The neuropeptide substance P(SP) has been implicated in the mediation of inflammation and immune-mediated disease such as arthritis. Recently, it was reported that SP was markedly increased around the blood vessels in inflamed gingiva as well as in close association with the inflammatory cell infiltrate. These results support that SP may contribute to the pathophysiology of neuronal inflammation in human periodontal tissues. SP may regulate inflammatory/immune responses by stimulating the proliferation of human T cells, differentiation and antibody-secreting potential of B cells, macrophage respiratory burst, connective tissue proliferation, and the secretion of cytokines from monocytes and T cells. Here, I studied potential role of SP as a costimulatory chemical signal in inflammatory/immune responses, by determining the released proinflammatory cytokines such as $MIP-1{\alpha}$, $IL-1{\beta}$, and IL-6 from culture supernatants of homogeneous immune cell lines. Serum free cell supernatants were concentrated with TCA precipitation, fractionated with SDS-PAGE, and subjected into western blot analysis. Among 15 cell lines tested, macrophage/monocyte cell line RAW264.7 and WRl9m.1 showed the highest level of induction of $MIP-1{\alpha}$ when stimulated with LPS. Discrete IL-6 bands with multiple forms of molecular mass were detected from supernatants of B cell lines A20(32kDa), Daudi(32, 35kDa), and SKW6.4(29kDa), which were expressed constitutively. $IL-1{\beta}$ could not be detected by the method of western blot analysis from supernatants of all cell lines tested except RAW264.7, WRl9m.1, and erythroid cell line K562 which showed the least amount of $IL-{\beta}$ secretion. SP $10^{-9}M$ with suboptimal dose of LPS treatment showed synergistic induction of $MIP-1{\alpha}$ release from RAW264.7 or WR19m.1, and also IL-6 release from A20, but this synergism is not the case in costimulation of RAW264.7 or WRl9m.1 with SP $10^{-9}M$ and TPA. Although treatment of T cell line CTLL-R8 with SP $10^{-7}M$ or PHA+TPA induced modest level of $MIP-1{\alpha}$ secretion, synergism was not observed when they are applied together. These findings all together suggest the possibility of a regulatory role of SP in inflammatory/immune reaction through differential modulation of bioactivities of other chemical cosignals.
Bone remodeling is characterized by the coupling of osteoclast-mediated bone resorption and osteoblast-mediated bone formation. The process is tightly regualted at the local level by an incompletely known netwotk of peptide and non-peptide fators. Nitric oxide(NO), synthesized by nitric oxide synthetase(NOS) from L-arginine, is becoming recognized as an important bioregualtory molecule in a variety of tissue, but little is known about its possible role in periodontal tissue. The purpose of this study is to investigate the expression of nitric oxide synthetase(NOS) in inflamed gingiva and the effects of cytokine on the expression of NOS protein. The expression of NOS in gingival tissue was evaluated by immunohistochemical staining for $NOS_1$, $NOS_2$, $NOS_3$. The effect of cytokine on the expression of NOS in human periodontal ligament cells and osteoblast-like HOS cells by western blot analysis. Further, we studied that NO functions in periodontal ligament cells as a regulatory molecule. PDL cells incubated with NOS inhibitor and donor. The protein expression, type I collagen & non-collagenous protein, nitrate production and cell proliferation were evaluated The results were as follows. 1. $NOS_1$, $NOS_2$, $NOS_3$ was rarely distributed in healthy gingiva, but stronger stained in gingival epithelium, endothelial cells, and mononuclear cells of inflammed gingiva. 2. The cytokine stimulated $NOS_1$, and $NOS_3$ protein were not inducing or inhibitory effect to compared with control in PDL and HOS cells. 3.Incubation of cells with combination of $TNF-{\alpha}$, $IFN-{\gamma}$, LPS result in a time dependant increase in $NOS_2$ expression, reaching a maximal level after 24 hours of stimulation. 4. The osteonectin protein inhibitory effect of NMA, inhibitor of NOS, was reversed by Larginine in dose dependant manner. 5. NMA decreased cell poliferation and nitrate production, but the inhibitory efffect of NMA was also prevented by the NO donor, sodium nitropruiside. These results suggest that exogenously synthesized NO was playing a stimulating effect on cell proliferation or on non-collagenous protein expression. Therefore NO have an important role in mediation of localized bone destruction associated inflammatory bone disease such as periodontitis.
