%) than in SBM (17.8%). However, because the degradation rate constant of the potentially degradable fraction of CMLP (2.0%/h) was lower than that of SBM (5.8%/h), the effective ruminal protein degradability of CMLP (46.95%) was slightly lower than SBM (53.77%). Unavailable fraction in the rumen was higher in CMLP (34.0%) compared to SBM (8.8%). In vitro CP degradability of CMLP by pepsin was 80.37%, which was lower than SBM (94.42%) and FM (89.04%). The evaluation of protein degradability using different approaches indicated that soluble protein in CMLP may supply a large amount of ammonia in the rumen while insoluble protein can be by-passed from microbial attacks due to its low degradability. The results from this study suggest that CMLP can be used as a protein supplement to ruminants for supplying both non-protein nitrogen to rumen microbes and rumen undegradable protein to the host animal.
Kim, Eun Tae;Hwang, Hee Soon;Lee, Sang Min;Lee, Shin Ja;Lee, Il Dong;Lee, Su Kyoung;Oh, Da Som;Lim, Jung Hwa;Yoon, Ho Baek;Jeong, Ha Yeon;Im, Seok Ki;Lee, Sung Sill
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제29권9호
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pp.1280-1286
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2016
This study was aimed to evaluate the in vitro effects of medicinal herb extracts (MHEs) on ruminal fermentation characteristics and the inhibition of protozoa to reduce methane production in the rumen. A fistulated Hanwoo was used as a donor of rumen fluid. The MHEs (T1, Veratrum patulum; T2, Iris ensata var. spontanea; T3, Arisaema ringens; T4, Carduus crispus; T5, Pueraria thunbergiana) were added to the in vitro fermentation bottles containing the rumen fluid and medium. Total volatile fatty acid (tVFA), total gas production, gas profiles, and the ruminal microbe communities were measured. The tVFA concentration was increased or decreased as compared to the control, and there was a significant (p<0.05) difference after 24 h incubation. pH and ruminal disappearance of dry matter did not show significant difference. As the in vitro ruminal fermentation progressed, total gas production in added MHEs was increased, while the methane production was decreased compared to the control. In particular, Arisaema ringens extract led to decrease methane production by more than 43%. In addition, the result of real-time polymerase chain reaction indicted that the protozoa population in all added MHEs decreased more than that of the control. In conclusion, the results of this study indicated that MHEs could have properties that decrease ruminal methanogenesis by inhibiting protozoa species and might be promising feed additives for ruminants.
본 연구의 목적은 organic acids를 첨가하여 in vitro 상의 반추위 발효성상과 반추위 내 메탄 억제에 미치는 영향에 대한 효과를 알아보고자 하였다. 반추위액은 순천대학교 부속목장의 반추위 cannula가 시술된 Holstein에서 채취하였고, organic acids는 반추위액과 버퍼의 혼합액에 첨가하여 배양하였다. 그 결과 pH 값은 lactic acid, malic acid 및 succinic acid첨가구에서 6.69에서 6.16 정도로, 대조구와 다른 첨가구보다 낮았다. 총 가스 발생량은 배양 48시간에 aspartic acid, malic acid 및 succinic acid첨가구에서 유의적(p<0.05)으로 높았고, 메탄 발생량은 lactic acid 첨가구에서 대조구보다 낮았다. 총 VFA와 propionic acid의 농도는 배양 12시간에 모든 첨가구가 대조구에 비해 높았다. 반추위 미생물 측정 결과에서는 Fumaric acid와 malic acid의 bacteria수가 대조구에 비해 유의적으로 증가하였으며(p<0.05), protozoa수는 유의적(p<0.05)으로 감소되었다. 이상의 실험 결과를 종합해 보면, organic acids의 첨가는 반추위 내 pH를 감소시키고 가스 발생량, 반추위 미생물 성장량 및 propionic acid 모두 증가시켰으며, 특히 lactic acid는 메탄생성을 억제하였다. 앞으로 Organic acid와 다른 메탄억제 물질과 혼합하여 반추위 내 메탄생성 억제에 관한 구체적인 연구가 필요한 것으로 사료된다.
The objective of this work was to isolate a microorganism, able to produce high lactate dehydrogenase (LDH) activity, for use as a microbial feed additive. The LDH is an important enzyme for lactate conversion in the rumen, thereby possibly overcoming lactic acidosis owing to sudden increases of cereal in the diets of ruminants. In the present study, various bacterial strains were screened from a variety of environments. Among the isolated microorganisms, strain FFy 111-1 isolated from a Korean traditional fermented vegetable food called Kimchi showed the highest enzyme activity, along with retaining strong enzyme activity even in rumen fluid in vitro. Based on morphological and biochemical characteristics as well as compositions of cellular fatty acids plus API analyses, this strain was identified as Lactobacillus sp. The optimum temperature and pH for growth were found to be 30$^{\circ}C$ and pH 6.5, respectively. A maximum cell growth of 2.2 at $A_{650}$ together with LDH activity of 2.08 U per mL was achieved after 24 h of incubation. Initial characterization of FFy 111-1 suggested that it could be a potential candidate for use as a direct-fed microbial in the ruminant animals.
