We screened the anti-oxidative effect on V79-4 hamster lung fibroblast cells induced by hydrogen peroxide with fifteen herbal extracts. Uncariae rhynchophylla JACKS and Rheum coreanum NAKAI were found to show DPPH radical scavenge activity (25 and 29% compared to control). Rheum coreanum NAKAI and Siegesbeckia orientalis L. were shown to scavenge intracellular reactive oxygen species (57 and 55% compared to control) which is measured by dichlorodihydrofluorescin diacetate method (DCHF-DA). Rheum coreanum NAKAI which showed the most strong intracellular reactive oxygen species scavenging activity had low DPPH radical scavenging activity compared to Uncariae rhynchophylla JACKS.
Objective : The purpose of this study is to compare anti-thrombotic activities of 4 Rhubarb species. Methods : Rhubarb has been used as medical and edible resources worldwide for the therapy of cancer, constipation and inflammation, etc. To compare the anti-thrombotic activities among the species within rhubarb, we investigated and compared the inhibitory properties of water extracts from R. palmatum(RPE), R. officinale(ROE), R. nobile(RNE), and R. franzenbachii (RFE) on the fibrinolysis, blood coagulation and platelet aggregation. APTT and PT, blood coagulation time, were measured by apparatus of auto blood coagulation analysis that called ACL-7000. The measurement of fibrinolysis was measured and compares with the width of clear zone from melted fibrin plate. The platelet aggregation was measured and compared with inhibition rate of aggregation. Results : We found out the best species from rhubarb showing the significant fibrinolytic, anti-coagulant and anti-platelet aggregation activity. Our results show that Rheum nobile (RNE) has the most effective anti-thrombotic activity among 4 tested rhubarb. Conclusions : This study, therefore, RNE will be able to be used the development of drug which is thrombosis treatment.
현재 대황은 지표성분의 규격이 한국, 일본과 중국이 다르고, 유통시장에서 대황과 종대황이 혼재되어 있으며 다양한 기원식물이 혼재되어 수입되고 있다. 따라서 대황의 효능을 현대 약리학적으로 해석하는 과정을 통해 약재의 표준화, 과학화 및 위염에 대한 지표성분 검색에 기여할 수 있을 것으로 사료되어 Rheum tanguticum(당고특대황)과 그 비교생약으로 Rumex cripus(양제근), Rheum officinale(약용대황), Rheum palmatum(장엽대황) 및 Rheum undulatum(종대황)의 물 및 70% 에탄올 추출물을 비교하였다. 그 결과, 흰 쥐를 이용한 위염 모델에서 양제근 70% 에탄올 추출물(73.2%)와 종대황 물 추출물(71%)이 각각 70% 이상으로 우수한 위손상 억제활성을 보여주었지만, 당고특대황의 70% 에탄올 추출물 투여시 91.8%로 실험군 중 가장 우수한 위염 억제 효과를 확인할 수 있었다. 공격인자로써의 산을 중화시킬 수 있는 능력을 알아보기 위한 제산력 시험법으로는 당고특대황 물 추출물과 70% 에탄올 추출물이 각각 약 14.2%, 약 15.8%로 억제함을 알 수 있었다. 이 결과로 보아 양성대조군으로 사용한 hydrotalcite(49.9%)보다는 제산작용이 약하였지만 과량 혹은 장기간 복용하면 효과가 있을 것으로 생각된다. 소화성궤양, 위암 및 변연부 B세포 림프종 발생에 있어 중요한 원인 인자로 밝혀졌고, 기능성 소화불량증, 위의 과형성 용종, 철결핍성 빈혈 등 기타 질환과의 연관성들이 제시되고 있는 H. pylori에 대한 colonization 억제 활성을 확인한 결과 당고특대황의 70% 에탄올 추출물 $100{\mu}g/mL$에서 H. pylori에 대한 항균작용(+)을 확인할 수 있었다. DPPH 용액을 이용하여 free radical의 소거능을 $IC_{50}$으로 나타낸 결과, 당고특대황은 물 및 70% 에탄올 추출물에서 $IC_{50}$이 $25.9{\mu}g/mL$, $5.8{\mu}g/mL$로 양성대조군으로 사용한 L-ascorbic acid ($IC_{50}=6.5{\mu}g/mL$)와 유사한 free radical 소거능을 나타내었다. 이 결과로 당고특대황의 70% 에탄올 추출물이 휜 쥐 위염모델의 위손상을 가장 우수하게 억제하였으며 항산화 활성 또한 가장 우수한 것으로 확인되었다. 당고특대황의 성분인 chysophanol, chrysophanol-8-O-glc, desoxyrhaponticin desoxyrhapontigenin, emodin, isorhaponticin, 2-methoxy-4-hydroxyanthraquinone-5-O-glc, physcion, piracetannol-3'-O-glc, resveratrol, rhaponticin 및 rhapontigenin을 이용하여 실험한 결과로는 효성분들 중 physcion $100{\mu}M$과 rhaponticin $50{\mu}M$ 및 $100{\mu}M$에서는 실험에 사용한 성분 들 중 비교적 우수한 colonization 억제작용(+)을 나타내었고, DPPH radical 소거 활성은 isorhaponticin, piracetannol-3'-O-glc, resveratrol 및 rhaponticin에서 $IC_{50}$이 각각 $129.5{\mu}M$, $94.1{\mu}M$$80.1{\mu}M$ 및 $104.6{\mu}M$로 확인되었다. 실험결과를 토대로 항위염 효과가 있는 우수한 약용식물로써 천연물 의약품개발 가능성을 확인하였고 나아가 한약재의 효능을 과학적으로 검증하고 한약재 표준화에 기여할 수 있을 것으로 기대된다.
