본 연구는 만병초 에탄올추출물의 식중독 유발균에 대한 항균효과 및 항산화 활성을 조사하였다. 추출물의 항균활성은 paper disc 방법으로 조사하였다. 추출물을 10 mg/disc 점적한 후 저해환의 크기를 측정한 결과, 그람양성 3균주 중에서 Bacillus cereus에 대해, 그리고 그람음성 5균주 중에서 Escherichia coli O157:H7에 대한 항균활성이 가장 좋았다. 최소 억제 농도(MIC)는 현재 합성보존료로 이용되고 있는 sorbic acid와 비슷하게 나타났다. 또한, 만병초 추출물이 식중독 유발균의 성장에 미치는 효과를 검정하기 위해 Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, Salmonella Typhimurium과 Escherichia coli O157:H7의 배양액에 250, 500, 1,000 및 2,000 mg/L 농도로 첨가하여 생육을 조사한 결과, 배양시간 별로 250 mg/L 농도까지는 대조군과 차이가 없었으나, 1,000 mg/L 이상의 농도에서는 균의 증식이 억제되었다. 만병초 추출물의 항산화 효능을 조사하기 위해 DPPH 라디칼 소거활성, ROS 생성 억제 및 supercoiled DNA strand 절단 억제효과를 측정하였다. Pyrogallol의 억제율을 100%로 기준하였을 때, DPPH 라디칼을 50% 억제시키는데 필요한 만병초 추출물의 농도는 양성대조군인 ${\alpha}$-tocopherol의 약 절반으로 나타났다. 추출물의 농도가 증가할수록 DCF 형광도는 감소하여 ROS 생성이 농도 의존적으로 억제되고 있음을 알 수 있었다. 추출물의 ROS 생성 억제효과는 양성 대조군인 아스코르빈산에 비해 높게 나타났다. 또한, 만병초 추출물은 peroxyl radical 및 hydroxyl radical로 유발된 supercoiled DNA strand 절단을 억제시켰다. 따라서 본 연구결과는 만병초 추출물이 식중독 유발균에 대하여 우수한 항균작용과 항산화능을 나타내어 만병초가 효과적인 천연보존료 및 항산화제로서 이용될 수 있음을 시사하고 있다.
Objectives : This research aimed at studying the immuno modulating activity of Fermented Epimedii Herba (EHS). Method : The impacts on the cell viability, hydrogen peroxide and nitric oxide (NO) generation in cells, and cytokines such as tumor necrosis factor-alpha (TNF-${\alpha}$), interleukin (IL)-6, IL-$1{\beta}$, monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) level have been measured by using Raw 264.7 cells with the specimen EHS as the fermented extract of Epimedii Herba with Saccharomyces cerevisiae STV89. Result : As a result of MTT assay to confirm the cytotoxicity of extracts from fermented Epimedii Herba, the toxicity was not excessively induced in Raw 264.7 cells when EHS were processed by concentration. EHS increased hydrogen peroxide generation in Raw 264.7 cells. EHS suppressed NO generation in Raw 264.7 cells while they significantly suppressed the increase of NO generation induced by LPS in macrophage. EHS significantly decreased the generation amount of TNF-${\alpha}$ and IL-6 induced by LPS in Raw 264.7 cells at $25{\mu}g/mL$ or more. Conclusion : It appeared that the fermented extract of Epimedii Herba manufactured from Epimedii Herba significantly has the immuno modulating acitivity as it did not excessively trigger cytotoxicity to Raw 264.7 cells, increased hydrogen peroxide generation in Raw 264.7 cells, decreased NO generation in macrophage, and especially, suppressed both TNF-${\alpha}$ and IL-6 generation in macrophage induced by LPS.
