가정에서 제조된 된장 16점으로부터 $60^{\circ}C$에서 성장하는 Bacillus속 균주 63주를 분리하였으며 이로부터 내열성 protease를 생산하는 1개 균주를 선발하였다. 분리균의 형태적, 생화학적 특성과 16S rRNA 유전자서열을 조사한 결과 Bacillus licheniformis로 확인되었다. 분리균의 배양상등액은 반응온도 $60-65^{\circ}C$와 pH11에서 최대 protease 활성을 보였으며, $60^{\circ}C$에서 30분간 열처리한 후에도 87%의 protease 활성을 유지하였다. 질소원, 탄소원, 금속이온, 인 등의 배지성분이 protease 생산성에 미치는 영향을 조사한 결과 유당과 soytone peptone이 분리균의 효소 생산을 증가시키는 탄소원과 질소원으로 확인되었다. 분리균은 말기대수기 이후부터 protease를 생산하기 시작하였으며, 유당 (3%), soytone peptone (1.5%), $MgSO_4$ (0.1%), $K_2HPO_4$ (0.03%)와 $KH_2PO_4$ (0.03%)로 구성된 최적화 배지에서 배양시간이 28시간일 때 protease의 생산성이 최대 550 U/ml에 이르렀다.
야생 코리언 레스페데자의 조사료원으로서의 활용가치를 구명하고자, 숙기별 건물수량, 화학적 성분과 재래산양 12두를 공시하여, 혼합목초(GS) 100% 급여구, GS 80% + Wild Korean lespedeza(LA) 20% 급여구 및 GS 60% + LA 40% 급여구 등의 3처리를 두어 섭취량, 건물소화율 및 질소와 에너지이용성 등을 조사한 결과는 다음과 같다. 코리언 레스페데자의 평균 건물수량은 7,336kg/ha이었으며, 생육이 진행됨에 따른 건물수량은 현저히 증가되는 양상을 보였다(P<0.05). CP 함량은 생육이 진행됨에 따라 현저히 감소된 반면에 섬유소 물질의 함량은 급격히 증가되는 양상을 보였다(P<0.05). 탄닌 함량은 화아생장기(54.5mg/g)에 가장 높았으나, 생육이 진행됨에 따라 감소되는 양상을 보여 종자성숙기에는 26.8mg/g으로 낮아졌다(P<0.05) 건물섭취량은 GS에 LA의 급여비율이 높아질수록 증가되었으나 처리간에 차이가 없었다. 그러나 건물, 세포내용물 및 NDF 소화율은 GS 100% 급여구에 비하여 LA 20% 및 40% 혼합구에서 모두 높은 결과를 보였다(P<0.05). 가소화질소 축적율은 처리간에 차이가 없었으나, 대사질소 축적율과 생물가는 GS 100% 급여구에 비하여 GS 60% + LA 40% 급여구에서 높았다(P<0.05). 가소화 및 대사에너지의 이용율은 처리간에 차이가 없었던 것으로 보아 에너지이용성에 미치는 코리언 레스페테자의 영향은 적었다. 이상의 결과로 보아 야생 코리언 레스페데자의 건물수량, 건물소화율 및 질소 이용성을 고려할 때, 부존 조사료원으로 이용가치는 충분하다고 사료된다.