A new leaf spot disease was observed on leaves of Rheum palmatum (Chinese rhubarb) in Northwest China (Gansu Province) starting in 2005. A Septoria-like fungus was isolated and completion of Koch's postulates confirmed that the fungus was the casual agent of the leaf spot disease. Morphology and molecular methods were combined to identify the pathogen. The fungus produced conidiomata pycnidia and the conidia were 2~5 septate, $61.2{\sim}134.1{\mu}m$ in length and $3.53{\sim}5.3{\mu}m$ in width, which is much larger than the known Spetoria species that infects Polygonaceae species. Phylogenic analysis of the internal transcribed spacer region confirmed that this Septoria-like fungus is within the Septoria genus but distinct from known Septoria species. Together, these morphological and phylogenetic data support that the R. palmatum infecting Septoria strain is a newly-described plant pathogenic species.
본 연구진은 HaCaT-ARE-luciferase 세포를 이용하여 400 여개의 약용식물 에탄올 추출물 중 NRF2/ARE 유도효과가 있는 신규 추출물을 검색하였고 이를 통하여 종대황(Rheum undulatum)과 선복화(Inula japonica)의 주정 추출물이 HaCaT-ARE-luciferase 세포에서 ARE 활성을 강하게 유도하는 것을 관찰하였다. 종대황과 선복화 에탄올 추출물은 HaCaT 세포에서 생존(viability)을 증가시켰고 NRF2/ARE에 의존적인 phase II cytoprotective 효소인 heme oxygenase-1 (HO-1)와 NADPH:quinone oxidoreductase-1 (NQO1)의 전사 및 단백질 발현을 강하게 유도하였다. 또한 종대황과 선복화 추출물은 HaCaT 세포에서 TPA로 유도한 세포 내 활성 산소 및 이를 통하여 생성되는 스트레스 마커인 8-hydroxydeoxyguanosine (8-OH-dG)과 4-hydroxynonenal (4HNE)의 발생을 강하게 억제하였다. 본 연구는 종대황과 선복화의 에탄올 추출물이 인간 피부 세포주인 HaCaT 세포에서 NRF2/ARE에 의존적인 유전자 발현의 유도를 통하여 강력한 항산화 효과를 발휘한다는 것을 증명한다.
Objectives : Due to the morphological similarity and frequent occurrence of intermediate forms as well as morphological variations of aerial part, the correct identification between Rhei Radix et Rhizoma and Rhei Undulatai Rhizoma is very difficult. To develop a reliable method for correct identification and improving the quality standards of Rhei Radix et Rhizoma and Rhei Undulatai Rhizoma, we analyzed RAPD and developed SCAR marker. Methods : To amplify target DNA at the genomic level, 32 Operon 10-mer random primers were applied with four Rheum species, R. officinale, R. palmatum, R. tanguticum and R. undulatum. The nucleotide sequences were determined and species-specific primers were prepared depending on the species-specific RAPD amplicons after subcloned into the pGEM-Teasy vector. To develop the SCAR markers, species-specific PCR amplification and multiplex-PCR were carried out using the single species-specific primer pairs and combinations of them, respectively. Results : We used RAPD analysis of four Rheum plant species to obtain several species-specific RAPD amplicons. From nucleotide sequences of these RAPD amplicons, we developed two SCAR markers that amplified 314 bp and 390 bp DNA fragments in only R. undulatum but not in R. officinale, R. palmatum, R. tanguticum and R. undulatum, for distinguishing Rhei Undulatai Rhizoma and Rhei Radix et Rhizoma. Furthermore, we established SCAR markers for the simultaneous discrimination of the three species within a single reaction by using multiplex-PCR. Conclusions : These genetic markers can be used for the efficient discrimination of plants species and commercial herbal medicines between Rhei Undulatai Rhizoma and Rhei Radix et Rhizoma, to ultimately prevent indiscriminate distribution and prescription of these herbal medicines.
