본 실험은 여우구슬의 기내 부정근 유도 및 증식조건의 확립을 목적으로 수행되었다. 우선 여우구슬의 기내 발아체로부터 부위를 달리하여 부정근을 유도한 결과 줄기부위는 뿌리보다 양호한 부정근의 유도를 보였다. 또한 유도된 부정근을 이용하여 옥신의 종류(IAA, IBA, NAA와 2.4-D)에 따른 부정근 유도율을 조사한 결과 IBA와 NAA는 IAA와 2.4-D보다 높은 유도율을 보였다. IBA의 농도에 따른 유도율과 증식효율은 IBA가 0.5 mg/L첨가되었을 때 가장 높은 유도 및 증식효율을 보였다. 최적의 액체배지조건을 확인하고자 IBA의 농도는 0.5 mg/L로 첨가하고 sucrose의 농도를 달리하여 실험한 결과 sucrose는 30 g/L 첨가 되었을 때 가장 높은 생중량과 건중량을 나타냈다. 액체배양된 여우구슬의 부정근을 각각 MS, 1/2MS, 1/3MS배지에 30 g/L sucrose, 0.5 mg/L IBA가 첨가된 5 L 용량의 생물반응기에 4주간 배양한 결과 1/2MS 배지에서 양호한 생장을 보였다. 본 실험에서는 여우구슬의 종자발아체를 이용하여 부정근의 유도 및 증식조건에 필요한 기내배양조건과 2차적으로 유도된 부정근을 이용하여 플라스크와 생물반응기 배양을 통한 효율적인 증식조건을 확립하였다.
정금나무(Vaccinium oldhamii)의 정아를 포함한 줄기를 재료로 다신초 유도 및 기외발근을 통해 완전한 식물체를 효과적으로 재분화시킬 수 있었다. 정아를 포함한 줄기로부터 다신초 유도는 2.0 mg/L 2-iP에서 유도율 100.0%, 절편체 당 다신초 유도수 7.4개로 나타났으며, 특히 신초 길이는 평균 51.7 mm로 다른 사이토키닌(zeatin, BA 또는 TDZ) 처리구에 비해 가장 높게 나타났다. 증식된 줄기로부터 기내발근은 0.5 mg/L IBA 첨가에서 절편체 당 2.4개의 뿌리를 생산하였고, 뿌리 길이는 평균 17.6 mm로 가장 우수한 결과를 보였다. 상토를 이용한 기외발근의 경우 1.0 mg/L IBA와 탈크(talc) 혼합용액 처리 시 평균 발근율은 80.0%로 기내발근에 비해 더 양호한 것으로 나타났다.
본 연구는 낙엽송 체세포배 유도, 발아 및 식물체 재분화에 영향하는 배지종류, 엡시식산(abscisic acid, ABA)의 농도, 삼투압제의 종류 및 농도 효과를 조사하기 위해 수행되었다. 체세포배 유도를 위한 배양기간, ABA 및 삼투압제 농도 비교에서 $60{\mu}M$ ABA+0.2 M sucrose에서 4주 배양으로 가장 많은 체세포배(191개/g 조직)가 유도 되었으나, $4{\mu}M$ ABA+0.1 M sucrose에서는 배양 기간에 관계없이 3.5~23.5 개로 아주 저조한 유도 결과를 보였다. 체세포배 발아 비교에서는 $60{\mu}M$ ABA+0.2 M sucrose 처리구에서 5 주간 배양으로 유도된 체세포배가 자엽(90.9%), 하배축(95.8%) 및 뿌리발생율(96.5%)이 가장 높았으나, $4{\mu}M$ ABA+0.1 M sucrose 처리구 유래 체세포배의 발아정도는 매우 저조한 것으로 나타났다. 삼투압제 농도 및 종류에 따른 체세포배 발아 및 식물체 재분화 비교에서는 0.2M sucrose 처리구의 체세포배의 자엽(98.3%), 하배축(78.4%), 뿌리(57.5%) 발생율 및 식물체 재분화율(54.8%)로 가장 높게 나타났다.