동치미를 동결하면 미생물의 사멸, 및 성장과 효소의 작용이 정지되어 더 이상 발효가 진행되지 않아 산패 및 조직의 연화를 방지할 수 있으므로 동결 저장은 동치미의 효과적인 저장 방법이다. 그러나 일반적인 동결 방법과 해동 방법으로는 동결 및 해동 공정시 품질의 변화가 발생하는 문제점이 있기 때문에 액체질소를 이용한 급속 동결 및 915MHz microwave을 이용한 급속 해동 공정을 실시하였다. 동치미를 제조한 후 발효 적숙기인 pH 3.8에서 동결하였는데 동치미 무와 액을 함께 동결할 경우 동치미 무의 hardness가 크게 감소하기 때문에 무와 액을 각각 분리하여 동결시켰다. 동치미 무의 size는 $2{\times}2{\times}6cm$이 품질의 변화를 최소화할 수 있는 크기이었고, 동치미 액은 $5{\times}5{\times}10cm$로 설정하였다. 동치미 무의 경우 액체질소로 동결하고 915 MHz microwave로 해동하였을 때 조직의 hardness에 기여하는 pectinesterase activity가 가장 높았고, 조직의 연화에 작용하는 polygalacturonase activity가 가장 낮아서 hardness가 가장 좋았으며 색도의 변화도 가장 적었다. 동치미 액의 경우 $-70^{\circ}C$에서 동결하고 915 MHz microwave로 해동하였을 때 pH와 산도의 변화가 적었으며 미생물이 가장 많이 사멸되었다. 따라서 급속 동결 및 급속 해동을 이용한 저장방법은 동치미의 장기 저장 시 효과적인 방법으로 판단되었다.
본 시험은 두충 잎을 저질 조사료인 볏짚의 일부로 대체․이용할 목적으로 평균체중 50.2 $\pm$1.6kg의 건강한 숫 면양(Corriedale$\time$Polwarth) 4두로 4$\time$4 라틴 방각법으로 실시하였으며, 이때 농후사료 : 조사료의 비율은 3:7이었다. 시험구는 두충을 대체하지 않은 대조구와 조사료인 볏짚의 건물을 기준으로 음건 두충 잎을 3, 5 및 10% 대체한 4개 처리구를 공시하였으며, 영양소 이용율, 기호성, 반추위 내 발효 특성 및 미생물체단백질 합성량을 조사․분석하였다. 조지방 소화율은 3% 구와 5% 구가 대조구에 비하여 약 12.5-17.5%로 증가하였다(p<0.05). 조섬유 소화율은 두충잎을 대체한 모든 처리구가 대조구에 비하여 약 10.6-13.7%로 개선되었다(p<0.05). 건물 섭취량은 10% 구가 844g으로 가장 많았으며 5% 구는 그 다음으로 많이 섭취하였으며, 대조구와 3% 구는 가장 낮았다(p<0.05). 질소 축적량은 3% 구가 대조구에 비하여 약 97%가 개선되었으며, 5% 구와 10% 구가 약 173-192%가 개선되었다(p<0.05). 유기물 이용율은 3% 구와 5% 구가 대조구에 비해 높았다(p<0.05). PD(purine derivatives) 배설량은 5% 구가 2.90mmol/d로 대조구와 3% 구에 비하여 높았다(p<0.05). 미생물체단백질 합성량은 5% 구가 2.51gN/d로 대조구와 3% 구에 비하여 높았다(p<0.05). 반추위내 total VFA 함량은 두충 잎 처리구에서 높게 나타났다. RAN 함량은 두충 잎 급여 후 1-4시간에 15-19mg/100ml로 높게 유지되었다. 이상의 결과를 종합하면, 두충 잎을 음건하여 반추동물에게 5-10%를 대체하여 급여할 경우 영양소 소화율, 기호성 및 반추위 내 발효조건 개선에 유리할 것으로 생각된다.
