The effect of a rhamnolipid biosurfactant produced by a Pseudomonas aeruginosa MA01 strain on desulfurization of iron concentrates was studied. Surface tension measurement and frothing characterization indicated better surface activity and frothability of rhamnolipid compared to methyl isobutyl carbinol (MIBC) as an operating frother. Reverse flotation tests using rhamnolipid either as a sole frother or mixed with MIBC, showed that the desulfurization process is more efficient at pH 4.5 and high concentration of rhamnolipid in the presence of MIBC. However, under these conditions water recovery decreased due to the change in rhamnolipid aggregates morphology. Results from the present study seemed promising to introduce the biosurfactant from Pseudomonas aeruginosa as a new frother.
The effects of pH and/or NaCl concentration on the Fat Binding Capacity (FBC) of rhamnolipid and the physical properties of surimi gel containing rhamnolipid were investigated. The FBC of rhamnolipid was measured 162% of value at pH 7 and 0% NaCl concentration. The whiteness of surimi gel containing rhamnolipid significantly (p< 0.05) lower than control. In contrast, surimi gel containing rhamnolipid compare with control were enhanced significantly(p < 0.05) breaking force and deformation.
The optimization of culture conditions for the bacterium Pseudomonas aeruginosa BYK-2 KCTC 18012P, was performed to increase its rhamnolipid production. The optimum level for carbon, nitrogen sources, temperature and pH, for rhamnolipid production in a flask, were identified as 25 g/L fish oil, 0.01% (w/v) urea, 25 and pH 7.0, respectively. Optimum conditions for batch culture, using a 7-L jar fermentor, were 200 rpm of agitation speed and a 2.0 L/min aeration rate. Under the optimum conditions, on fish oil for 216 h, the final cell and rhamnolipid concentrations were 5.3 g/L and 17.0 g/L respectively. Fed-batch fermentation, with different feeding conditions, was carried out in order to increase, cell growth and rhamnolipid production by the Pseudomonas aeruginosa, BYK-2 KCTC 18012P. When 2.5 g of fish oil and 100 mL basal salts medium, containing 0.01 % (w/v) urea, were fed intermittently during the fermentation, the final cell and rhamnolipid concentrations at 264 h, were 6.1 and 22.7 g/L respectively. The fed-batch culture resulted in a 1.2-fold increase in the dry cell mass and a 1.3-fold increase in rhamnolipid production, compared to the production of the batch culture. The rhamnolipid production-substrate conversion factor (0.75 g/g) was higher than that of the batch culture (0.68 g/g).
A quantitative method for assaying bioemulsifiers in culture broth was developed and applied to cultivation of Pseudomonas aeruginosa YPJ80. SED(Standard Emulsification Dilution), an indirect measure of bioemulsifier concentration, was proposed. Production of bioemulsifier and rhamnolipid reached their maximum simultaneously. However, the bioemulsifier/rhamnolipid ratio decreased with cultivation time. This indicates the presence of another bioemulsifier other than rhamnolipid. The bioemulsifier seems to be protein-like activator which showed emulsification activity in addition to rhamnolipid.
Characteristics of sophorolipid and rhamnolipid were evaluated as antifungal agents against plant pathogenic fungi. Eight percent of mycelial growth of plant pathogen (Phytophthora sp. and Pythium sp.) was inhibited by 200 mg/l of rhamnolipid or 500 mg/l of sophorolipid, and zoospore motility of Phytophthora sp. decreased by $90\%$ at 50 mg/l of rhamnolipid and $80\%$ at 100 mg/l of sophorolipid. The effective concentrations for zoospore lysis were two times higher than those of zoospore motility inhibition. The highest zoospore lysis was observed with Phytophthora capsici; $80\%$ lysis at 100 mg/I of di-rhamnolipid or lactonic sophorolipid, showing the dependency of structure on the lysis. In the pot test, the damping-off disease incidence ratio decreased to $42\%\;and\;33\%$ of control value at 2,000 mg/l sophorolipid and rhamnolipid, respectively. These results showed the potential of microbial glycolipid biosurfactants as an effective antifungal agent against damping-off plant pathogens.
본 연구에서는 토양에 오염된 디이젤 성분을 제거하기 위한 토양세척 기술 중에서 적절한 계면활성제를 사용하여 토양입자에 결합되어 있는 유해 유기물질의 표면장력을 약화시켜 제거하는 기술을 이용하기 위해 생분해성이 우수하고 2차 오염문제가 없는 생물계면활성제를 생산하였다. Peudomonas aeruginosa ATCC 9027를 이용하여 생산된 생물계면활성제인 rhamnolipid와 기존에 사용되고 있는 화학계면활성제와의 디이젤 세척효능을 비교분석하였다. 회분식, 연속식 세척실험 결과 디이젤 오염토양 초기농도 5,000ppm에서 계면활성제 1%, 세척시간 24시간 경과 후 본 연구에서 생산된 rhamnolipid의 세척효율이 모두 약 95%로 사용된 계면활성제 중에서 가장 우수한 세척효율을 보였다. 화학계면활성제들은 대부분 50∼80% 미만의 세척효율을 나타내었으며, HLB값이 8에서 15사이에서의 화학계면활성제의 경우 75%이상의 분해효율을 나타내었다. 그러나, HLB값이 8이하이거나 15이상에서는 60%이하의 낮은 디이젤 분해효율을 나타내었다.
