• 동아시아식생활학회지
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• 제11권1호
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• pp.26-32
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• 2001

독소원성 대장균(enterotoxigenic Escherichia coli, ETEC, EC81, serotype O148:H28)이 생산하는 heat labile enterotoxin(LT)를 검색해 본 결과, reversed passive latex agglutination(RPLA)법에 있어서는 2배로 희석한 용액 (50 ng)으로부터 64로 희석한 용액 (1.56 ng)에서까지 양성반응을 보였으며 polymerase chain reaction (PCR)기법에 있어서는 10 ng으로부터 1 pg희석용액에서까지 147-base pair(bp)의 LT DNA fragment가 확인되었다. Clostridium perfringens A형 (NCTC8238, Hobbs serotype 2)이 생산한는 장독소를 검색해 본 결과, RPLA법에 있어서는 2배로 희석한 용액 (50 ng)으로부터 64로 희석한 용액 (1.56 ng)에서 까지 양성반응을 보여 독소원성대장균이 생산하는 LT와 일치하였으나, PCR기법에 있어서는 10ng로부터 10 pg 희석용액에서 까지 354-bp의 DNA fragment가 확인되어 독소원성대장균이 생산하는 LT보다 1/10의 낮은 감도를 보였다. PCR기법은 RPLA법에 비하여 훨씬 신속하고 소량의 sample로 장독소를 확인할 수 있었다.

• 한국환경보건학회지
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• 제23권4호
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• pp.45-49
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• 1997

Clostridium perfringens A형이 생산하는 장독소를 검색해본 결과, RPLA법에 있어서는 2배로 희석한 용액으로부터 64배로 희석한 용액 (NCTC 8239 Hobbs serotype 3 CPE$^+$)에서까지 양성반응을 보였으며 PCR 기법에 있어서는 10 pg 희석 용액까지 364 bp의 장독소 DNA fragment(NCTC 8238 Hobbs serotype 2 CPE$^+$)를 확인 할수 있었다. 그러므로 장독소를 검색하기 위해서는 PCR기법이 RPLA법에 비하여 훨씬 감도가 높음을 확인할 수 있었다.

• 대한수의학회지
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• 제39권4호
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• pp.806-810
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• 1999

A multiplex-polymerase chain reaction (PCR) assay was used to detect staphylococcal enterotoxin production by 12 strains of Staphylococcus aureus isolated from clinical specimens. To evaluate the efficacy and/or sensitivity of this method, the results were compared to those obtained with the reversed passive latex agglutination kit (SET-RPLA, Denka Seiken, Japan). Of 10 strains positive by PCR were positive by RPLA but two strains, representing high sensitivity of the former method. Enterotoxin B was the most prevalent by the two methods. The kappa index between the two methods was 0.826, indicating a higher agreement and fully reliable for use. These results would suggest that sensitive, inexpensive, and relatively rapid multiplex-PCR technique may be an effective means for the detection of staphylococcal enterotoxin genes as an alternative to traditional methods such as kits or immunological methods, which depend upon the amount of enterotoxin produced.

• 한국식품과학회지
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• 제36권4호
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• pp.683-687
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• 2004

장조림 원료 쇠고기 우둔살과 가열 처리한 쇠고기 우둔살에서 중온성균, 저온성균 등 11종의 미생물에 대한 분포도를 측정하였고, B. cereus, C. botulinum, C. perfringens, L. monocytogenes 등과 같은 9종류의 주요 병원성세균의 분리를 시도하였다. 원료육에서 미생물분포는 대부분 높은 분포를 보였으나 가열 처리육에서는 대부분 검출되지 않았다. 원료육에서 저온성균은 오염지표세균 중에서 가장 높은 분포를 나태낸 반면, 가열처리 후 급격하게 감소하였다. 식중독균인 B. cereus, C. perfringens 및 L. monocytogenes 등 3균주가 원료육에서 분리된 반면 C. botulinum, E. coli O157:H7, Salmonella spp., Shigella spp., S. aureus 및 Y. enterocolitica는 분리되지 않았다. 원료 쇠고기에서 분리된 B. cereus는 CERT-RPLA 방법에 의해 enterotoxin을 생성한 반면, C. perfringens는 PET-RPLA 방법에 의해 독소를 생성하지 않았다.

