This study investigated the efficacy of DNA extraction methods for real-time PCR detection of foodborne pathogenic bacteria in livestock manure composts. Livestock manure composts were inoculated with Escherichia coli O157:H7, Salmonella Typhimurium, Listeria monocytogenes, Bacillus cereus and incubated in enrichment broth. For DNA extraction, enriched samples were treated following boiling method, by chloroform, C18 powder, and proteinase K. As a result, 4 species of bacteria were detected by real-time PCR when subjected to boiling for 30 min and treated with proteinase K. These results suggest that detection of foodborne pathogens by real-time PCR from livestock manure composts could be applicable using effective DNA extraction methodology such as the boiling method or proteinase K.
The aim of this study was to develop a LightCycler-based real time PCR (LC-PCR) assay and to evaluate its diagnostic use for the detection of Staphylococcus aureus in raw milk samples. Following amplification of 113 bp of coa gene encoding an coagulase precursor specific for Staphylococcus aureus, melting curve and DNA sequencing analysis was performed to verify the specificity of the PCR products. Amplification of 209 bp gene encoding an altered penicillin-binding protein, PBP2a (mecA), melting curve analysis and DNA sequencing analysis was performed to verify methicillin resistance Staphylococcus aureus (MRSA). According to this study, 6 of 647 raw milk samples showed S. aureus positive and 2 of them showed a mecA positive and the detection limit was 10 fg of DNA. And we also isolated Staphylococcus chromogenes a causative agent of exudative epidermitis in pigs and cattle from 3 samples.
Zaki, Ali Mohamed;Taha, Shereen El-Sayed;Shady, Nancy Mohamed Abu;Abdel-Rehim, Asmaa Saber;Mohammed, Hedya Said
Korean Journal of Microbiology
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v.55
no.1
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pp.25-32
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2019
Influenza A (H1N1) virus caused a worldwide pandemic in 2009-2010 and still remains in seasonal circulation. Continuous surveillance activities are encouraged in the post pandemic phase to watch over the trend of occurrence every year, this is better to be done by a rapid and sensitive method for its detection. This study was conducted to detect proportions of occurrence of influenza A virus (H1N1) in patients with influenza-like illness. Samples from 500 patients with influenza or influenza-like clinical presentation were tested by real-time reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) and virus tissue culture. Among the total 500 participants, 193 (38.6%) were females and 307 (61.4%) males. Seventy-one patients (14.2%) were positive for H1N1 virus infection with real-time RT-PCR while 52 (10.4%) were positive by tissue culture. Non-statistically significant relation was found between age and gender with the positivity of H1N1. Sensitivity and specificity of real-time RT-PCR was 98.08% and 95.54%, respectively, in comparison to virus isolation with accuracy 95.8%. This study showed that H1N1 virus was responsible for a good proportion of influenza during the post-pandemic period. Real-time RT-PCR provides rapidity and sensitivity for the detection of influenza A virus (H1N1) compared with virus isolation and thus it is recommended as a diagnostic tool.
Malaria is a re-emerging infectious disease that is spreading to areas where it had been eradicated, such as Eastern Europe and Central Asia. To avoid the mortality from malaria, early detection of the parasite is a very important issue. The peripheral blood smear has been the gold standard method for the diagnosis of malaria infection. Recently, several other methods have been introduced for quantitative detection of malaria parasites. Real time PCR that employs fluorescent labels to enable the continuous monitoring of PCR product formation throughout the reaction has recently been used to detect several human malaria parasites. 18S rRNA sequences from malaria parasites have been amplified using Taqman real time PCR assay. Here, a SYBR Green-based real time quantitative PCR assay for the detection of malaria parasite-especially, Plasmodium vivax - was applied for the evaluation of 26 blood samples from Korean malaria patients. Even though SYBR Green-based real time PCR is easier and cheaper than Taqman-based assay, SYBR Green-based assay cannot be used because 18S rRNA cannot be specifically amplified using 1 primer set. Therefore, we used DBP gene sequences from Plasmodium vivax, which is specific for the SYBR Green based assays. We amplified the DBP gene from the 26 blood samples of malaria patients using SYBR Green based assay and obtained the copy numbers of DBP genes for each sample. Also, we selected optimal reference gene between ACTB and B2M using real time assay to get the stable genes regardless of Malaria titer. Using selected ACTB reference genes, we successfully converted the copy numbers from samples into titer, ${\sharp}$ of parasites per microliter. Using the resultant titer from DBP based SYBER Green assay with ACTB reference gene, we compared the results from our study with the titer from Taqman-based assay. We found that our results showed identical tendency with the results of 18S rRNA Taqman assay, especially in lower titer range. Thus, our DBP gene-utilized real time assay can detect Plasmodium vivax in Korean patient group semi-quantitatively and easily.
Nguyen, Thanh Binh;Nguyen, Van Tuan;Chung, Sun-Tae
Journal of Korea Multimedia Society
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v.18
no.11
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pp.1289-1301
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2015
Pedestrian detection (PD) is an essential task in various applications and sliding window-based methods utilizing HOG (Histogram of Oriented Gradients) or HOG-like descriptors have been shown to be very effective for accurate PD. However, due to exhaustive search across images, PD methods based on sliding window usually require heavy computational time. In this paper, we propose a real-time PD method for embedded visual surveillance with fixed backgrounds. The proposed PD method employs HOG descriptors as many PD methods does, but utilizes selective search so that it can save processing time significantly. The proposed selective search is guided by restricting searching to candidate regions extracted from Adaptive Gaussian Mixture Model (AGMM)-based background subtraction technique. Moreover, approximate computation of HOG descriptor and implementation in fixed-point arithmetic mode contributes to reduction of processing time further. Possible accuracy degradation due to approximate computation is compensated by applying an appropriate one among three offline trained SVM classifiers according to sizes of candidate regions. The experimental results show that the proposed PD method significantly improves processing speed without noticeable accuracy degradation compared to the original HOG-based PD and HOG with cascade SVM so that it is a suitable real-time PD implementation for embedded surveillance systems.
