The purpose of this study was to investigate the probiotic properties of lactic acid bacterial strains isolated from human feces. The properties were tested on the basis of guideline for probiotic selection protocol such as tolerance for acid or bile salt, autoaggregation, antibiotic resistance, and antimicrobial activity. Total 25 lactic acid bacteria were isolated from human feces, and their antibacterial activity was tested against Staphylococcus aureus, Escherichia coli, E. coli O157:H7, Vibrio parahaemolyticus, V. alginolyticus using an agar diffusion assay. Among them, 4 selected strains were identified by analysis of their 16S rRNA, as Lactobacillus rhamnosus MG316, L. acidophilus MG501, L. reuteri MG505, and L. gasseri MG570. Results show that resistance to low pH and bile salts. Also, the selected strains were resistant to bile acid up to 3% and their autoaggregation rates were as high as 60%. All strains tested were resistance to nalidixic acid and kanamycin.
Pseudomonas spp. are Gram-negative psychrophilic bacteria, which can proliferate at refrigeration temperature. The bacteria produce heat-stable enzymes that can degrade fat and protein in foods. Hence, Pseudomonas spp. are related to the spoilage of milk, dairy products, and meat products under cold storage, causing economic loss. In the food industry, various methods have been used to remove bacteria including Pseudomonas spp. in food-related conditions, but they can be resistant to antimicrobials and sanitizers because they form biofilms regulated by quorum sensing (cell density-dependent cell-to-cell signaling). Since Pseudomonas cells in biofilms can cross-contaminate foods resulting in food spoilage and the survival of food-borne pathogens in food-related conditions, efficient decontamination technology and microbiological criteria should be established to reduce the occurrence of food spoilage by Pseudomonas spp.
The purpose of this study was to isolate and characterize bacteriocin-producing bacteria against Clostridium perfringens from domestic animals to determine their usefulness as probiotics. The feces of cattle and chicken were used as sources to isolate bacteriocin-producing bacteria using the spot-on-lawn method. In total, 900 bacterial stains were isolated from domestic animal feces, and 19 strains were finally selected after determining the inhibitory activity against the pathogenic indicator C. perfringens KCTC 3269. Eighteen strains of Bacillus subtilis and one strain of Brevibacillus parabrevis were identified by 16s rRNA sequencing. Most of the bacterial strains isolated were resistant to 0.5% bile salts and remained viable after 2 h at pH 3.0. Additionally, some B. subtilis strains showed strong inhibitory activity against Listeria monocytogenes. We isolated and screened B. subtilis strains CB 153 and CB 189 from cattle and B. subtilis MSC 156 and B. parabrevis MSC 164 from chickens using probiotic selection criteria such as inhibition activity against C. perfringens and tolerance to acid and bile salts. The isolated bacteriocin-producing bacteria and/or bacteriocin have the potential to be used as probiotics in the livestock industry.
In eukaryotic cells, various proteins are anchored to the plasma membrane through glycosylphosphatidylinositol (GPI). To study the biosynthetic pathways and modifications of GPI, various mutant cells have been isolated from the cells of Chinese hamster ovaries (CHO) supplemented with several exogenous genes involved in GPI biosynthesis using aerolysin, a toxin secreted from gram-negative bacterium Aeromonas hydrophila. Alpha toxin from Gram-positive bacterium Clostridium septicum is homologous to large lobes (LL) of aerolysin, binds GPI-anchored proteins and possesses a cell-destroying mechanism similar to aerolysin. Here, to determine whether alpha toxins can be used as an isolation tool of GPI-mutants, like aerolysin, CHO cells stably transfected with several exogenous genes involved in GPI biosynthesis were chemically mutagenized and cultured in a medium containing alpha toxins. We isolated six mutants highly resistant to alpha toxins and deficient in GPI biosynthesis. By genetic complementation, we determined that one mutant cell was defective of the second subunit of dolichol phosphate mannose synthase (DPM2) and other five cells were of a putative catalytic subunit of inositol acyltransferase (PIG-W). Therefore, C. septicum alpha toxins are a useful screening probe for the isolation of various GPI-mutant cells.
Background A patient's overall condition sometimes does not allow for the complete removal of a dead eschar or injured slough in cases involving a pressure-injury skin lesion. This frequently occurs in clinical practice, particularly in bedridden and older patients receiving home care or intensive care. Even after debridement, it is also difficult to manage open exudative wounds in these patients. Nevertheless, when a mature or immature eschar is treated without proper debridement, liquefaction necrosis underneath the eschar or slough tends to reveal a large, open wound with infectious exudates. We hypothesized that if the presence of any bacteria under the eschar can be evaluated and the progression of the presumed infection of the subeschar can be halted or delayed without creating an open wound, the final wound can be small, shallow, and uninfected. Methods Using a punch instrument, we performed 34 viable subeschar tissue cultures with a secure junction between the eschar and the normal skin. Results The bacterial study had 29 positive results. Based on these results and the patient's status, appropriate antibiotics could be selected and administered. The use of suitable antibiotics led to relatively shallow and small exposed wounds. Conclusions This procedure could be used to detect potentially pathogenic bacteria hidden under black or yellow eschars. Since subeschar infections are often accompanied by multidrug-resistant bacteria, the early detection of hidden infections and the use of appropriate antibiotics are expected to be helpful to patients.
