This study was performed to comprehend the plasma proteins expressed specifically during early pregnancy in pregnant or non-pregnant Hanwoo using proteomic analysis technique. Plasma samples (0, 2, 3, 4, 7, and 11 weeks after AI) were obtained from pregnant (P, n=3) or non-pregnant (NP, n=4) Hanwoo, respectively. To evaluate proteins differentially expressed, 2-dimensional electrophoresis (2DE) was conducted. Normalized protein spots were selected for the significant expression variation deviated over two fold in its expression level between two groups; Molecular functions of the proteins were DNA binding, protein binding, hemoglobin binding, ferrochelatase and transporter activity and arylestera, respectively. According to western blotting, haptoglobin was specifically expressed only in NP group during early pregnancy; however, paraoxonase 1 was highly expressed in pregnant group. Based on these results, pregnancy was maintained successfully by the activation of specific plasma proteins associated with immune system and antioxidant regulation during early pregnancy in Hanwoo.
Sexual maturity in poultry is controlled by a complex neural circuit located in the basal forebrain, which integrates the central and peripheral signals to activate hypothalamic gonadotrophin-releasing hormone (GnRH) secretion. This study demonstrated the changes of GnRH-I, POMC and NPY mRNA transcription in hypothalamus and IGF-I and leptin levels in serum of Shaoxing ducks during puberty. Body weight increased progressively from d30 to d120 and at d120 the flock reached 5% of laying rate. A significant upregulation of hypothalamic GnRH-I mRNA expression was observed from d60, reaching the peak at d120. POMC and NPY mRNA expression in hypothalamus showed a similar pattern, which increased from d30 to d60, followed by a significant decrease towards sexual maturity. Serum IGF-I levels exhibited two peaks at d30 and d120, respectively. Serum leptin displayed a single peak at d90. The results indicate that the down-regulation of POMC and NPY genes in hypothalamus coincides with the up-regulation of GnRH-I gene to initiate sexual maturation in ducks. In addition, peripheral IGF-I and leptin may relay the peripheral metabolic status to the central system and contribute to the initiation of the reproductive function in ducks.
Lee, Haewon;Ahn, Deborah Y.;Choi, Soyoung;Kim, Youngchan;Choi, Hyunju;Park, Sang Min
Journal of Preventive Medicine and Public Health
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v.46
no.3
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pp.118-126
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2013
We investigated the major trends in health aid financing in the Democratic People's Republic of Korea (DPRK) by identifying the primary donor organizations and examining several data sources to track overall health aid trends. We collected gross disbursements from bilateral donor countries and international organizations toward the DPRK according to specific health sectors by using the Organization for Economic Cooperation and Development creditor reporting system database and the United Nations Office for the Coordination of Humanitarian Affairs financial tracking service database. We analyzed sources of health aid to the DPRK from the Republic of Korea (ROK) using the official records from the ROK's Ministry of Unification. We identified the ROK, United Nations Children's Fund (UNICEF), World Health Organization (WHO), United Nations Population Fund (UNFPA), and The Global Fund to Fight AIDS, Tuberculosis and Malaria (GFATM) as the major donor entities not only according to their level of health aid expenditures but also their growing roles within the health sector of the DPRK. We found that health aid from the ROK is comprised of funding from the Inter-Korean Cooperation Fund, private organizations, local governments, and South Korean branches of international organizations such as WHO and UNICEF. We also distinguished medical equipment aid from developmental aid to show that the majority of health aid from the ROK was developmental aid. This study highlights the valuable role of the ROK in the flow of health aid to the DPRK, especially in light of the DPRK's precarious international status. Although global health aid from many international organizations has decreased, organizations such as GFATM and UNFPA continue to maintain their focus on reproductive health and infectious diseases.
In this study, to construct more effective retrovirus system, we compared four internal promoters (RSV: Rous sarcoma virus, UbC: Ubiquitin C, β-actin, CMV: human cytomegalovirus) in the retrovirus vector by measuring GFP (green fluorescent protein) expression. The effect of WPRE (woodchuck hepatitis virus posttrans-criptional regulatory element) sequence on transgene expression was also investigated. Experiments were conducted with cells derived from three different species (human, pig and chicken) and evaluated the activity of each promoter and the effect of WPRE sequence by fluorometry and Western blotting. In all cells tested, RSV and CMV promoters were superior to UbC and β-actin promoters, and RSV promoter was the best one in chicken cells. The boosting effect of WPRE sequence on GFP expression was evident in human and porcine cells but not in chicken cells.