Kim, Young Jin;Park, Tae Il;Kim, Hyun Soon;Park, Ho Ki;Chon, Sang Uk;Yun, Song Joong
Journal of Plant Biotechnology
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제6권1호
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pp.39-43
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2004
A successful, efficient system for multiple shoot induction and plant regeneration of soybean (Glycine max) was established. Four soybean genotypes were compared for organogenic responses on various media cultured under light conditions. The adventitious shoots (98%, 2.6 shoots/cotyledon) directly from one-day-old cotyledon after germination induced by the hormone treatment and its efficiency was higher than any other conditions. The optimal medium for the induction of multiple shoots from cotyledon in Pungsannamulkong(shoot formation rate, 98%), Lx 16 (83%) and IIpumgeomjeongkong(63%) was MS medium supplemented with 2 mg/L BAP, but for Alchankong(75%), MS medium supplemented with 1mg/L zeatin and 1mg/L IAA, 3% sucrose, 4% Phytagel. Higher root induction (88%) was observed from the shoots placed on rooting medium (hormone-free MS basal). Plantlets were transferred onto the same medium supplemented with 1% activated charcoal for further development. With this treatment, regenerated plantlets were obtained within 7-8 weeks (shoot induction for 4 weeks, rooting and shoot elongation for 3-4 weeks).
Soybean nodule extract was prepared and tested for the effectiveness in the induction of asymbiotic nitrogen fixation of R. japonicum P-168. A Asymbiotic nitrogenase activity was increased over twice when glutamate was replaced by nodule extract in the induction media. Independently of the induction media, the nitrogenase activity in the assay media was also enhanced by the addition of nodule extract ($100-400{\mu}g$ protein/ml). The amount of ethylene in the assay media reached the highest point after 8 days incubation of R-168 and was decreased thereafter. The growth of R. japonicum R-168 was sensitive to the concentration of nodule extract. As a while, the effect of soybean root extract was not detected both in the induction of nitrogenase activity and in the growth of R. japonicum R-168.
Pea (Pisum sativum) is one of important legume crops in the world. It is commonly used as a protein source for animal and human diet, and also used as a natural nitrogen source which is produced by a symbiotic bacterium in their root nodule and helpful for terrestrial ecosystem. The successful in vitro manipulation is depended on three main factors including physiology of plant donor, in vitro manipulation approach, and stress physiology during plant cultivation. Moreover, genotype is an important for plant manipulation; different genotype gives the different response to regeneration efficiency. An efficient condition of shoot induction for pea (Pisum sativum cv. 'Sparkle') was developed by using optimum explant, plant growth regulator concentrations, and pretreatment of BA onto explant. The average shoot number per explant showed the highest on two kinds of shoot induction media (MSB5 media containing 2 mg/L BA and a combination of 2 mg/L BA and 1 mg/L TDZ) with cotyledonary node explants culture. Moreover, the pretreatment of explant in 200 mg/L BA solution was found to be more effective in shoot induction than that of non-pretreatment. The analysis of genetic stability of regenerants by using 13 ISSR markers presented that in vitro regenerated plants showed polymorphism with 8.3% compared with their mother plants.
Kim, Ji-Hye;Lee, Dong-Eun;Park, Jung-Chul;Kim, Yoon Jae;Cha, Jeong-Heon;Bak, Eun-Jung;Yoo, Yun-Jung
International Journal of Oral Biology
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제40권3호
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pp.111-116
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2015
To determine the effect of diabetes on root resorption in periodontitis, we investigated odontoclast formation and root resorption in diabetic rats with periodontitis. Odontoclast formation was observed in three groups of F344 rats: Controls (C) were normal rats without diabetes or periodontitis; the periodontitis (P) group had mandibular first molars to be ligatured; the periodontitis with diabetes (PD) group was intravenously administered streptozotocin (50 mg/kg) to induce diabetes and had mandibular first molars to be ligatured. On days 3, 10, and 20 after ligature, tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ and receptor activator of nuclear factor-${\kappa}B$ ligand (RANKL) expression, odontoclast formation, and root resorption areas were evaluated by immunohistochemistry, tartrate-resistant acid phosphatase staining, and hematoxylin and eosin staining, respectively. The PD group showed frequent urination, weight loss, and hyperglycemia. Numbers of TNF-${\alpha}$- and RANKL-positive cells were higher in the P and PD groups than in the C group. It was more prevalent in PD group on day 3. Odontoclast formation was greater in the P and PD groups than in the C group on days 3 and 10, then decreased to same level as the C group by day 20. Root resorption in the PD and P groups showed increases on days 3 and 10, respectively, compared to the C group. These results suggest that diabetes may transiently increase root resorption on day 3 with high expression of TNF-${\alpha}$ and RANKL after periodontitis induction. This study could aid the understanding of root resorption in diabetic patients with periodontitis.