We investigated the antioxidant activity of ethanol extracts obtained from the flowers of Elsholtzia splendens on Chinese hamster ovary CHO-K1 cells. When cells were treated with E. splendens extracts (ESEs), low concentrations (<12.5 ug/mL) of stimulated cell proliferation via radical generation. Relative mRNA expression of Cu/Zn-superoxide dismutase (SOD) and Mn-SOD in cells exposed to ESEs (1-20 ug/mL) was significantly induced in a dose-dependent manner (p<0.05). In the case of catalase, ESEs had opposing effects; that is, a low-level treatment caused a decrease, and a high-level treatment induced elevated levels (p<0.05). The results demonstrated that components of ESEs exhibit potential antioxidant properties. Also, further studies are required to clarify the active components of Elsholtzia splendens extracts responsible for such biological activities.
본 연구에서는 ${O_2}^-,{\cdot}OH$ radical, NO, $ONOO^-$ 자유라디칼을 유발시키는 in vitro assay system과 free radical-induced oxidative stress에 의한 단백질 손상에 대한 진흙버섯속에 속하는 상황버섯 물 추출물의 항산화 효과를 측정하였다. 상황버섯 물 추출물의 ${O_2}^-,{\cdot}OH$ radical, NO, $ONOO^-$ 자유라디칼 억제효과에서는 실험에 사용된 양성 대조물 보다는 낮게 나타났으나 모든 실험계에서 대조군에 비해 뚜렷하게 자유라디칼 소거효과를 나타냈다. 또한 상황버섯 물 추출물은 산화적 스트레스에 의한 단백질 손상 억제효과에서도 대조군에 비해 명확한 저해효과를 나타냈다. 그러므로 상황버섯의 항산화 효과는 상황버섯의 약리학적 효능을 설명하는데 중요한 기초 자료라고 사료된다.
Jang, Ji Yeon;Kim, Se-Yong;Song, Kyung-Sik;Seong, Yeon Hee
Natural Product Sciences
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제21권2호
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pp.134-140
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2015
The present study aims to investigate the effect of methanol extract of Korean mistletoe (KM; Viscum album var. coloratum), on amyloid $\beta$ protein ($A\beta$) (25-35), a synthetic 25-35 amyloid peptide, -induced neurotoxicity in cultured rat cerebral cortical neurons and memory impairment in mice. Exposure of cultured neurons to $10{\mu}M$$A\beta$ (25-35) for 24 h induced a neuronal cell death, which was measured by a 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl-tetrazolium bromide (MTT) assay and Hoechst 33342 staining. KM (10, 30 and $50{\mu}g/ml$) significantly inhibited the $A\beta$ (25-35)-induced apoptotic neuronal death. KM ($50{\mu}g/ml$) inhibited 10 μM Aβ (25-35)-induced elevation of intracellular calcium concentration ([Ca2+]i), which was measured by a fluorescent dye, Fluo-4 AM. Glutamate release into medium and generation of reactive oxygen species (ROS) induced by $10{\mu}M$$A\beta$ (25-35) were also inhibited by KM (10, 30 and $50{\mu}g/ml$). These results suggest that KM may mitigate the $A\beta$ (25-35)-induced neurotoxicity by interfering with the increase of [Ca2+]i and then inhibiting glutamate release and generation of ROS in cultured neurons. In addition, orally administered KM (25 and 50 mg/kg, 7 days) significantly prevented memory impairment induced by intracerebroventricular injection of $A\beta$ (25-35) (8 nmol). Taken together, it is suggested that anti-dementia effect of KM is due to its neuroprotective effect against $A\beta$ (25-35)-induced neurotoxicity and that KM may have therapeutic role in prevention of the progression of Alzheimer's disease.