섭취한 식품이나 에너지를 체내에 보유하는데에 효율적인 것으로 알려진 meal feeding급식형태를 이용하여 단백질의 종류와 수준을 달리했을 때 쥐의 성장, 단백질 및 에너지 대사, 체조성에 미치는 영향을 파악코저 하였다. Casein과 ISP를 10, 20 및 30% 수준으로 달리하고 에너지수준을 3600 kcal ME/kg으로 동일하게구성된 실험사료를 82-100 g되는 숫쥐에게 ad libitum feeding및 1 일 2회 2시간씩 meal feeding으로 4주간의 성장시험과 대사시험을 실시하였던 바 결과는 다음과 같다. 1) Meal fed 시켰을때 사료섭취량은 ad libitum보다 $66{\sim}86%$로 저하되었으며, 증체량 역시 저하되었다. 그러나 casein 20%와 30% 수준에서는 ad libitum 사료섭취량의 85%에 불과했으나 동일한 증체량을 보였다. 2) 사료효율 및 에너지효율은 급식형태에 의한 통계적 유의차를 인정할 수 없었으며, 특히 casein 20%와 30% 수준에서는 사료및 에너지효율이 ad libitum 보다 me fed시켰을 때에 더 높았다. 3) 총에너지 섭취량, 가소화에너지 및 대사에너지는 ad libitum보다 meal fed시켰을 때에 약간 감소되는 경향이었고 에너지의 소화율이나 이용율은 동일했다. 4) 질소섭취량은 ad libitum보다 meal fed시켰을 때에 통계적으로 유의성 (P<0.05) 있게 적었음에도 불구하고, 질소균형과 질소보유율의 차이에는 유의성을 보이지 않았다. 질소균형 및 보유율은 단백질 10% 수준에서는 ad libitum에서 더 높은 경향이었으나 20%와 30% 수준에서는 오히려 meal fed 시켰을때에 더 높은 경향이었다. 5 ) 7주간의 시험완료 후 도체분석에 의한 체조성은 급식형태에 의한 유의차가 인정되지 않았다. 체지방량과 체수분량과는 음의 상관관계 (r = -0 .77)를 보였다. 이상의 결과에 의하면, casein의 경우, 20 % 와 30 % 수준에서 meal feeding에 의한 효과를 확인하였으며 이는 증체의 효과, 사료및 에너지의 이용을 증진의 효과, 질소보유율 증가의 효과, 체지방 축적의 경향을 보였다. 이 같은 경향은 casein군이 ISP군보다 더 효과적이었다.
Pluripotency of human embryonic stem cell (hESC) is one of the most valuable ability of hESCs for applying cell therapy field, but also showing side effect, for example teratoma formation. When transplant multipotent stem cell, such as mesnchymal stem cell (MSC) which retains similar differentiation ability, they do not form teratoma in vivo, but there exist limitation of cellular source supply. Accordingly, differentiation of hESC into MSC will be promising cellular source with strong points of both hESC and MSC line. In this study, we described the derivation of MSC like cell population from feeder free cultured hESC (hESC-MSC) using direct differentiation system. Cells population, hESC-MSC and bone marrow derived MSC (BM-MSC) retained similar characteristics in vitro, such as morphology, MSC specific marker expression and differentiation capacity. At the point of differentiation of both cell populations, differentiation rate was slower in hESC-MSC than BM-MSC. As these reason, to verify differentially expressed molecular condition of both cell population which bring out different differentiation rate, we compare the molecular condition of hESC-MSC and BM-MSC using 2-D proteomic analysis tool. In the proteomic analysis, we identified 49 differentially expressed proteins in hESC-MSC and BM-MSC, and they involved in different biological process such as positive regulation of molecular function, biological process, cellular metabolic process, nitrogen compound metabolic process, macromolecule metabolic process, metabolic process, molecular function, and positive regulation of molecular function and regulation of ubiquitin protein ligase activity during mitotic cell cycle, cellular response to stress, and RNA localization. As the related function of differentially expressed proteins, we sought to these proteins were key regulators which contribute to their differentiation rate, developmental process and cell proliferation. Our results suggest that the expressions of these proteins between the hESC-MSC and BM-MSC, could give to us further evidence for hESC differentiation into the mesenchymal stem cell is associated with a differentiation factor. As the initial step to understand fundamental difference of hESC-MSC and BM-MSC, we sought to investigate different protein expression profile. And the grafting of hESC differentiation into MSC and their comparative proteomic analysis will be positively contribute to cell therapy without cellular source limitation, also with exact background of their molecular condition.