Objectives : This study was carried out for the purpose of knowing the effect from anti-arthma action of the abstraction from a extract of Paridis Rhizoma(EPR). In order to know what the effect of controlling an abstraction from Paridis Rhizoma. and about the expression of B cells and Ig E cells, mast cells it was necessary for it to be activated by ovalbumin. Methods : In order to know what the effect was on the organization of cytokine gene expression from The increase and divorce of the B cells and allergic acting by EPR, we found it necessary to examine the BALF. At the same time, as we examined the histamine release by ELISA method, we also examined the effect of EPR. Results : EPR at $100\;{\mu}g/ml$, the highest concentration examined did not have any cytotoxic effects on mLFCs. In FACS analysis, number of granulocyte/lymphocyte, $CD3e^+/CCR3^+,\;CD4^+\;and\;CD23^+/B220^+$ in asthma-induced lung cells were significantly decreased by EPR treatment compared to the control group. In RT-PCR analysis, mRNA expression for CCR3, eotaxin and histamine in asthma-induced lung cells, which was induced by rIL-3 plus rmIL-5 treatments, was significantly decreased by EPR treatment. In ELISA analysis, production levels of IL-4, IL-13 and histamine in asthma-induced lung cells, which were induced by rIL-3 plus rmIL-5 co-treatment, were significantly decreased by EPR treatment. EPR treatments significantly inhibited the proliferation of eosinohils prepared from asthma-induced mouse lung tissues compared to the non-EPR treated control cells. Immunohistochemical analysis revealed that EPR treatment significantly decreased the levels of eosipnphil activation compared to non-treated cells. Conclusion : The present data suggested that Paridis Rhizoma may have an effects on the inhibition of parameters associated with asthma responses in eosinpophils, and thus implicate the possibility for the clinical application of Paridis Rhizoma.
Objectives : Hemistepta lyrata Bunge (Bunge) is a wild herb that has been used for managing fever and wound in Korean Traditional Medicine. The present study explored the effects of H. lyrata extract on liver X receptor (LXR) α-dependent lipogenic genes in hepatocyte-derived cells. Methods : After HepG2 cells or Huh7 cells were pre-treated with 1-10 ㎍/mL of H. lyrata extract or its fractionated extract for 0.5 h, the cells were subsequently exposed to LXR ligand for 6-24 h. Cell viability, LXR response element (LXRE)-driven luciferase activity, sterol regulatory element binding protein-response element (SREBP-RE)-driven luciferase activity, SREBP-1c expression, and mRNA levels of LXRα and its-dependent target genes were determined. In addition, LC-MS/MS analysis was conducted to explore major compounds in H. lyrata-chloroform fractionated extract #4 (HL-CF4). Results : Of various H. lyrata extracts tested, chloroform extract and its fractionated extract #4, HL-CF4, significantly decreased T0901317-mediated SREBP-1c expression. In addition, HL-CF4 significantly reduced LXRE atransactivation and LXRα mRNA expression without any cytotoxicity. Moreover, HL-CF4 prevented the SREBP-RE-driven luciferase activity and mRNA levels of fatty acid synthase and stearoyl-CoA desaturase-1 induced by T0901317. Results from LC-MS/MS analysis at positive/negative mode indicated that HL-CF4 contained several compounds showing m/z 197.1176 (C11H17O3), 693.2913/227.1069 (C38H45O12/C15H15O2), 203.1797 (C15H23), 181.1225 (C11H17O2), 591.2957 (C35H43O8), 379.1040 (C18H19O9), 409.1509 (C20H25O9), 309.1348 (C16H21O6), 391.1404 (C20H23O8), and 669.2924/389.1248 (C36H45O12/C20H21O8). Conclusion : Based on its inhibition of the LXRα-dependent signaling pathway, H. lyrata chloroform extract and HL-CF4 have prophylactic potentials for managing non-alcoholic fatty liver.
To compare the accumulation of paralytic shellfish poison (PSP) in different marine organisms, the occurrence and variation of PSP were surveyed in blue mussel Mytilus edulis, oyster Crassostrea gigas, short neck clam Ruditapes philippinarum, bay scallop Argopecten irradians, and warty sea squirt Styela clava collected from Jinhae Bay, Korea, in 2005 and 2006 year. We also investigated the ability of the blue mussel to detoxify PSP by relaying and depuration (via the water flow or water circulation system). In the marine organisms examined, PSP levels were the highest in blue mussel, followed in order by bay scallop, oyster, short neck clam, and warty sea squirt. Comparing the maximum PSP levels in the bivalve species examined in 2005 and 2006, PSP in blue mussel was 1.6-2.0, 4.0-5.9, and 5.1-6.0 times higher than in bay scallop, oyster, and short neck clam, respectively. Therefore, blue mussel could be useful as a bioindicator for PSP monitoring. With the increasing PSP levels in blue mussel in 2006, the proportion of PSP in its digestive gland increased to 95.1% when the maximum level was detected from the whole tissues of blue mussel on May 29. Subsequently, the PSP proportion in the digestive gland decreased as the PSP level in whole tissue decreased. The detoxification of PSP in blue mussel was greatest with relaying, followed by the water flow, and water circulation systems. Relaying decreased the PSP level below the regulatory limit of $80{\mu}g$/100 g after 2 days in low toxic sample with $124{\mu}g$/100 g, and after 7 days in high toxic sample with $401{\mu}g$/100 g. During depuration in the blue mussel with $401{\mu}g$/100 g via the water flow system, the PSP amounts in the digestive gland decreased by about 50% after 1 day, and about 77% after 7 days. In contrast, the PSP amounts in the soft body, gill, and mantle did not change significantly with depuration.