Giardia lamblia, an anaerobic, amitochondriate protozoan parasite causes parasitic infection giardiasis in children and young adults. It produces pyruvate, a major metabolic product for its fermentative metabolism. The current study was undertaken to explore the effects of pyruvate as a physiological antioxidant during oxidative stress in Giardia by cysteine-ascorbate deprivation and further investigation upon the hypothesis that oxidative stress due to metabolism was the reason behind the cytotoxicity. We have estimated intracellular reactive oxygen species generation due to cysteine-ascorbate deprivation in Giardia. In the present study, we have examined the effects of extracellular addition of pyruvate, during oxidative stress generated from cysteine-ascorbate deprivation in culture media on DNA damage in Giardia. The intracellular pyruvate concentrations at several time points were measured in the trophozoites during stress. Trophozoites viability under cysteine-ascorbate deprived (CAD) medium in presence and absence of extracellular pyruvate has also been measured. The exogenous addition of a physiologically relevant concentration of pyruvate to trophozoites suspension was shown to attenuate the rate of ROS generation. We have demonstrated that Giardia protects itself from destructive consequences of ROS by maintaining the intracellular pyruvate concentration. Pyruvate recovers Giardia trophozoites from oxidative stress by decreasing the number of DNA breaks that might favor DNA repair.
Park, Min-Su;Ban, Ju-Yeon;Lee, Ju-Hyun;Song, Kyung-Sik;Seong, Yeon-Hee
한국약용작물학회지
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제14권2호
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pp.70-76
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2006
Paeoniae radix has been widely used for its anti-allergic, anti-inflammatory and analgesic effects, and demonstrated to have anticonvulsant, memory enhancing and anxiolytic activities. The present study was performed to examine the protective effect of methanol extract of Paeoniae radix (PR) from Paeoniae Japonica Miyabe et Takeda (Paeoniaceae) on hydrogen peroxide $(H_2O_2)-induced$ neurotoxicity using cultured rat cerebral cortical neuron. $H_2O_2$ produced a concentration-dependent reduction of neuronal viability, PR, over a concentration range of 10 to $100\;{\mu}g/ml$ showed concentration-dependent decrease of the $H_2O_2$$(100\;{\mu}M)-induced$ neuronal cell death, as assessed by a 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-di-phenyl-tetrazolium bromide assay and the number of apoptotic nuclei, evidenced by Hoechst 33342 staining. PR $(100\;{\mu}g/ml$ inhibited $100\;{\mu}M$$H_2O_2-induced$ elevation of the cytosolic $Ca^{2+}$ concentration $([Ca^{2+}]_c)$, which was measured by a fluorescent dye, flue-4 AM. PR $(50\;{\mu}g/ml$ inhibited glutamate release into medium induced by $100\;{\mu}M$$H_2O_2$, which was measured by HPLC, and generation of reactive oxygen species (ROS). These results suggest that PR may mitigate the $H_2O_2-induced$ neurotoxiciy by interfering with the increase of $[Ca^{2+}]_c$, and then inhibiting glutamate release and generation of ROS in cultured neurons.
Objectives : Peroxynitrite $(ONOO^-)$, superoxide anion radical $({\cdot}O_2^-)$ and nitric oxide (NO) are cytotoxic because they can oxidize several cellular components such as proteins, lipids and DNA. They have been implicated in the aging processes, and age-related diseases such as Alzheimer's disease, rheumatoid arthritis, cancer and atherosclerosis. The aim of this study was to investigate the $ONOO^-$, NO, and $({\cdot}O_2^-)$ scavenging and anti-inflammatory activities of Mori Fructus in ob/ob mice. Methods : Mice were grouped and treated for 5 weeks as follows. Both the normal lean (C57/BL6J black mice) and control obese (ob/ob mice) groups received the standard chow. The experimental groups were fed a diet of chow supplemented with 7.5, 15 and 30 mg Mori Fructus per 1 kg of body weight for 14 days. For this study, the fluorescent probes, namely 2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFDA), 4,5-diaminofluorescein (DAF-2) and dihydrorhodamine 123 (DHR 123) were used. Western blotting was performed using anti-phospho $I{\kappa}B-\alpha$, anti-IKK-$\alpha$, anti-NF-${\kappa}B$ (p50, p65), anti-COX-2 and anti-iNOS respectively. Results : Mori Fructus inhibited the generation of $ONOO^-$, NO and $({\cdot}O_2^-)$ in the lipopolysaccharide (LPS)-treated mouse kidney postmitochondria in vitro. The generation of $ONOO^-$, NO and $({\cdot}O2^-)$ were inhibited in the Mori Fructus-administered ob/ob mice groups. The GSH/GSSG ratio decreased in the ob/ob mice, whereas they improved in the Mori Fructus-administered groups. Mori Fructus inhibited the expression of phospho $I{\kappa}B-\alpha$, IKK-$\alpha$, COX-2, iNOS genes, and thereby the activation of NF-$I{\kappa}B$. Conclusions : These results suggest that Mori Fructus is an effective $ONOO^-$, $({\cdot}O_2^-)$ and NO scavenger, and therefore it might be a potential therapeutic drug against the inflammation process and inflammation-related diseases.