The overexpression of Phosphoprotein Enriched in Astrocytes (PEA15) gene is commonly found in human diabetic patients. The overexpression of this gene in skeletal muscle and fat tissues have been reported to cause insulin resistance, thereby impairing insulin stimulated glucose uptake. We introduced a gene of mouse PEA15 (mPEA15) and enhanced green fluorescent protein (EGFP) into fertilized one cell pig zygotes using microinjection, and produced a piglet that showed overexpression of mPEA15 in the muscle tissues and expression of EGFP in the ear tissues and hooves. RT-PCR RFLP, southern blot and FISH analysis showed that the tissues carried the transgene. Real-time RT-PCR and western blots demonstrated that PEA15 gene was overexpressed in the various tissues and muscle tissues, respectively. These fads suggest that expression vector system is normally expressed in the transgenic (TG) pigs. To use as animal diseases model for type 2 diabetes, further study is necessary to confirm whether diabetes occur in these TG pigs, especially insulin resistance.
To establish an evaluation system of aquatic toxicity of chemicals at no-effect level, flow through and early life stage toxicity test were performed on a freshwater fish, the medaka (Oryzias latipes). The characteristics of medaka as a bioassay organism for the chronic toxicity test were discussed. Maximum acceptable toxicant concentration(MATC) of butachlor for the madaka in soft water was estimated using survival, growth, and reproduction as indicators of toxic effects. During a 3-month period, the fry of medaka were exposed to butachor concentrations ranging from 0.16 to 0.0l mg/liter and the DO concentration, temperature, and pH in the exposure chamber were measured to check the test condition. The highest concentration showed slight decrease of growth rate in medaka and reduced hatchability of spawning egg. Survival, growth, and reproductive success of adults in butachlor concentration of 0.04 and 0.01 mg/liter were not different from those of the control. The MATC was estimated to be between 0.04 and 0.16 mg/liter for medaka.
The complement system is a part of the natural immune regulation mechanism against invading pathogens. Complement activation from three different pathways (classical, lectin, and alternative) leads to the formation of C5-convertase, an enzyme for cleavage of C5 into C5a and C5b, followed by C6, C7, C8, and C9 in membrane attack complex. The C9 is the last complement component of the terminal lytic pathway, which plays an important role in lysis of the target cells depending on its self-polymerization to form transmembrane channels. To address the association of C9 with traits related to disease resistance, the complete porcine C9 cDNA was comparatively sequenced to detect single nucleotide polymorphisms (SNPs) in pigs of the breeds Hampshire (HS), Duroc (DU), Berlin miniature pig (BMP), German Landrace (LR), Pietrain (PIE), and Muong Khuong (Vietnamese potbelly pig). Genotyping was performed in 417 $F_2$ animals of a resource population (DUMI: $DU{\times}BMP$) that were vaccinated with Mycoplasma hyopneumoniae, Aujeszky diseases virus and porcine respiratory and reproductive syndrome virus at 6, 14 and 16 weeks of age, respectively. Two SNPs were detected within the third exon. One of them has an amino acid substitution. The European porcine breeds (LR and PIE) show higher allele frequency of these SNPs than Vietnamese porcine breed (MK). Association of the substitution SNP with hemolytic complement activity indicated statistically significant differences between genotypes in the classical pathway but not in the alternative pathway. The interactions between eight time points of measurement of complement activity before and after vaccinations and genotypes were significantly different. The difference in hemolytic complement activity in the both pathways depends on genotype, kind of vaccine, age and the interaction to the other complement components. These results promote the porcine C9 (pC9) as a candidate gene to improve general animal health in the future.
