Antimicrobial activity of the essential oil extracted from plants Artemisia princeps var. orientalis, Thuja orientalis and Chamaecyparis obtusa were tested against selected pathogenic bacteria and fungi of fish. At the concentrations above 500ppm, ingibitory effect of the oil of A. princeps var. orientalis was at its peak against Aeromonas hydrophila ATCC 14715, A. hydrophila CF-2, A. salmonicida ATCC 14174 and A. salmonicida EL-1 but the bacteria Edwardsiella tarda KBF-1, Vibrio anguillarum ATCC19264, V. ordalii ATCC33509 and Streptococcus sp. were insensitive. Likewise, the oil extract of T. orientalis showed the highest inhibitory activity against V. ordalii ATCC33509, E. tarda ECK-1, and E. tarda KBF-1 at 300ppm; however the activity was highest at 500ppm or A. hydrophila ATCC14715, A. hydrophila CF-2, A. salomonicida ATCC14174, A. salmonicida EL-1 and Streptococcus sp. SF-1. With increasing dose of C. obtusa oil, the inhibitory activity became more and more effective against A. hydrophila CF-2, A. salomonicida ATCC14174, E. tarda ECK-1 and Streptococcus sp. SF-1, but A. hydrophila ATCC14174, A. salmonicida EL-1, E. tarda KBF-1, V. anguillarum ATCC19264, V. ardalii ATCC33509 and gram positive bacteria (Streptococcus sp.) were somewhat resistant. A. princeps var. orientalis, T. orientalis and C. obtusa were also tested against Saprolegnia sp. at the oil concentrations of 10, 100, 500, 1,000, 1,500 and 2,000ppm. The inhibitory effect of the oil on the inhibit the mycelial growth of Saprolegnia sp. at 10ppm and completely inhibited at over 500ppm.
The optimal concentration of ethanol to separate a high quantity of propolis was $60\%$ but that for the best flavonoids extraction was $80\%$ We compared the yields of propolis from different countries. In this study we used $60\%$ ethanol concentration as a standard. The yield of propolis was proportional to the contents of flavonoids. Namely, Polish propolis which showed the highest yield with $56\%$ by the extraction with $60\%$ ethanol revealed also the highest flavonoids content with $3.49\%$ among all the samples tested The major constituents of propolis differed from country to country. It has been suggested that the different geographical origin influenced the efficacy and the constituents of propolis. Antibacterial activity of ethanol extracted propolis from different countries was tested against 6 microbial strains of type cultures including Gram-positive (Staphylococcus aureus, Streptococcus uberis, Streptococcus agalactiae) and Gram- negative bacteria (Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris and E coli) in vitro. Propolis extract showed anti-microbial activity against all the tested bacterial strains. In addition, propolis was sensitive to E coli which was resistant to broad spectrum antibiotics like ampicillin. These results showed that propolis may substituted for commercial antibiotics. The efficiency of anti-microbial activity of the propolis was slightly higher in $80\%$ than $97\%$ ethanol extract.
Sepsis is an acute inflammatory response that leads to life-threatening complications if not quickly and adequately treated. Cytolysin, hemolysin, and pneumolysin are toxins produced by gram-positive bacteria and are responsible for resistance to antimicrobial drugs, cause virulence and lead to sepsis. This work assessed the effects of aloe-emodin (AE) and photodynamic therapy (PDT) on sepsis-associated gram-positive bacterial toxins. Standard and antibiotic-resistant Enterococcus faecalis, Staphylococcus aureus, and Streptococcus pneumonia bacterial strains were cultured in the dark with varying AE concentrations and later irradiated with 72 J/cm-2 light. Colony and biofilm formation was determined. CCK-8, Griess reagent reaction, and ELISA assays were done on bacteria-infected RAW264.7 cells to determine the cell viability, NO, and IL-1β and IL-6 pro-inflammatory cytokines responses, respectively. Hemolysis and western blot assays were done to determine the effect of treatment on hemolysis activity and sepsis-associated toxins expressions. AE-mediated PDT reduced bacterial survival in a dose-dependent manner with 32 ㎍/ml of AE almost eliminating their survival. Cell proliferation, NO, IL-1β, and IL-6 cytokines production were also significantly downregulated. Further, the hemolytic activities and expressions of cytolysin, hemolysin, and pneumolysin were significantly reduced following AE-mediated PDT. In conclusion, combined use of AE and light (435 ± 10 nm) inactivates MRSA, S. aureus (ATCC 29213), S. pneumoniae (ATCC 49619), MDR-S. pneumoniae, E. faecalis (ATCC 29212), and VRE (ATCC 51299) in an AE-dose dependent manner. AE and light are also effective in reducing biofilm formations, suppressing pro-inflammatory cytokines, hemolytic activities, and inhibiting the expressions of toxins that cause sepsis.