Bone remodeling results from the combined process of bone resorption and new bone formation which is regulated in part by some of the polypeptide growth factors such as platelet derived growth factor(PDGF), which has been known to be an important local regulator of bone cell activity and participate in normal bone remodeling. This process includes strictly regulated gene expression of several bone matrix proteins such as type I collagen and osteopontin, a 44 kDa phosphorylated glycoprotein, which has important roles in bone formation. The purpose of this study is to evaluate the effecs of PDGF-BB on the mRNA expression of bone matrix protein, type I collagen and osteopontin, in MC3T3- E1 cell culture. Cells were seeded at $5{\times}10^5$ cells in 10 ml of minimum essential medium alpha(${\alpha}-MEM$) containig 10% fetal bovine serum, 10 mM beta glycerophosphate. 0.1, 1, 10 ng/ml PDGF-BB were added to the cells for the day 3, 7, 14, 21, 28 and cultured for 24 hours. Type I collagen cDNA, Hf677, and osteopontin cDNA were used as probes for northern blot analysis. Total cellular RNA was purified at indicated day and northern blot analysis was performed. The results were as follows : Type I collagen mRNA expressions were higher at the day 3 and 7, and lower in the day 14, 21 in the control groups. In the experimental groups, mRNA expressions were increased when 0.1 ng/ml PDGF-BB were added on the day 3, 7, 21, and decreased in dose-dependent manner on the day 14, decreased at all added dose on the day 28. Osteopontin mRNA expressions were highest in the day 21 groups and lowest in the day 14 groups in the control groups. Interesting results were shown in the day 14 and 21 groups. We found that osteopontin mRNA level was increased in dose dependent manner in the day 14 groups, and decreased dose dependent manner in the day 21 groups. In conclusion, PDGF-BB may have various control effects on type I mRNA expression in the growth and differentiation process of MC3T3-E1 cells and may have contrary regulatory effects on osteopontin mRNA expression. For examples, when the baseline level of osteopontin mRNA was low, as in the day 14, PDGF-BB up-regulated osteopontin mRNA expression in dose dependent manner, and when the baseline level was high as in the day 21, PDGF-BB down-regulated dose dependent manner. Thus, it may be useful for clinical application in periodontal regeneration procedure if further study were performed.
최근 국내는 보안통제가 강화됨에도 불구하고 사이버공간에서 국가의 주요기반 시설이 해킹당하는 사례가 증가하고 있다. 우리나라는 인터넷 등 고도화된 정보통신기술을 갖추고 있으나 북한 및 테러단체의 사이버테러로 위협을 받고 있다. 그럼에도 불구하고 국내의 사이버테러와 관련한 정책은 법과 제도적 장치가 미비하여 제대로 된 사이버테러 정책 및 전략계획을 수립하는데 한계가 있다. 따라서 본 연구는 좀 더 현실에 적합하고 효율적인 정책수립을 위한 시사점을 제시하고자 하였다. 연구의 목적을 달성하기 위해 전략기획의 이론적 분석틀에 따라 영국의 사이버안보 전략을 국내의 사이버안보 정책과 비교분석하였다. 그 결과 몇 가지 문제점이 도출되었다. 첫째, 국내의 사이버안보 정책은 외적환경을 고려하지 않았다. 둘째, 국내의 사이버안보의 목표설정과 정책 간의 연계성이 부족하고 모호하여 혼란을 초래하고 있다. 셋째, 국내 사이버안보의 세부 집행계획을 각 부처별로 수립함에 따라 부처 간의 혼재 등 부작용이 발생할 개연성 높은 것으로 나타났다. 넷째, 국내의 사이버안보 정책에 대한 평가와 환류는 평가 기준을 마련하는데 한계가 있는 것으로 나타났다. 따라서 국내의 사이버테러 대응을 위한 실효성 있는 정책수립을 위해서는 사이버안보정책의 전략적 접근을 통하여 장기적인 측면에서 비전과 구체적인 목표를 설정하고, 목표에 따라 임무를 제시하여 효율적인 집행계획을 수립할 필요가 있다. 그리고 국내 사이버안보정책의 문제점을 보완 개선하기 위해서는 지속적인 평가와 환류가 필요하다.