This bio-acoustic study was aimed at classifying the different porcine wasting diseases through sound analysis with emphasis given to differences in the acoustic footprints of coughs in porcine circo virus type 2 (PCV2), porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) virus and Mycoplasma hyopneumoniae (MH) - infected pigs from a normal cough. A total of 36 pigs (Yorkshire${\times}$Landrace${\times}$Duroc) with average weight ranging between 25-30 kg were studied, and blood samples of the suspected infected pigs were collected and subjected to serological analysis to determine PCV2, PRRS and MH. Sounds emitted by coughing pigs were recorded individually for 30 minutes depending on cough attacks by a digital camcorder placed within a meter distance from the animal. Recorded signals were digitalized in a PC using the Cool Edit Program, classified through labeling method, and analyzed by one-way analysis of variance and discriminant analysis. Input features after classification showed that normal cough had the highest pitch level compared to other infectious diseases (p<0.002) but not statistically different from PRRS and MH. PCV2 differed statistically (p<0.002) from the normal cough and PRRS but not from MH. MH had the highest intensity and all coughs differed statistically from each other (p<0.0001). PCV2 was statistically different from others (p<0.0001) in formants 1, 2, 3 and 4. There was no statistical difference in duration between different porcine diseases and the normal cough (p>0.6863). Mechanisms of cough sound creation in the airway could be used to explain these observed acoustic differences and these findings indicated that the existence of acoustically different cough patterns depend on causes or the animals' respiratory system conditions. Conclusively, differences in the status of lungs results in different cough sounds. Finally, this study could be useful in supporting an early detection method based on the on-line cough counter algorithm for the initial diagnosis of sick animals in breeding farms.
Lee Eunyoung;Rho Jeung-yon;Yu Kwon;Paik Sang-Gi;Lee Kyung-Kwang;Han Yong-Mahn
Reproductive and Developmental Biology
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v.29
no.2
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pp.93-99
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2005
Human embryonic stem cells (hESCs) derived from the inner cell mass of blastocysts have the ability to renew themselves and to differentiate into cell types of all lineage. The present study was carried out to investigate whether the Wnt signaling pathway is related to maintaining self-renewal of hESCs. Glycogen Synthase Kinase 3 (GSK-3) inhibitor, BIO ((2'Z,3'E)-6-Bromoindirubin-3'-oxime) was treated to Miz-hES1 line for activation of Wnt signaling pathway. BIO-nontreated hESCs (control) and BID-treated hESCs were cultured for 5 days in the modified feeder-free system. During the culture of hESCs, differences were observed in the colony morphology between 2 groups. Controls were spread outwards whereas BIO-nontreated hESCs were clumped in the center and the differentiated cells were spreading outwards in the edges. The results of stem cell specific marker staining indicated that control were differentiated in large part whereas BIO-treated hESCs maintain self-renewal in the center of the colony. The results of lineage marker staining suggested that outer cells of the hESC colony were differentiated to the neuronal progenitor cells in both control and BIO-treated hESC. These results indicate that Wnt signaling is related to self-renewal in hESCs. In addition, control group showed higher composition of apoptotic cells $(23.76\%)$ than the BID-treated group $(5.59\%)$. These results indicate that BIO is effective on antapoptosis of hESCs.
Tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand (TRAIL) is a well-known inducer of apoptotic cell death in many tumor cells. 1RAIL is expressed in human placenta, and cytotrophoblast cells express 1RAIL receptors. However, the role of TRAIL in human placentas and cytotrophoblast cells is not. well understood. In this study a trophoblast cell line, JEG-3, was used as a model system to examine the effect of TRAIL. on key intracellular signaling pathways involved in the control of trophoblastic cell apoptosis and survival JEG-3 cells expressed receptors for 1RAIL, death receptor (DR) 4, DR5, decoy receptor (OcR) 1 and DeR2. Recombinant human TRAIL (rhTRAIL) did not have a cytotoxic effect determined by MIT assay and did not induce apoptotic cell death determined by poly-(ADP-ribose) polymerase cleavage assay. rhTRAIL induced a rapid and transient nuclear translocation of nuclear $factor-{\kappa}B(NF-{\kappa}B)$ determined by immunoblotting using nuclear protein extracts. rhTRAIL rapidly activated extracellular signal-regulated protein kinase (ERK) 1/2 as determined by immnoblotting for phospho-ERK1/2. However, c-Jun N-terminal kinase (JNK), p38 mitogen-activated protein kinase (p38MAPK) and Akt (protein kinase B) were not activated by rhTRAIL. The ability of 1RAIL to induce $NF-{\kappa}B$ and ERK1/2 suggests that interaction between TRAIL and its receptors may play an important role in trophoblast cell function during pregnancy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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