• 한국식품과학회지
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• 제35권1호
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• pp.97-102
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• 2003

Cook-chill 제품의 원료로 사용하는 시금치와 수세한 시금치에 대해 Aeromonas hydrophila, Escherichia coli O157:H7, Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella spp., Shigella spp., Yersinia enterocolitica, Bacillus cereus, Campylococcus spp., Clostridium perfringens, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus 등 12종류의 병원성세균의 존재 여부를 확인하였다. 이들 시금치로부터 4종의 병원성세균을 분리하여 API kit와 ATB 자동 동정기를 포함한 형태학적 및 생화학적 방법에 의해 동정하였다. MacConkey agar에서 분리된 균은 그람 음성 간균으로 glucose를 이용하여 gas를 생성하며, lactose 음성, sucrose 양성, lysine 양성으로 ATP system에서 A. hydrophila 종에 대해 99.9%의 상동성을 보였다. Cereus Selective agar에서 분리된 균은 그람 양성 간균, 포자 형성균으로 catalase 양성, mannitol 음성, lecithinase 양성, Simmon's citrate 음성, $NO_2$ 생성 양성, arginine 양성균으로 ATB system에서 B. cereus 종에 대해 99.8%의 상동성을 보였다. Clostridium Perfringens agar에서 분리된 균은 그람 양성 간균, 혐기성균으로 포자를 형성하며, mannitol 양성, lecithinase 양성으로 ATB system에서 C. perfringens 종에 대해 99.9%의 상동성을 보였다. Baird-Parker agar에서 분리된 균주는 그람 양성 구균으로 mannitol, lecithinase, lactose, clumping factor, coagulase 및 hemolysin 양성, xylose 음성으로 ATB system에서 S. aureus 종에 대해 97.8%의 상동성을 보였다. Salmonella spp., E. coli O157:H7, Y. enterocolitica를 포함한 다른 병원성세균은 분리되지 않았다. 시금치에서 분리한 S. aureus 5균주 중 2균주는 SET-RPLA kit에서 enterotoxin type A를 생성하였고 3균주는 enterotoxin을 생성하지 않았다. B. cereus 5균주는 CRET-RPLA kit에서 모두 enterotoxin을 생성하였다.

• 환경위생공학
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• 제20권1호
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• pp.23-31
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• 2005

On the purpose of epidemiological survey relate to food poisoning, a total of 114 samples of different salads collected from fast food Restaurants in Gyeonggi-do were for the presence of pathogenic microorganisms. Microbial assessment of salads revealed that TPC($1.1\times10\;\~\;8.4\times10^{5}\;CFU/g$) and coliforms($0\~5.4\times10^{4}\;CFU/g$) exceeded the standards by Solberg et al. ($TPC:10^{5}\;CFU/g,\;coliforms:10^{2}\;CFU/g$). Two pathogenic bacteria were isolated from salad samples, and identified by biochemical methods, including API identification systems. Isolates from PALCAM agar and MYP agar media were in 98.6, $99.8\%$ agreements with Listeria monocytogenes, Bacillus cereus at the species level, respectively. All 7 strains of Bacillus cereus isolates produced enterotoxin as revealed with CRET-RPLA.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제19권10호
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• pp.1238-1243
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• 2009