Nineteen tanniferous browse plants were collected from South Africa to investigate their digestibility, gas production (GP) characteristics and methane production. Fresh samples were collected, dried in forced oven, and ground and analyzed for nutrient composition. In vitro GP and in vitro organic matter digestibility (IVOMD) were determined using rumen fluid collected, strained and anaerobically prepared. A semi-automated system was used to measure GP by incubating the sample in a shaking incubator at $39^{\circ}C$. There was significant (p<0.05) variation in chemical composition of studied browses. Crude protein (CP) content of the species ranged from 86.9 to 305.0 g/kg dry matter (DM). The neutral detergent fiber (NDF) ranged from 292.8 to 517.5 g/kg DM while acid detergent fiber (ADF) ranged from 273.3 to 495.1 g/kg DM. The ash, ether extract, non-fibrous carbohydrate, neutral detergent insoluble nitrogen, and acid detergent insoluble nitrogen and CP were negatively correlated with methane production. Methane production was positively correlated with NDF, ADF, cellulose and hemi-cellulose. Tannin decreased GP, IVOMD, total volatile fatty acid and methane production. The observed low methanogenic potential and substantial ammonia generation of some of the browses might be potentially useful as rumen manipulating agents. However, a systematic evaluation is needed to determine optimum levels of supplementation in a mixed diet in order to attain a maximal depressing effect on enteric $CH_4$ production with a minimal detrimental effect on rumen fermentation of poor quality roughage based diet.
The objective of this study is to investigate the effects of Cynanchum wilfordii (CW) on cell viability, anti-oxidant activity, volatile fatty acid (VFA) production and methane gas production. Collected rumen fluid incubated with CW powder (1% w/v) for 12 and 24 hours were analyzed for pH, VFAs and methane. Alamar blue assay showed no significant difference on the viability of 3T3-L1 and C2C12 cells treated with CW for 24 hours. TBARS data showed a dose dependent increase on the antioxidant activity of CW. VFAs increased in the CW-treated groups compared to the control group. In addition, propionate increased more than other VFAs by the treatment with CW. There was a significant decrease in methane gas production in batch culture treated with CW in 12hrs. In conclusion, it was suggested that Cynanchum wilfordii could manipulate rumen fermentation considered by increasing VFA production and inhibition of methanogenesis.
Objective: Ensiling of tannin-rich fruit byproducts (FB) involves quantitative and qualitative changes in the tannins, which would consequently change the rumen fermentation characteristics. This study aimed to evaluate whether ensiled FBs are effective in mitigating methane emission from ruminants by conducting in vitro assessments. Methods: Fruit byproducts (grape pomace, wild grape pomace, and persimmon skin) were collected and subjected to four-week ensiling by Lactobacillus buchneri inoculant. A defined feed component with or without FB samples (both fresh and ensiled material) were subjected to in vitro anaerobic culturing using rumen fluid sampled from beef cattle, and the fermentation parameters and microbial populations were monitored. Results: Reduced methane production and a proportional change in total volatile fatty acids (especially enhanced propionate proportion) was noted in bottles containing the FBs compared with that in the control (without FB). In addition, we found lower gene copy number of archaeal 16S rRNA and considerably higher levels of one of the major fibrolytic bacteria (Fibrobacter succinogenes) in the bottles containing FBs than in the control, particularly, when it was included in a forage-based feed. However, in the following cultivation experiment, we observed that FBs failed to exhibit a significant difference in methane production with or without polyethylene glycol, implying that tannins in the FBs may not be responsible for the mitigation of methane generation. Conclusion: The results of the in vitro cultivation experiments indicated that not only the composition but also ensiling of FBs affected rumen fermentation patterns and the degree of methane generation. This is primarily because of the compositional changes in the fibrous fraction during ensiling as well as the presence of readily fermented substrates, whereas tannins in these FBs seemed to have little effect on the ruminal fermentation kinetics.
Seul, Lee;Youl Chang, Baek;Mingyung, Lee;Seoyoung, Jeon;Han Tae, Bang;Seongwon, Seo
Animal Bioscience
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제36권2호
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pp.238-247
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2023
Objective: Recently, indigenous Korean grass Sasa quelpaertensis Nakai (SQ) has garnered much interest as a roughage source for livestock to mitigate its adverse effects on habitat diversity. Thus, the objective of the present study was to evaluate the ruminal fermentation, palatability, and nutrient digestibility of SQ for Korean native beef cattle (Hanwoo) using in vitro rumen fermentation, in situ rumen degradability, and in vivo feeding trials. Methods: Using in vitro tests with rumen fluid as the inoculum for 48 h, ruminal fermentation of SQ was evaluated and compared with that of other roughage sources commonly used in Korea (i.e., rice straw, Timothy hay, and Italian ryegrass [IRG]). Additionally, an in situ trial 96 h was performed using three cannulated Hanwoo steers. Further, an in vivo trial was performed using eight Hanwoo steers to compare the palatability of SQ with rice straw in total mixed ration (TMR) and forage-concentrate separate feeding conditions. Finally, an in vivo digestibility trial of SQ fed as TMR of two particle sizes was performed with four Hanwoo steers. Results: In vitro and in situ trials revealed that SQ was comparable or superior to rice straw in terms of the ruminal fermentation characteristics of pH, gas production, total volatile fatty acid content, and effective ruminal dry matter digestibility (DMD), although its fermentability was lower than that of Timothy hay and IRG. In the palatability test, steers showed a greater preference for SQ when given as TMR. The total tract DMD of SQ fed as TMR was 75.9%±1.37%, and it did not differ by particle size. Conclusion: The feed value of SQ as a roughage source for Hanwoo steers is comparable or superior to that of rice straw, particularly when provided as TMR.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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