This study is aimed to test physiological and hematological actions of Rheum palmatum through clinical pilot study optimized for usual oriental medicine prescription. Thirty-one cases were finally collected and the sample extract 100 $m{\ell}$ of Rheum palmatum (ERP) was administered two times in a day during 3 days and checked with blood CBC test, urinalysis, liver function test, abdominal X-ray as well as general diagnostic process of oriental medicine; pattern identification, assessment of shapes and constitution. The total toxic effective rate of ERP was 9.68% in 3 cases of the whole in case of consistent uneasy state in the subjective symptomatic assessment and aggravation of blood and urine examination. The relevant diagnostic factors were so-eum constitution and essence type subject, carapaces species, lung type in the aspect of Jisan shape theory. On the other hand, the positive effective rate of ERP was 29.03% manifesting improvement of vital signs or present illness and no abnormal changes of blood chemistry and urinalysis and simple abdomen radiology. The relevant diagnostic factors were tae-eum constitution, energy type subject, aves species, heart and liver type in Jisan's shape theory. And the other cases were manifesting no specific change through the administration of ERP. The ratio of the numbers of decrease and increase was 44:5 in the tenderness and hardness of abdominal palpation. But if the pattern identification doesn't comply with the aim of rhubarb application despite of constipation and abdominal pain, the tendeness and biochemical report was shown in abnormal change. The mean number of diarrhea by ERP was $16.77{\pm}6.95$ during 3 days after administration, and the frequent areas of abdominal pain were lower>middle>upper in order, and it meant the target site of ERP too. Besides, the toxic reaction against ERP was expressed highly in case of decrease in blood cell count and hemoglobin, hematocrit having blood deficiency syndrome. Likewise, the toxicity of ERP was influenced by pattern identification manifesting present disease condition and diagnostic factors of four constitutions, Jisan's shape theory collaterally. In conclusion, evaluation of herbal toxicity in order for using as a clinical guideline, various diagnostic pattern information and shape features like the above should be studied together with other pharmacologic toxicology test for the future.
The study attempts to assess the status, distribution, conservation and use value of Medicinal and Aromatic Plant (MAPs) in the Sagarmatha National Park. Altogether 62 species of MAPs belonging to 47 genera and 33 families have been recorded in the study area. 10 species, belonging to 9 families are categorized as the potential species. Out of the these species, most potential in local but threatened species are Allium hypsistum Stearn, Cordyceps sinensis Sacc, Dactylorhiza hatagirea Soo, Nardostachys grandiflora DC, Aconitum orochryseum, Ephedra gerardiana Wall. Ex. Stapf, Swertia multicaulis D. Don, Picrorhiza scrophulariflora Penne, Rheum australe. D. Don, Malva verticillataL and Swertia pedicallata Benerji. By analysis of data using Simpson's diversity index (SI) and Shannon weaver function (H'), there was high diversity (more heterogeneous) MAPs species composition in the Manjo Gate to Large Dobhan. (0.98349). Less diversity (less heterogeneous) MAPs species composition was in Tyanboche to Pangoche (0.90419). Similarly, the Shannon weaver function shows that in plots laying out in Mongla to Phorche are evenly distributed than others However, higher MAPs species (i.e., 31) was found in the way of Manjo Gate to Larja Dobhan than others.
대황(Rhei Rhizoma; RR, 대황(大黃))은 Rheum officinale Baill.와 Rheum palmatum L. (Polygonaceae)의 땅속부분 (rhizome 및 root)으로 남아시아의 민속의학에서 간 및 신장의 손상을 치료하는데 널리 이용되고 있다. 본 연구에서는 배양한 흰쥐 해마신경세포의 저산소증모델을 이용하여 대황의 물추출물이 신경세포사를 억제하는 효능에 대하여 조사하였다. 배양 10일(DIV10)에 RR을 배양액에 첨가하고 DIV13일에 생존율을 조사한 결과 10 ${\mu}g$/ml 농도까지는 세포독성이 없었으며, 정상산소 환경에서 2.5 ${\mu}g$/ml의 농도에서 세포생존율을 높이는 것으로 나타났다. 또한 배지에 대황을 첨가한 경우 DIV13일에 저산소증을 유도한 후 5일째에 세포생존율을 조사한 결과 대조군에 비하여 매우 유의하게 생존율을 증가시켰다. $H_2DCF$ 염색 결과 대황은 활성산소(ROS)의 생성을 유의하게 감소시킴과, JC-1 염색 결과 사립체 막전위의 소실을 유의하게 억제함을 알 수 있었다. 이러한 결과들은 대황 물추출물이 활성산소를 효과적으로 제거하고, 세포의 에너지 생성을 보전함으로서 세포사를 억제할 수 있음을 보여주며, 향후 뇌신경세포의 건강에 유용하게 이용될 수 있음을 시사한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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