The susceptibilities of major enterohemorrhagic Escherichia coli (EHEC) strains to antimicrobial agents and the cytotoxicity of these agents were examined using a total of 38 strains of E. coli O26, O111, and O157, which are the major serogroups of EHEC. Among the 38 strains, 35, 36, and 36 were susceptible to amikacin, imipenem, and norfloxacin, respectively. These antimicrobial agents were further examined to determine their cytotoxicity on Vero cells as well as their effect on the release of Shiga toxins along with trimethoprim/sulfamethoxazole. Each of the E. coli O26, O111, and O157 strains containing both the stx1 and stx2 genes were grown in the absence or presence of these agents at 1/4 minimal inhibitory concentration for 6 h, 12 h, and 18 h. At the concentrations used in this study, none of the agents significantly altered cell count compared with the control group. The level of cytotoxicity in the imipenem group was lower at 12 hand 18 h than their respective controls. In contrast, the level of cytotoxicity in cultures treated with trimethoprim/sulfamethoxazole, norfloxacin, and amikacin was increased. The strains were also examined for the release of Shiga toxins 1 and 2 following treatment with the agents, which were measured by the reversed passive latex agglutination (RPLA) method. The RPLA assay showed a suppression of release of Shiga toxin 2 in the strain cultures containing imipenem. These results indicate that imipenem may be a safe and effective agent for inhibition of these bacteria, which has clinical implications for the treatment of EHEC infections.

• 대한임상검사과학회지
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• 제37권1호
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• pp.27-34
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• 2005

Biochemical characteristics, enterotoxin production and antimicrobial susceptibility were determined for 30 strains of Bacillus cereus isolated from stool specimens of diarrhea patients at an university hospital in Chulabuk-do province. Positive rate for VP reaction and citrate utilization were lower, (33 % and 40 % respectively) while the rates of acid production from mannitol, arabinose, and xylose were higher (17 %, 13 % and 3 % respectively) than those obtained by other investigators. The enterotoxin gene was detected in 18 of 30 isolates (60 %) by PCR, and the toxin was detected from all of the toxin gene-positive isolates by RPLA test. The agar dilution test showed that all isolates were resistant to penicillin G and 73 % were to cephalothin, but all were susceptible to ciprofloxacin, clindamycin, erythromycin, fusidic acid, gentamicin, rifampin, teracycline and vancomycin. We conclude that B. cereus isolates producing acid from mannitol, arabinose and xylose exist, that PCR can be used to detect enterotoxin genes rapidly and accurately, and that this organism is susceptible to various antimicrobial agents though not penicillin G and cephalothin.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제25권9호
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• pp.1460-1466
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• 2015

In this study, the prevalence of Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) was investigated among raw meat or meat products from slaughterhouses and retail markets in South Korea, and their potential for antibiotic resistance and virulence was further analyzed. A total of 912 raw meats, including beef, pork, and chicken, were collected from 2008 to 2009. E. coli strains were frequently isolated in chicken meats (176/233, 75.9%), beef (102/217, 42.3%), and pork (109/235, 39.2%). Putative STEC isolates were further categorized, based on the presence or absence of the Shiga toxin (stx) genes, followed by standard O-serotyping. Polymerase chain reaction assays were used to detect the previously defined virulence genes in STEC, including Shiga toxins 1 and Shiga toxin 2 (stx1 and 2), enterohemolysin (ehxA), intimin (eaeA), STEC autoagglutination adhesion (saa), and subtilase cytotoxin (subAB). All carried both stx1 and eae genes, but none of them had the stx2, saa, or subAB genes. Six (50.0%) STEC isolates possessed the ehxA gene, which is known to be encoded by the 60-megadalton virulence plasmid. Our antibiogram profiling demonstrated that some STEC strains, particularly pork and chicken isolates, displayed a multiple drug-resistance phenotype. RPLA analysis revealed that all the stx1-positive STEC isolates produced Stx1 only at the undetectable level. Altogether, these results imply that the locus of enterocyte and effacement (LEE)-positive strains STEC are predominant among raw meats or meat products from slaughterhouses or retail markets in Korea.