Shoot branching is an essential agronomic trait that impacts on plant architecture and yield. Shoot branching is determined by two independent steps: axillary meristem formation and axillary bud outgrowth. Although several genes and regulatory mechanism have been studied with respect to shoot branching, the roles of chromatin-remodeling factors in the developmental process have not been reported in rice. We previously identified a chromatin-remodeling factor OsVIL2 that controls the trimethylation of histone H3 lysine 27 (H3K27me3) at target genes. In this study, we report that loss-of-function mutants in OsVIL2 showed a phenotype of reduced tiller number in rice. The reduction was due to a defect in axillary bud (tiller) outgrowth rather than axillary meristem initiation. Analysis of the expression patterns of the tiller-related genes revealed that expression of OsTB1, which is a negative regulator of bud outgrowth, was increased in osvil2 mutants. Chromatin immunoprecipitation assays showed that OsVIL2 binds to the promoter region of OsTB1 chromatin in wild-type rice, but the binding was not observed in osvil2 mutants. Tiller number of double mutant osvil2 ostb1 was similar to that of ostb1, suggesting that osvil2 is epistatic to ostb1. These observations indicate that OsVIL2 suppresses OsTB1 expression by chromatin modification, thereby inducing bud outgrowth.
21세기에 들어서면서 선진국은 민간경비산업의 전문화를 위해 자격제도 및 교육훈련을 강화하고 있는 추세이다. 우리나라도 전문성 강화를 위한 교육훈련 시스템의 변화를 시도하고 있으나 합리적이지 못한 선발기준과 교육시스템 운영으로 과점시장이 형성되어 있는 실정이다. 오히려 '직업면허제도'를 통하여 자격증 소지자나 경비업체, 교육기관 및 위탁자의 지대추구행위가 증가하고 있는 상태이다. 경비산업 종사자의 질적 향상을 목적으로 자격증 발급 및 지정교육기관을 통한 기본교육이 실시되고 있으나 실질적인 효과는 적은편이다. 이에 본 연구는 민간경비원 선발 및 교육에 관한 문제점을 찾아본 결과, 이원화된 검정제도와 교육시스템의 구조적 문제 그리고 경비업체 운영자 및 최고관리자(임원)의 전문성과 운영능력에 대한 검증이 전혀 이루어지지 않고 있는 것을 알 수 있었다. 이러한 문제를 해결하기 위해서는 이원화 되어있는 경비지도사 자격증 제도와 경비원 교육 이수 제도를 '공인자격검증제도'로 단일화하며, 그 자격검정 대상은 관련 종사자 전체로 확대하여야 할 것이다. 또한 시장 지배적 지위를 이용한 과점현상으로 발생되는 후생손실을 최소화하고 자율경쟁이 가능하도록 지정교육기관의 수를 늘리고 경비원들의 교육 및 취업(업체) 선택에 자율권을 부여하여야 할 것이다. 앞서 제시한 문제점들을 최소화 하고 객관성을 유지하기 위해서는 전문가 집단부터 이해관계자, 시민단체 까지 모두 참여하는 거버넌스 네트워크 형태의 '민간보안산업위원회'와 같은 새로운 관리 감독 기관 설립이 필요하다.
이 연구의 목적은 당 대사에 대한 삼색싸리(Lespedeza maximowiczii var. tricolor Nakai; LMTN)의 효과를 조사하는 것이다. LMTN 추출물은 대조군과 비교하여 3T3-L1 지방 세포에서 당 섭취능 및 지질축적을 유의하게 향상시켰다. 또한, 3T3-L1 지방 세포에서 LMTN 추출물은 퍼옥시좀 증식제 활성화 수용체(PPAR)γ, 인슐린수용체기질-1 (IRS-1) 및 포도당수송체(GLUT)4의 단백질 발현을 유의하게 증가시켰다. LMTM 추출물의 당 섭취능 또는 인슐린 신호 전달계의 조절 효과는 양성 대조물질인 트로글리타존 또는 피니톨보다 낮았지만 PPARγ 단백 활성화는 증가하였다. 또한, LMTM 추출물은 인슐린 유사효과를 나타냈다. db/db 마우스에서, LMTN 추출물(250 mg/kg BW)은 물과 식이 섭취량, 혈당, 중성지방과 총 콜레스테롤 함량을 유의적으로 감소시켰다. 더불어 지방과 근육조직에서의 PPARγ 및 GLUT4 mRNA의 발현도 LMTN 추출물 투여군에서 유의적으로 증가되었다. 따라서, 본 연구의 결과는 LMTN 추출물이 3T3-L1 지방세포 및 db/db 마우스에서 PPARγ 및 인슐린 유사효과를 통해 당 대사를 조절하는 것으로 밝혀졌다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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