관행의 일일공급체제를 격일공급체제로 전환할 경우 넙치의 사료 섭취량과 증체량이 어떤 변화를 보이는지 조사하고 습사료의 공급에 따른 질소와 인의 배설량을 측정 하기 위하여 펑균 체중 90 g의 넙치를 이용하여 양어장에서 8주간 사육실험을 수행하였다. 일일공급 (ED)구의 건물 섭취량은 펑균 107.7g으로 격일공급 (EO)구의 평균 섭취량 89.8 g에 비해 유의적으로 높게 나타났다. 반면, 사료전환효율은 각각 1.51 (ED) 및 1.47 (EO)로 유의적 차이가 나타나지 않았다. 마리당 증체량은 섭취량이 높았던 ED구에서 마리당 71.6 g으로 EO구 (61.1 g)보다 높게 나타났으나 유의적 차이는 발견되지 않았다 (P>0.05). 질소 증가량은 질소 섭취량이 유의적으로 높았던 ED구가 2.13g으로 EO구 (1.76 g)보다 유의적으로 높게 나타났다. 그러나 증체단위당 질소 배설량은 두 처리구 공히 약 113 g으로 동일하였다. 인 섭취량은 유의적인 차이를 보였으나 어체내 인 증가량은 공히 0.5 g으로 동일하였다. 증체 단위당 인 배설량은 ED구가 27.6 g으로 EO구 (26.0 g)에 비해 약간 높았으나 유의적 차이는 없었다. 에너지 섭취량은 ED구가 2523 kJ로 EO구 (2116 kJ)에 비해 유의적으로 높았으며 그 결과 체내 에너지 증가량도 ED구가 유의적으로 높았다. 그러나, 에너지 축적효율은 각각 20.6% (ED) 및 18.9% (EO)로 유의적인 차이가 발견되지 않았다. 이상의 결과는 관행의 일일공급체제를 격일공급체제로 전환할 수 있는 가능성을 제시하였다.
This study was conducted to develop an intrauterine inseminator (IUI) to deposit of frozen semen into uterus and to evaluate the results obtained after artificial insemination by IUI. Two Japanese spitzs (2 to 4 years of age) were used as semen donors. Semen was collected by manual masturbation into sterile glass collection tubes and separated into 3 fractions with only the sperm-rich fractions retained for further examination. Sperm motility >70%, sperm concentration of 200 to $400{\times}10^6 cells/ml$$\times$g for 5 min and poured out the suspended solution, and then diluted with 2 ml Tris-buffer which was consisted of 2.4 g Tris, 1.4 g citric acid, 0.8 g glucose, 0.1 $\mu\textrm{g}$/ml streptomycin, 100 IU/ml penicillin, 20 ml egg yolk to 100 ml mili-Q water (Ext I) or supplemented with 8 ml glycerol and 1 ml Equex STM paste to 100 rnl (Ext II). The diluted semen was cooled to 5$^{\circ}C$ in cold room, where the temperature in the sample reached 5$^{\circ}C$. Two h after beginning the cooling procedure, 2 ml of Ext II, also at 5$^{\circ}C$, was added and mixed by gently reversing the tubes several times during 1 h. The final sperm concentration for freezing was approximately $50{\times}10^6 cells/ml$. After equilibration, the semen was loaded into 0.5 ml straw and frozen on the liquid nitrogen vapour in styrofoam box. The straws were thawed at 7$0^{\circ}C$ for precisely 6 sec. After thawing of each straw, the frozen semen can survived over 50% motility. All the females were inseminated twice with 1 ml of $25{\times}10^6 cells/ml$
Orden, E.A.;Abdulrazak, S.A.;Cruz, E.M.;Orden, M.E.M.;Ichinohe, T.;Fujihara, T.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제13권12호
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pp.1659-1666
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2000
Two experiments were conducted to determine the effects of Leucaena leucocephala (leucaena) and Gliricidia sepium (gliricidia) supplementation on intake, digestion, outflow rates, microbial protein yield and live-weight changes in sheep fed with ammoniated rice straw (ARS). In experiment 1, three rumen cannulated Japanese Corriedale wether (mean body weight of 35.6 kg) in $3{\times}3$ Latin Square Design were used. Animals were fed ad libitum ARS alone, or supplemented with 200 g of either leucaena or gliricidia. In experiment 2, twenty-four growing native Philippine sheep with average body weight of $13.5{\pm}0.25kg$ were used in a completely randomized design (CRD) and offered similar diets to those of experiment 1. Supplementation increased total dry matter intake and nutrient digestibility except for fiber (p<0.05) without