가시오갈피의 꽃봉오리 엽병, 줄기, 줄기마디, 뿌리, 꽃대, 잎 등 조직으로 부터 캘러스가 유기 되었으며 캘러스 유기재료로는 꽃봉오리, 엽병, 줄기, 줄기 마디, 뿌리 등이 적합하였다. 캘러스 유기율은 한국산 가시오갈피가 일본산과 러시아산보나 높게 나타났다. 캘러스유기에는 2.4-D와 TDZ조합처리가 효과적이었으며 한국가시오갈피의 엽병, 줄기, 액아, 뿌리절편으로부터 형성된 캘러스에서 배발생 캘러스가 형성되었으며 줄기에서 형성된 캘러스로부터 한국, 일본, 러시아산 가시오갈피 모두에서 배발생캘러스가 형성되었다. 엽병에서 형성된 캘러스로부터 배발생캘러스의 유기율이 가장 높았으며 2.4-D 1mg/l 처리가 가장 효과적이었다. 액체배지에서의 체세포배의 생장에는 생장조절물질을 첨가하지 않은 MS기본배지가 적합하였다. 기내에서 잎과 뿌리 분화가 이루어지고 건실하게 자란 식물체를 온실에 옮겨 순화하였을 경우 99.1%의 생존율을 보였다.
Jafari, Naser;Zargar, Seyed Jalal;Yassa, Narguess;Delnavazi, Mohammad Reza
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제17권12호
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pp.5189-5193
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2016
Objective: Dorema glabrum Fisch. & C.A. Mey is a perennial plant that has several curative properties. Anti-proliferative activity of seeds of this plant has been demonstrated in a mouse fibrosarcoma cell line. The aim of the present study was to evaluate cytotoxicity of D. glabrum root extracts in a human gastric adenocarcinoma (AGS) cell line and explore mechanisms of apoptosis induction, cell cycle arrest and altered gene expression in cancer cells. Materials and Methods: The MTT assay was used to evaluate IC50 values, EB/AO staining to analyze the mode of cell death, and flow cytometry to assess the cell cycle. Quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR) amplification was performed with apoptosis and cell cycle-related gene primers, for cyclin D1, c-myc, survivin, VEGF, Bcl-2, Bax, and caspase-3 to determine alteration of gene expression. Results: Our results showed that n-hexane and chloroform extracts had greatest toxic effects on gastric cancer cells with IC50 values of $6.4{\mu}g/ml$ and $4.6{\mu}g/ml$, respectively, after 72 h. Cell cycle analysis revealed that the population of treated cells in the G1 phase was increased in comparison to controls. Cellular morphological changes indicated induction of apoptosis. In addition, mRNA expression levels of Bax and caspase-3 were increased, and of bcl-2 survivin, VEGF, c-myc and cyclin D1 were decreased. Conclusion: Our study results suggest that D. glabrum has cytotoxic effects on AGS cells, characterized by enhanced apoptosis, reduced cell viability and arrest of cell cycling.
Kim, Tae-Dong;Kim, Ji-Ah;Lee, Na-Nyum;Choi, Chang-Ho
Journal of Plant Biotechnology
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제47권1호
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pp.40-45
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2020
An efficient protocol for multiple shoot induction and plant regeneration from axillary bud culture of Magnolia 'Vulcan' was developed in the present study. Primary shoots were obtained from axillary bud explants cultured on Murashige and Skoog (MS) medium containing 1.0 mg/L 6-benzylaminopurine (BA). To induce multiple shoots effectively, primary shoot tips were cultured on MS medium supplemented with different concentrations of BA and zeatin at 0, 0.2, 0.5, and 1.0 mg/L. Of these treatments, the MS medium with 0.5 mg/L BA resulted in the highest number of shoots per explant with an average value of 5.9, and it produced the greatest shoot height at 4.8 cm after 12 weeks of culturing. In the rooting of in vitro produced shoots, the greatest percentage of explants forming roots (91.3%), number of roots per explant (9.7), and root length (2.8 cm) were obtained in half-strength MS medium supplemented with 6.0 mg/L indole-3-butyric acid (IBA). Regenerated plantlets were successfully acclimatized and hardened off inside the culture room with 87.5% survival rate. Plants were transferred to a greenhouse with a 97.2% survival rate. The highly efficient shoot multiplication and plant regeneration system reported herein can be used for large-scale clonal propagation of valuable Magnolia species or cultivars.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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