Kim, Byeollee;Han, So-Ra;Lamichhane, Janardan;Park, Hyun;Oh, Tae-Jin
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.29
no.7
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pp.1144-1154
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2019
There have been several studies regarding lichen-associated bacteria obtained from diverse environments. Our screening process identified 49 bacterial species in two lichens from the Himalayas: 17 species of Actinobacteria, 19 species of Firmicutes, and 13 species of Proteobacteria. We discovered five types of strong antimicrobial agent-producing bacteria. Although some strains exhibited weak antimicrobial activity, NP088, NP131, NP132, NP134, and NP160 exhibited strong antimicrobial activity against all multidrug-resistant strains. Polyketide synthase (PKS) fingerprinting revealed results for 69 of 148 strains; these had similar genes, such as fatty acid-related PKS, adenylation domain genes, PfaA, and PksD. Although the association between antimicrobial activity and the PKS fingerprinting results is poorly resolved, NP160 had six types of PKS fingerprinting genes, as well as strong antimicrobial activity. Therefore, we sequenced the draft genome of strain NP160, and predicted its secondary metabolism using antiSMASH version 4.2. NP160 had 46 clusters and was predicted to produce similar secondary metabolites with similarities of 5-100%. Although NP160 had 100% similarity with the alkylresorcinol biosynthetic gene cluster, our results showed low similarity with existing members of this biosynthetic gene cluster, and most have not yet been revealed. In conclusion, we expect that lichen-associated bacteria from the Himalayas can produce new secondary metabolites, and we found several secondary metabolite-related biosynthetic gene clusters to support this hypothesis.
The growth inhibition of enteropathogenic Escheriohia coli $A_2$and Escherichia coli G$_7$, causing the diarrhea in piglets, by the organic acid producing bacteria was studied in vitro. The metabolites of the organic acid bacteria, such as lactic acid, acetic acid inhibited the growth of E. coli $A_2$and E. coli G$_7$ in BL medium. The more the organic acid producing bacteria have ability to produce the organic acids, the higher these bacteria excelled the inhibitory efficacy against enteropathogenic E. coli. Among the strains examined, Lactobacillus casei Y and Streptococcus faecium C showed relatively strong growth inhibition against enteropathogenic E. coli.. When the organic acid producing bacteria and the enteropathogenic E. coli were incubated simultaneously in BL medium, bacteriostasis of E. coli was observed when the pH of BL culture was lowered to 5.0, and bacteriocidal effect was observed when the pH became Bess than 4.5, E. coli. $A_2$was more resistant to the organic acid bacteria than E. coli G$_7$.
The majority of freshwater ornamental fish are imported and distributed domestically, causing high risk of exposure to exotic pathogens and drug resistant bacteria in Korea. Aeromonas hydrophila is known as a common species of fresh water bacteria and opportunistic fish pathogen, as well as a species causing zoonotic infection. In this study, we isolated motile aeromonads from various imported freshwater ornamental fish and studied the characters of the isolates. Imported freshwater ornamental fish were purchased on day 1 after the fish were deposited in the aquarium. Bacteria were isolated from the liver, kidney and spleen of fish using 0.5% NaCl containing tryptic soy agar medium. Bacteria were grouped on the basis of their morphological characteristics. The colonies with clear zone on starch-ampicillin agar (SA agar) were tentatively identified as Aeromonas spp. Two hundred and twenty-six strains, about 70% of total isolates were assumed to be Aeromonas spp. Nine isolates were further identified based on the result of the API 20E test and PCR using primers specific for A. hydrophila 16S rRNA gene. The isolates were identified as A. hydrophila and the API 20E test showed differences in trisodium citrate, D-sucrose, D-melibiose, amygdalin and L-arabinose availability between the nine isolates and standard A. hydrophila. The susceptibilities of the isolated bacteria to 10 antibacterial agents were confirmed by the disk diffusion method. Isolated strains were found to be resistant to amoxicillin and ampicillin and sensitive to florfenicol. However, 7 isolates showed multiple drug resistances to erythromycin, oxytetracycline, nalidixic acid etc. Pathogenicity of the isolates was determined by the artificial challenge test on goldfish (Carassius auratus). Three isolates caused 60 ~ 80% mortality in goldfish within 5 days after the initiation of challenge. These results indicate that multiple drug resistant, highly pathogenic and exotic A. hydrophila can spread to domestic aquarium and the preventive treatment of fish before sale is necessary.