기계유가 심하게 오염된 토양으로부터 생물계면활성제를 생산하고 항균활성과 살충활성을 보이는 Pseudomonas sp. SG3 균주를 분리하였다. 이 길항세균은 시험한 8개의 식물병원곰팡이 모두에 대하여 균사생육저해활성을 보였다. 또한 in vivo assay에서는 SG3 액체 배양액 처리시 벼도열병, 토마토 잿빛곰팡이병, 토마토 역병, 밀 붉은녹병, 보리 흰가루병 및 고추 탄저병에 강한 항균 효과를 보였다. 액체배양액으로부터 ethyl acetate 추출, silica gel column chromatography 및 preparative HPLC 등을 통하여 한 개의 항균물질을 분리하였다. 질량분석과 핵자기공명분석을 통해 분리한 물질의 구조를 동정한 결과 rhamnolipid B로 동정되었다. Rhamnolipid B는 토마토 잿빛곰팡이병과 토마토 역병에 높은 방제활성을 보였다. 그리고 토마토 잿빛곰팡이병균인 B. cinerea의 균사 생장과 토마토 역병균인 P. infestans의 유주자 발아 및 균사 생장을 효과적으로 억제하였다. Rhamnolipid B를 생산하는 Pseudomonas sp. SG3는 토마토에서 발생하는 식물병을 방제하는 새로운 생물방제제로서 이용이 가능할 것으로 기대된다.
A microorganism, isolated from soil and designated Pseudomonas sp13, produced two kinds of rhamnolipid in the medium containing glucose as carbon source. There were both rhamnolipid contain L-rhamnose and ${\beta}$-hydroxydecanoic acid. Coumpound A and B elucted chloroform-methanol mixed solution of silicic acid column chromatography and recrystallized from a mixture of ether and n-hexane. Studies on the structure of these products reveled that compound A is L-rhamnopyranosyl-${\beta}$-hydroxydecanoyl-${\beta}$-hydroxydecanoic acid and compound B is L-rhamnopyranosyl-L-rhamnopyranosyl-${\beta}$-hydroxydecanoyl-${\beta}$-hydroxydecanoic acid.
The Pseudomonas aeruginosa BYK-2(KCTC 18012p) produced three kinds of glycolipids on olive oil as a substrate and purified two types of major glycolipids(Rf=0.48, BS-1; Rf=0.65, BS-2) using silica gel chromatography, TLC, HPLC, etc. From the analysis of the chemical structure, the glycolipid of BS-1 was estimated as rhamnolipid($2-O-{\alpha}-L-rhamnopyranosyl- {\alpha}-L-rhamnopyranosyl-{\beta}-hydroxyldecanoyl-{\beta}-hydroxydecanoic$ acid; M.W. 650) and BS-2 was detected as rhamnolipid methyl ester($2-O-{\alpha}-L-rhamnopyranosyl-{\alpha}-L-rhamnopyranosyl-{\beta}-hydroxyldecanoyl-{\beta}-hydroxydecanoic$ acid methyl ester; M.W. 664) by FT-IR, FAB Mass spectrometry, $^1H-NMR$, $^{13}C$ FT-NMR, DEPT, 2D-NMR (TOCSY, RELAY, NOESY, HSQC, HMBC). In particular, It was found that a marine bacterium Pseudomonas aeruginosa BYK-2(KCTC 18012P) remarkably produced rhamnolipid and rhamnolipid methyl ester simultaneously.
BACKGROUND: Yuza seed by-product has been produced in a large amount from the agricultural farms in the southern area of Korea. It has been mostly abandoned after commercial process for the production of juice, jam and tea. The study on the reuse of the yuza seed by-product has received much attention as a bio-resource material for the production of active compound in agriculture. METHODS AND RESULTS: Insecticidal rhamnolipid-producing Pseudomonas sp. EP-3 was grown in mineral salt media with the yuza seed by-product at 2, 20, 50 and 100 g/L. The growth of EP-3 was accompanied by a increase in insecticidal activity against green peach aphid. The highest insecticidal activity was observed when EP-3 was grown in the medium containing 50 g/L of the seed sample, producing approximately 996 mg/L of rhamnolipid at 96 h. Palmitic acid, stearic acid, oleic acid and linoleic acid were determined as the major fatty acids of the seed sample. The EP-3 cultures grown on the fatty acid mixture extracted from the seed sample showed a aphid mortality similar to that of cultures grown on the seed sample. The EP-3 cultures grown on 50 g/L of the seed sample showed aphid mortality more than 90% under greenhouse conditions. CONCLUSION: This study suggested that the yuza seed by-product may be used as a renewable material for microbial production of rhamnolipid against green peach aphid.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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