Virus에 감염(感染)된 느타리버섯은 계통(系統)이나 재배환경(栽培環境)에 따라서 차이(差異)가 있으나 대체로 균사생장(菌絲生長)이 부진(不振)하며 버섯 원기형성(原基形成)이 과밀(過密)하거나 불량(不良)하였다 . 균상(菌床)은 잡균(雜菌) 발생이 많았으며 대는 길고 굽으며 가지를 형성(形成)하였다. 갓은 대에 비(比)하여 작으며 평형(平形)이고 갓색(色)은 다소 짙은 경향이였다 . 초발아(初發牙)가 늦고 자실체(子實體) 수량(收量)은 건전균주(健全園珠)에 비하여 약 30% 정도(程度) 감수(減收)하였으며 이병(罹病)된 포자(胞子)로 접종(接種)하였을 때 감수율(減收率)이 높았다 .
왕겨를 탄소원으로 사용하여 증균 배양을 실시함으로써 국내 사찰에서 제조된 된장으로부터 xylan 분해능 우수한 균주를 분리하였다. 분리균 YB-1301은 DNA gyrase subunit B 유전자(gyrB)의 염기서열에 근거하여 Bacillus safensis로 동정되었다. B. safensis YB-1301을 밀기울 또는 여러 종류의 xylan들이 첨가된 배지에서 배양하였을 때 xylanase의 생산성이 급격하게 증가되었다. 특히 birchwood xylan이 첨가된 LB 배지에서 플라스크 배양을 하였을 때 최대 340 U/ml 이상의 xylanase 생산성을 보였다. Xylan이 첨가되지 않은 LB 배지에서는 매우 소량의 xylanase가 균의 성장과 연계되어 항시적으로 생산되지만, xylan이 첨가된 배지에서는 정지기 생육단계에서 xylanase의 생산이 크게 유도되었다. 더구나 xylanase 생합성은 가수분해되지 않은 xylan 보다 xylan의 효소적 가수분해 산물에 의해 더 빠르게 유도되었다. 또한 B. safensis YB-1301의 배양상등액에 존재하는 xylanase는 55℃와 pH 6.5−7.0의 반응조건에서 최대활성을 나타냈다.
The phylogenetic diversity of the bacteria in hot composting samples collected from three spatial locations was investigated by molecular tools in order to determine the influence of gradient effect on bacterial communities during the thermophilic phase of composting swine manure with rice straw. Total microbial DNA was extracted and bacterial near full-length 16S rRNA genes were subsequently amplified, cloned, restriction fragment length polymorphism-screened and sequenced. The superstratum sample had the highest microbial diversity among the three samples which was possibly related to the surrounding conditions of the sample resulting from the location. The results showed that the sequences related to Bacillus sp. were most common in the composts. In superstratum sample, 45 clones (33%) and 36 clones (27%) were affiliated with the Bacillus sp. and Clostridium sp., respectively; 74 clones (58%) were affiliated with the Clostridium sp. in the middle-level sample; 52 clones (40%) and 29 clones (23%) were affiliated with the Clostridium sp. and Bacillus sp. in substrate sample, respectively. It indicated that the microbial diversity and community in the samples were different for each sampling site, and different locations of the same pile often contained distinct and different microbial communities.
Kim, Kyoung-Cheol;Yoo, Seung-Soo;Oh, Young-A;Kim, Seong-Jun
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제13권1호
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pp.1-8
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2003
Strain FJI, a filamentous fungus isolated from rotten wood, showed high ability to hydrolyze cellulosic materials. To identify the strain FJI, ITS sequencing analysis and morphological observation were performed. The strain FJI was identified as Trichoderma harzianum. The strain produced a large amount of CMCase, xylanase, ${\beta}-glucosidase$, and avicelase. Optimal culture conditions for the production of the enzymes, such as pH, temperature, and inoculation concentration, were initial pH 6.0-7.0,$25-30^{\circ}C$, and $10^4$ ea-spores/ml in Mandel's medium, respectively. T.hanzianum FJI utilized various cellulosic materials and organic nitrogen sources to produce cellulases and xylanase, and also considerably a crystalline and/or insoluble material like Avicel and rice straw. The highest levels of CMCase and xylanase were 41.2 and 65.6 U/ml in 7 days of cultivation using 2.5% of carbon source (Avicel+CMC) and 0.5% of nitrogen source (peptone), respectively.
The cellulloytic enzymes, such as FPase and amylase, production by Trichoderma inhamatum KSJ1 using 10L air circulation bioreactor were tried. Physical properties of the employed bioreactor, mixing time, $k_{L}$ a were examined in airflow conditions of enzyme production cultures. Mixing time of distilled water at 0.6, 1.2, 1.8 vvm were 25, 21, 9 sec, respectively, and mandel's medium using rice straw and pulp as carbon sources were 31, 25, 15 sec. Mixing time decreased when airflow rate increased. $k_L$ a of distilled water at 0.6, 1.2, 1.8 vvm were measured -22.52, -29.31, -39.62, respectively, and the mandel's medium were -47.8, -18.5, -21.4. The $k_L$ a values was increased linearly as the air-flow rates increased. However the values in mandel's medium showed different results, especially at 0.6 vvm. Amylase and FPase activity at the 1.2 vvm was 3.39U/mL, 0.72U/mL in 5 days cultivation. and the activities at 0.6 vvm were 2.01U/mL, 0.39U/mL, respectively. The enzyme productivity at 1.2 vvm was higher than at 0.6 vvm, indicating that high oxygen tension is requested for the efficient enzyme production culture of T. inhamatum KSJ1.