The protective effect of ethanol extract of Korean mistletoe (KM; Viscum album coloratum) on hydrogen peroxide $(H_{2}O_{2})-induced$ neurotoxicity was examined in primary cultured rat cortical neurons. $H_{2}O_{2}$ reduced viability of cortical neurons in a concentration-dependent manner. The addition of KM, over a concentration range of 10 to 100 ${\mu}g/ml$, concentration-dependently prevented the $H_{2}O_{2}(100\;{\mu}M)-induced$ neuronal cell death, as assessed by a 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-di-phenyl-tetrazolium bromide (MTT) assay and Hoechst 33342 staining. KM significantly inhibited $H_{2}O_{2}-induced$ elevation of the cytosolic $Ca^{2+}$ concentration $([Ca^{2+}]_{c})$, which was measured by a fluorescent dye, fluo-4 AM. KM inhibited glutamate release into medium and generation of reactive oxygen species (ROS) induced by $H_{2}O_{2}$. These results suggest that KM may mitigate the $H_{2}O_{2}-induced$ neurotoxiciy by interfering with the increase of $[Ca^{2+}]_{c}$, and inhibiting glutamate release and generation of ROS in cultured neurons.
Objectives : Polygalae Radix (PR) from Polygalae tenuifolia (Polygalaceae) has been clinically used as a sedative, anti-inflammatory, and anti-bacterial agent. To extend pharmacological effects of PR in the central nervous system (CNS) on the basis of its CNS protective effect, the present study was conducted to identify the effect of PR, whether it shows the neuroprotective action against excitatory neurotoxicity. Methods : To identify the protective effect of PR to excitatory neuro-toxic agent, the present study was focused on the PR effect on cell death, that was caused by applying NMDA to nerve cell, elevation of $(Ca^{2+})_i$, releasement of glutamate, and ROS generation. Result : 1. PR methanol extract, at the concentration range of 0.05 to 5 g/ml, significantly inhibited NMDA (1 mM)-induced neuronal cell death as well as MK-801 (non competitive NMDA antagonist). 2. PR methanol extract $(0.5\;{\mu}g/ml)$ inhibited NMDA (1 mM)-induced elevation of cytosolic calcium concentration $[Ca^{2+}]_i$. NMDA application in the presence of MK-801 $(10\;{\mu}M)$ failed to produce the increase of $[Ca^{2+}]_i$ through all the measurement time. 3. PR methanol extract $(0.5\;{\mu}g/ml)$ inhibited the NMDA-induced elevation of glutamate release. Also, MK-801 showed similar protective effects. 4. PR methanol extract $(0.5\;{\mu}g/ml)$ inhibited the NMDA-induced elevation of ROS generation. Also, MK-801 showed similar protective effects. Conclusion : The present study provides the availability of PR to exert its protective effect on the neuronal cell death in various neurodegenerative pathophysiological conditions.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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