Proceedings of the Korean Information Science Society Conference
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2003.10a
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pp.286-288
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2003
본 논문에서는 real-time환경에서 abnormal task를 자동 검출하여 시스템 overload 및 오 동작을 사전에 검출할 수 있는 방안을 제안한다. 본 논문에서 제안한 방안은 context switching이 발생하는 시점에서 각task들의 cpu 점유율 및 context switching 횟수를 분석하여 비정상적으로 높은 cpu 점유율을 가지는 task와 과도한 context switching을 일으켜 시스템에 overload를 주는 task들을 자동으로 검출한다. 이들 이용하여 신뢰성 있는 real-time시스템 설계 및 구현을 지원할 수 있다.
Kim, Young Kwang;Lee, Kyoung Hoon;Yun, Ki Wook;Lee, Mi Kyung;Lim, In Seok
Pediatric Infection and Vaccine
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v.23
no.3
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pp.194-201
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2016
Purpose: Monitoring pneumococcal carriage rates is important. We developed and evaluated the accuracy of a real-time reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) protocol for the detection of Streptococcus pneumoniae. Methods: In October 2014, 157 nasopharyngeal aspirates were collected from patients aged <18 years admitted to Chung-Ang University Hospital. We developed and evaluated a real-time PCR method for detecting S. pneumoniae by comparing culture findings with the results of the real-time PCR using genomic DNA (gDNA). Of 157 samples, 20 specimens were analyzed in order to compare the results of cultures, real-time PCR, and real-time RT-PCR. Results: The concordance rate between culture findings and the results of real-time PCR was 0.922 (P<0.01, Fisher exact test). The 133 culture-negative samples were confirmed to be negative for S. pneumoniae using real-time PCR. Of the remaining 24 culture-positive samples, 21 were identified as S. pneumonia -positive using real-time PCR. The results of real-time RT-PCR and real-time PCR from 20 specimens were consistent with culture findings for all S. pneumoniae -positive samples except one. Culture and real-time RT-PCR required 26.5 and 4.5 hours to perform, respectively. Conclusions: This study established a real-time RT-PCR method for the detection of pneumococcal carriage in the nasopharynx. Real-time RT-PCR is an accurate, convenient, and time-saving method; therefore, it may be useful for collecting epidemiologic data regarding pneumococcal carriage in children.
The main topic of this paper is to show a possibility of indoor air quality enhancement and the fan energy savings in underground parking facilities by applying the demand-controlled ventilation (DCV) strategy based on the real-time variation of the traffic load. The established ventilation rate is estimated by considering the passing distance, CO emission rate, idling time of a vehicle, and the floor area of the parking facility. However, they are hard to be integrated into the real-time DCV control. As a solution to this problem, the minimum ventilation rate per a single vehicle is derived in this research based on the actual ventilation data acquired from several existing underground parking facilities. And then its applicability to the DCV based on the real-time variation of the traffic load is verified by simulating the real-time carbon monoxide concentration variation. The energy saving potentials of the proposed DCV strategy is also checked by comparing it with those for the current underground parking facility ventilation systems found in the open literature.
Seo, Hye-Kyoung;Lim, Dae-Ho;Lim, Mi-Hwa;Kim, Jong-Baeg;Shin, Jeon-Soo;Kim, Yong-Jun
Journal of Sensor Science and Technology
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v.17
no.3
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pp.195-202
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2008
A biosensor based on the measurement of capacitance changes has been designed and fabricated for simple and realtime detection of bacteria. Compared to an impedance measurement technique, the capacitance measurement can make additional measurement circuits simpler, which improves a compatability for integration between the sensor and circuit. The fabricated sensor was characterized by detecting Escherichia coli(E. coli). The capacitance changes measured by the sensor were proportional to E. coli cell density, and the proposed sensor could detect $1{\times}10^6$ cfu/ml E. coli at least. The real-time detection was verified by measuring the capacitance every 20 minutes. After 7 hours of E. coli growth experiment, the capacitance of the sensor in the micro volume well with $4.5{\times}10^5$ cfu/ml of initial E. coli density increased by 20 pF, and that in another wells with $1.5{\times}10^6$ cfu/ml and $8.5{\times}10^7$ cfu/ml initial E. coli density increased by 56 pF and 71 pF, respectively. The proposed sensor has a possibility of the real-time detection for bacterial growth, and can detect E. coli cells with $1.8{\times}10^5$ cfu in nutrient broth in 5 hours.
Journal of the Korea Society of Computer and Information
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v.19
no.8
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pp.1-10
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2014
This paper proposes a parallel implementation of the video based 4-stage fire detection algorithm using a general-purpose graphics processing unit (GPGPU) to support real-time processing of the high computational algorithm. In addition, this paper compares the performance of the GPGPU based fire detection implementation with that of the CPU implementation to show the effectiveness of the proposed method. Experimental results using five fire included videos with an SXGA ($1400{\times}1050$) resolution, the proposed GPGPU implementation achieves 6.6x better performance that the CPU implementation, showing 30.53ms per frame which satisfies real-time processing (30 frames per second, 30fps) of the fire detection algorithm.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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