Bacillus sp. DSNC 101의 배양 상징액으로부터 $\alpha$-L-arabinofuranosidase를 정제하여 그 특성을 조사하였다. 정제된 효소의 분자량을 SDS-PAGE를 이용하여 측정한 결과 56kDa로 나타났으며 효소 활성도에 대한 최적 온도와 최적 pH는 각각 55$^{\circ}C$와 7.0이었다. p-nitrophenyl-alpha-L-arabinofuranoside에 대한 Km 값과 Vmax는 1.0mM과 113.6U/mg이었으며 Hg$^{2+}$과 Cu$^{2+}$의 첨가는 효소 반응을 완전히 저해하였다. Ba-cillus sp. DSNC 101은 탄소원으로 볏짚을 사용할 때 $\alpha$-L-arabinofuranosidase를 생산하였으나 xylan이나 glucose, cellulose를 탄소원으로 배양할 때는 생산되지 않았다.
짚에서 60균주를 분리하여 생균제제로서의 기능이 있는 청국장 제조용 starter로 사용가능성을 조사하였다. 분리한 60균주 중 단백 분해력, 전분 분해력, 대두 분해력을 나타낸 균주는 B-59 등 8균주 이었으며 모두 그람 양성 간균으로 포자를 형성하였다. 선별된 8균주의 Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Shigella sonni, Pseudomonas fluorescens, Vibrio parahaemolyticus에 대해 항균활성을 나타낸 균주는 B-59이었다. 항균활성을 나타낸 분리균주 B-59에 의해 L. monocytogenes, S. aureus, V. parahaemolyticus, P. fluorescens의 성장은 억제되었으며. API 50CHB kit를 이용하여 동정한 결과 99.0%의 유사율로 Bacillus licheniformis로 간이 동정되었다. 분리균주인 B-59는 pH 2.5로 조정된 인공 위액에 초기 생균수 8.33 CFU/mL에서 $37^{circ}C$에서 3시간 배양 후의 6.91 CFU/mL로 높은 생존율을 나타내었으며, 인공담즙산에서 초기 균수 6.90 CFU/mL에서, 배양 24시간 후 8.24 CFU/mL로 증가하여 내성을 나타내었다. 분리균주인 B-59는 NaCl 0, 2, 4% 농도에서는 각각 7.63, 7.70, 7.67 CFU/mL로 성장에 영향을 미치지 않았으나, 32% 농도에서도 생존하여 NaCl에 대한 내성을 나타내었으며, 알코올농도 32%에서도 4.22 CFU/mL를 나타내어 에탄올에 대한 내성을 나타내었다. DPPH radical 소거능으로 측정한 B-59 배양액의 항산화 활성이 균주의 성장에 따라 증가하였다.
To obtain an efficient natural lignocellulolytic complex enzyme, we screened an efficient lignocellulose-degrading composite microbial system (XDC-2) from composted agricultural and animal wastes amended soil following a long-term directed acclimation. Not only could the XDC-2 degrade natural lignocelluloses, but it could also secrete extracellular xylanase efficiently in liquid culture under static conditions at room temperature. The XDC-2 degraded rice straw by 60.3% after fermentation for 15 days. Hemicelluloses were decomposed effectively, whereas the extracellular xylanase activity was dominant with an activity of 8.357 U/ml on day 6 of the fermentation period. The extracellular crude enzyme noticeably hydrolyzed natural lignocelluloses. The optimum temperature and pH for the xylanase activity were $40^{\circ}C$ and 6.0. However, the xylanase was activated in a wide pH range of 3.0-10.0, and retained more than 80% of its activity at $25-35^{\circ}C$ and pH 5.0-8.0 after three days of incubation in liquid culture under static conditions. PCR-DGGE analysis of successive subcultures indicated that the XDC-2 was structurally stable over long-term restricted and directed cultivation. Analysis of the 168 rRNA gene clone library showed that the XDC-2 was mainly composed of mesophilic bacteria related to the genera Clostridium, Bacteroides, Alcaligenes, Pseudomonas, etc. Our results offer a new approach to exploring efficient lignocellulolytic enzymes by constructing a high-performance composite microbial system with synergistic complex enzymes.
온실내에서 $^{54}Mn,\;^{60}Co,\;^{85}Sr,\;^{137}Cs$의 혼합용액을 벼의 이식전 및 이식후 다섯 차례에 걸쳐 상부 20cm를 산성 양질사토로 채운 재배상자의 담수표면에 처리하고 흡수실험을 수행하였다. 네 핵종의 벼 지상부로의 흡수율은 처리시기에 따라 각각 $3.4{\sim}13.7%,\;0.03{\sim}0.15%,\;0.6{\sim}l.5%,\;0.02{\sim}0.15%$의 범위로 모두 이식 후 67일 처리에서 최고였다. 토양-작물체간 전이계수는 대체로 핵종간에는 $^{54}Mn>^{85}Sr>^{60}Co{\geq}^{137}Cs$, 부위간에는 볏짚 >왕겨>현미의 순이었다. 현미에서의 전이계수$(m^2/kg-dry)$는 처리시기에 따라 $^{54}Mn$가 $1.2{\times}10^3{\sim}5.0{\times}10^3,\;^{60}Co$이 $1.6{\times}10^5{\sim}2.6{\times}10^4,\;^{85}Sr$가 $1.1{\times}10^4{\sim}7.6{\times}10^4,\;^{137}Cs$이 $5.2{\times}10^5{\sim}7.0{\times}10^4$였다. 볏짚에서는 네 핵종 모두 이식후 67일 처리에서 전이계수가 최고였고 현미에서는 $^{54}Mn,\;^{60}Co,\;^{85}Sr$의 경우 이보다 다소 늦은 처리에서 최고였다. 본 연구에서 구한 전이계수는 벼의 생육중 사고로 인한 농경지의 방사능 오염 시 환경영향 평가를 위한 기초자료로 이용될 수 있다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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