affecting ARS consumption. Nitrogen balance revealed that absorbed and retained N was significantly higher in leucaena and gliricidia. The significant improvement in N utilization and more digestible OM intake brought about by the inclusion of leucaena and gliricidia to ARS resulted in increased (p<0.05) microbial N yield. Efficiency of microbial N supply in supplemented group was not significantly different, but higher (p<0.05) than the 24.92 g N/kg DOMR for ARS group. Liquid outflow rate was 7.8 and 6.8 %/h, while the solid phase of rumen digesta was 4.4 and 3.8 %/h for the leucaena and gliricidia group respectively, which were significantly higher than 5.30 and 2.50 %/h in the control diet. The increase in total DMI resulted to higher (p<0.01) growth performance and efficient feed utilization. Average daily gain (ADG) was 19.3, 34.6 and 33.9 g/d for the ARS, leucaena and gliricidia respectively. It is therefore concluded that addition of leucaena and gliricidia to ARS in could increase nutrient intake and digestibility, subsequently improving N utilization and livestock performance.
Moon, H.K.;Han, In K.;Gentry, J.L.;Parmentier, H.K.;Schrama, J.W.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제12권2호
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pp.174-179
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1999
The effect of a chronic inflammation (cell-mediated immune response) on energy metabolism and growth performance was assessed in weanling piglets. Twenty four barrows of 4 wk of age were assigned to one of two immunization treatments : Control group [CON: immunized with Incomplete Freund's Adjuvant (lFA)] or Immunization group [IMMU: immunized with Complete Freund's Adjuvant (CFA)]. On d0, piglets were weaned and subcutaneously immunized at the medial side of the femur with 2 ml of IFA or CFA, respectively. Energy and nitrogen balances were measured per group during 13-d balance period, and total $(HP_{tot})$, activity-related ($(HP_{act})$) and non-activity-related $(HP_{cor})$ heat production were determined every 9-min by indirect calorimetry. Ig total titers to Mycobacterium butyricum, which is present in CFA, were higher (p<0.01) in IMMU than in CON on d13 (2.5 vs 1.8) and d20 (2.9 vs 1.8) after immunization. There were no differences (p>0.10) between treatments in rectal temperature, performance, feed intake, and availability and partitioning of energy during the balance period. Average daily feed intake was numerically higher in IMMU than in CON (0.34 vs 0.32 kg/d), but there was no difference (p>0.10) in metabolizability of the dietary energy between treatments. $HP_{act}/HP_{tot}$ was 16.24 and 16.89%, and retained energy was 251 and 268 $268\;kJ{\cdot}kg^{0.75}{\cdot}d^{-1}$ for CON and IMMU, respectively. Numerically, maintenance requirement of IMMU was even lower than that of CON $(419\;vs\;427\;kJ{\cdot}kg^{0.75}{\cdot}d^{-1})$. The present study suggests that a chronic inflammation has no effect on energy metabolism and growth performance, in spite of the difference in systemic antibody responses. The reason was considered to be due to locally induced immune response, resulting from the possible encapsulation at the site of injection, and/or to a low systemic immune stress which is within a functionally acceptable physiological range for the piglets.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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