Heat treatment is the most popular processing technique in the dairy industry. Its main purpose is to destroy the pathogenic and spoilage bacteria in order to ensure that the milk is safe throughout its shelf life. The protease and lipase that are present in raw milk might reduce the quality of milk. Plasmin and protease, which are produced by psychrotrophic bacteria, are recognized as the main causes of the deterioration in milk flavor and taste during storage. The enzymes in raw milk can be inactivated by heat treatment. However, the temperature of inactivation varies according to the type of enzyme. For example, some Pseudomonas spp. produce heat-resistant proteolytic and lipolytic enzymes that may not be fully inactivated by the low temperature and long time (LTLT) treatment. These types of enzymes are inhibited only by the high temperature and short time (HTST) or ultra-high temperature (UHT) treatment of milk.
Lactic acid and its derivatives are widely used in the food, pharmaceutical, and cosmetic industries. It is also a major raw material for the production of poly-lactic acid (PLA), a biodegradable and environmentally friendly polymer and a possible alternative to synthetic plastics derived from petroleum. For PLA production by new strains of lactic acid bacteria (LAB), we screened LAB isolates from shellfish. A total of 51 LAB were isolated from 7 types of shellfishes. Lactic acid production of individual isolates was examined using high-performance liquid chromatography using a Chiralpak MA column and an ultraviolet detector. Lactobacillus plantarum T-3 was selected as the most stress-resistant strain, with minimal inhibition concentrations of 1.2 M NaCl, 15% ethanol, and 0.0020% hydrogen peroxide. In a 1 L fermentation experiment, $\small{D}$-lactic acid production of 19.91 g/L fermentation broth was achieved after 9 h cultivation, whereas the maximum production of total lactic acid was 41.37 g/L at 24 h.
This study was performed to analyze in vitro and in vivo activities of LCB01-0183, a new oxazolidinone, against clinical isolates of bacteria. In vitro antibacterial activity of LCB01-0183 was tested by the two fold agar dilution method. In vivo activity of LCB01-0183 was determined against systemic infections in mice. LCB01-0183 showed most potent activity among the test compounds against clinical isolates of Gram-positive bacteria. Furthermore, the protective activity of LCB01-0183 was very effective against systemic infections in mice by oral or subcutaneous administration. In time kill study, LCB01-0183 showed a bacteriostatic activity during 24 hours. LCB01-0183 had potent in vitro and in vivo activity against Gram-positive bacteria including drug-resistant strains.
Otitis externa (OE) is an inflammatory disease of the externa auditory meatus that occurs commonly in dogs. Antimicrobial susceptibility tests should be performed in case of chronic OE for successful treatment. In this study, identification and antimicrobial susceptibility test of bacteria isolated from dogs with chronic OE was performed. From 60 dogs with chronic OE, 60 bacterial species were identified. The most frequently identified species were Staphylococcus spp. (51%), followed by Pseudomonas spp. (15%) and Enterococcus spp. (14%). A single bacterial infection and multiple bacterial infections were observed in 67.5% and 32.5%, respectively. Staphylococcus spp. was susceptible to imipenum. Pseudomonas spp. was found to be susceptible to amikacin, cefepime, imipenum and piperacillin-tazobactam. Enterococcus spp. was susceptible to ampicillin-sulbactam, imipenum and piperacillin-tazobactam. Imipenum was highly susceptible antibiotic against both Gram-positive and negative bacteria whereas aztreonam and vancomycin were highly resistant. These results could suggest the optimal choice of antimicrobial agents for canine OE treatment.
Enterobacter sakazakii, Salmonella typhimurium. and Bacillus cereus were evaluated on inoculated infant formula by gamma irradiation treatment as a method to provide microbial safety. The infant formula inoculated with the major pathogenic bacteria was treated at irradiation dose of 0, 3, 5, and 10 kGy, respectively. After treatment, the samples were individually packaged and stored at $20^{\circ}C$. Microbiological data during storage represented that the populations of E. sakazakii, S. typhimurium, and B. cereus were reduced with the increase of irradiation dose by 4 to 5 log reductions. In particular, E. sakazakii, S. typhimurium. and B. cereus were eliminated at 10, 5, and 3 kGy, respectively. E. sakazakii was the most radiation-resistant, while B. cereus was the least. Our results represent that gamma irradiation below 10 kGy should eliminate the growth of the major pathogenic bacteria in infant formula during storage.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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