Yoo Min Ho;Jeong Joon Beom;Kim Eun Heui;Lee Hyoung Ho;Jeong Hun Do
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.35
no.2
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pp.115-121
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2002
To develop a new method of conjugation and to determine the distribution of R plasimds, we isolated multi-drug resistant strains from fish pathogenic bacteria in the farms of south and east seacoasts of Korea. Out of the 134 isolates examined, 10 showed resistance to chloramphenicol, tetracycline, streptomycin, ampicillin, colistin, nalidixic acid, oxolinic acid and kanamycin. One out of 10 multi-drug resistance bacteria, Vibfio damsela JE1 (V. damsela JE1), contained transferable R plasmid of chlorarnphenicol- tetracycline resistance genes and other nucleic acids encoding ampicillin and kanamycin resistance. The presence of the R plasmid was confirmed by conjugation using the chromocult medium (CC) as a selective and differential medium for transconiugants with identification based on the growth or colors of the colonies. The frequency of R plasmid transfer with filter mating method was come out much higher than that of broth mating method and appeared to be dependent upon the mating time and temperature. The optimum conditions for filter mating method were found to be 30$^{\circ}C$ and 24hrs as mating temperature and period, respectively, Moreover, donor cells with R plasmid, both isolate and standard bacteria, were shown to have an ability to transfer the plasmid against Escherichia coli K-12 HB101 (E. coli HB101) and Edwardsiella tarda (E. tarda) RE14 at fairly high frequencies, finally, we isolated 3 isolates of Sphingomonas sp., carrying R plasmid from 12 multi-drug resistant bacteria in normal microflora of the flounder (Paralichthys olivaceus) group used for the isolation of V emsela JE1 four months before. The same size and gene transfer chayateristics of R plasimds with those of V damsela JE1 confirmed that normal microflora have the reservoir activity for R plasmid in natural aquatic environment.
Park, Sera;Lee, Euntaek;So, Hye Jin;Yoo, Ree Nar;Lee, Jina
Pediatric Infection and Vaccine
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v.28
no.2
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pp.82-91
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2021
Background: The purpose of this study was to investigate the association between antibiotic use and the antimicrobial resistance of gram-negative bacteria isolated from blood cultures in a pediatric population. Methods: From January 2014 to June 2018, the antibiotic resistance pattern of Acinetobacter baumannii, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, and Pseudomonas aeruginosa obtained from bacteremic patients aged ≤18 years hospitalized at Asan Medical Center Children's Hospital was analyzed and the parenteral antibiotic consumption data were retrieved. Results: During the study period, the blood culture was positive for K. pneumoniae (6.4%; 105/1,628), E. coli (5.6%; 91/1,628), P. aeruginosa (3.3%; 54/1,628), and A. baumannii (2.5%; 41/1,628), and the extended-spectrum antibiotic resistance rate of gram-negative bacteria was consistently high. The overall resistance rate of E. coli and K. pneumoniae to extendedspectrum cephalosporin was 49.3% and 54.4%, respectively. Carbapenem-resistant E. coli was first detected in 2014; its overall resistance rate to carbapenem was 5.3%. There was a linear correlation between the usage of 3rd generation cephalosporin and the resistance of A. baumannii (r2=0.96, P=0.004) and carbapenem usage and the resistance of K. pneumoniae (r2=0.79, P=0.045). Conclusions: A positive linear correlation was observed between antibiotic resistance and the corresponding antibiotic usage in 3rd generation cephalosporin resistant A. baumannii and carbapenem resistant K. pneumoniae. The judicious use of antibiotics in healthcare settings is important to minimize selection for extended-spectrum β-lactamase (ESBL) and carbapenem resistance in gram-negative bacteria.
Bacterial dermatitis is common disease that is necessary to treat with antibiotics. In recent, antibiotic-resistant bacteria is being increased in worldwide. The purpose of the present study was to evaluate the prevalence of resistant genes in Staphylococcus (S.) pseudintermedius isolated from dogs, and to compare the resistant gene profile with the result of antibiotic disc diffusion test. A total of seven S. pseudintermedius was included in the study. Bacterial identification was performed by 16S ribosomal RNA gene sequence analysis. S. pseudintermedius isolates had more than one antibiotic resistant gene (mecA, blaZ and aac(6')/aph(2"). While all isolates were PCR positive to blaZ gene, only two isolates were resistant to amoxicillin/clavulanate. Among five isolates harboring gentamicin resistance, one isolate was negative to aac(6')/aph(2")-targeted PCR. Taken together, the results suggest that resistant gene-targeted PCR and disc diffusion test are complementary to detect antibiotic resistance.
Bacterial blotch caused by Pseudomonas tolaasii is one of the major diseases of oyster mushroom, Pleurotus ostreatus. Application of bacteriophages is a very useful tool to decrease the density of pathogens and it has been successful to making disease-free cultivation area, known as phage therapy. Effect of phages on pathogen sterilization is very limited to the specific host strains. Minor variations of the host strains may cause changes in phage sensitivity. The phage-resistant strains of P. tolaasii were isolated and their pathogenic characters were investigated to improve the effectiveness of phage therapy. In the phylogenetic analysis, both phage-resistant strains and the corresponding host strains were identical based on the sequence comparison of 16S rRNA genes. The pathogenic characters, such as hemolytic activity and brown blotch formation, were measured on the phage-resistant strains and no correlation between phage-resistance and pathogenic characters was observed. Nevertheless, pathogenic characters were sometimes changed in the phage-resistant strains depending on the host strains. In order to make the phage therapy successful, the bacteriophages having a wide host range should be isolated.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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