• 한국식품과학회지
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• 제36권1호
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• pp.44-49
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• 2004

동충하초 분말 및 용매를 달리한 추출액을 고추장 총 무게의 15%, 수준으로 첨가하여 제조한 후 $20^{\circ}C$에서 90일간 숙성시키면서 30일 간격으로 수분, pH, 아미노태질소, 색도, 생균수등의 품질변화를 측정하였다. pH는 동충하초 첨가 고추장이 대조군에 비하여 낮고 전 처리구에서 숙성기간의 경과에 따라 지속적으로 감소하였다. 아미노태질소는 전 처리구에서 숙성 60일까지는 지속적인 증가를 보이다가 90일에는 소량 감소한 것 으로 나타났다. 처리구 별로는 대조군에 비해 동충하초를 첨가한 고추장의 함량이 더 높았으며 숙성 30일과 60일에는 그 중에서 동충하초분말 첨가 고추장의 아미노태질소 함량이 각각 179.2 mg%와 282.2 mg%로 가장 높았다. 색도는 숙성기간의 경과에 따라 전 처리구에서 L, a, b 값이 감소되었고 대조군에 비하여 동충하초 첨가 고추장의 L, a, b 값이 낮은 경향을 보였으며 그 중에서도 동충하초분말 첨가 고추장이 가장 낮은 것으로 나타났다. 숙성시킨 고추장을 30일 간격으로 색, 질감, 맛, 향미, 전체적인 선호도에 대하여 관능검사를 실시한 결과 각 처리구의 색은 대조군이 선명한 붉은색에 가까운 것에 비하여 동충하초 첨가 고추장의 색은 어두운 적갈색에 가까운 것으로 나타났고 고추장의 진한 색에 대한 선호도는 낮았으며, 질감은 모두 윤기가 나고 부드러웠으며 이에 대한 선호도 역시 높았다. 짠맛은 대조군보다 동충하초 첨가 고추장이, 분말보다는 추출액을 첨가한 고추장이 더 강했고 매운맛은 동층하초를 첨가한 고추장이 대조군에 비하여 약한 것으로 나타났다. 풍미는 동충하초 첨가 고추장이 대조군에 비하여 높은 수치로 나타났으며 그 중 동충하초 분말 첨가 고추장이 가장 좋은 것으로 나타났으나 전체적인 선호도는 동충하초 열수추출액 첨가 고추장이 가장 선호되는 것으로 나타났다.EX> 저장시에는 대조구가 저장 15일에 $6.6{\times}10^4\;cfu/g$에 도달한 것에 비해 구기자 분말 첨가구는 저장 20일 이후에도 $4{\times}10^4\;cfu/g$에 도달하여 구기자 분말 첨가에 따라 저장기간이 연장되는 결과를 보였다.. coli O157:H7, Y. enterocolitica를 포함한 다른 병원성세균은 분리되지 않았다. 시금치에서 분리한 S. aureus 5균주 중 2균주는 SET-RPLA kit에서 enterotoxin type A를 생성하였고 3균주는 enterotoxin을 생성하지 않았다. B. cereus 5균주는 CRET-RPLA kit에서 모두 enterotoxin을 생성하였다.수한 전통 식생활문화를 계승 발전시키는 동시에, 전통음식의 세계화가 촉진될 것으로 생각된다. 증식을 촉진하는 것으로 나타났다(p＜0.01). 신장암 세포 SN12C에 대해서는 garlic$(82.88{\pm}0.53%)$이 가장 높은 억제효과(p＜0.001)를 나타냈으며, ginger 및 cumin, cardamon이 p＜0.01 수준에서 증식억제를 나타내었다. 그러나 clove의 경우 증식을 촉진하는 것으로 나타났다(p＜0.01). 위암 세포주 SNU-638의 경우 garlic$(71.63{\pm}0.38%)$이 가장 높은 억제효과를 보였으며, red pepper 및 ginger, fenugreek, SPC, cumin, MPC 등에서도 증식억제 효과를 보여주었다(p＜0.001). 그러나 clove 및 nutmeg, turmeric, coriander는 증식을 촉진하는 것으로 나타났다(p＜0.001). 폐암 세포 A549에 대한 세포독성 실험 결과 대부분의 원료에서 세포독성이 없었으나 cassia(82.84 16.92%)가 가장 강한