Objectives : Peroxynitrite $(ONOO^-)$, superoxide anion radical $({\cdot}O_2^-)$ and nitric oxide (NO) are cytotoxic because they can oxidize several cellular components such as proteins, lipids and DNA. They have been implicated in the aging processes, and age-related diseases such as Alzheimer's disease, rheumatoid arthritis, cancer and atherosclerosis. The aim of this study was to investigate the $ONOO^-$, NO, and $({\cdot}O_2^-)$ scavenging and anti-inflammatory activities of Mori Fructus in ob/ob mice. Methods : Mice were grouped and treated for 5 weeks as follows. Both the normal lean (C57/BL6J black mice) and control obese (ob/ob mice) groups received the standard chow. The experimental groups were fed a diet of chow supplemented with 7.5, 15 and 30 mg Mori Fructus per 1 kg of body weight for 14 days. For this study, the fluorescent probes, namely 2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFDA), 4,5-diaminofluorescein (DAF-2) and dihydrorhodamine 123 (DHR 123) were used. Western blotting was performed using anti-phospho $I{\kappa}B-\alpha$, anti-IKK-$\alpha$, anti-NF-${\kappa}B$ (p50, p65), anti-COX-2 and anti-iNOS respectively. Results : Mori Fructus inhibited the generation of $ONOO^-$, NO and $({\cdot}O_2^-)$ in the lipopolysaccharide (LPS)-treated mouse kidney postmitochondria in vitro. The generation of $ONOO^-$, NO and $({\cdot}O2^-)$ were inhibited in the Mori Fructus-administered ob/ob mice groups. The GSH/GSSG ratio decreased in the ob/ob mice, whereas they improved in the Mori Fructus-administered groups. Mori Fructus inhibited the expression of phospho $I{\kappa}B-\alpha$, IKK-$\alpha$, COX-2, iNOS genes, and thereby the activation of NF-$I{\kappa}B$. Conclusions : These results suggest that Mori Fructus is an effective $ONOO^-$, $({\cdot}O_2^-)$ and NO scavenger, and therefore it might be a potential therapeutic drug against the inflammation process and inflammation-related diseases.
Kim, Young-Hwan;Lee, Min-Ja;Lee, Hye-Sook;Kim, Jung-Guk;Park, Won-Hwan
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.25
no.1
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pp.92-99
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2011
Topical natural antioxidants are a useful strategy for the prevention of oxidative stress mediated cardiovascular disease including atherosclerosis. From the viewpoint of this underlying principle, the screening of natural plant extracts with scavenging activity for pro-oxidant reactive species is a primary requirement for the development of new topical antioxidant formulations. Euryale ferox Salisbury (EF) is botanical name and it's pharmaceutical name is EURYALES SEMEN (ES). The stems and branchs of EF have been used as a traditional herbal medicine for the treatment of dysentery, diarrhea, leucorrhoea, incontinence and paralysis of joint. In this study, the antioxidant activity of extract from EF was studied in vitro methods by measuring the antioxidant activity and free radical scavenging activity by TEAC and DPPH, measuring the scavenging effects on reactive oxygen species (ROS) [superoxide anion, hydroxyl radical] and on reactive nitrogen species (RNS) [nitric oxide and peroxynitrite] as well as measuring the inhibitory effect on $Cu^{2+}$-induced human LDL oxidation. The EF extracts were found to have a potent scavenging activity, as well as an inhibitory effect on LDL oxidation. In conclusion, the EF extracts have antioxidative effects in vitro system, which can be used for developing pharmaceutical drug against oxidative stress and chronic degenerative disease such as atherosclerosis.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.25
no.3
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pp.471-481
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2011
Clove has been frequently used as anti-diabetic, anti-microbial, anti-inflammatory, anesthetic drug and remedies for stomachache by coldness. In this study, the antioxidant activity of extract from Clove was studied in vitro methods by measuring the antioxidant activity by TEAC, measuring the scavenging effects on reactive oxygen species (ROS) [superoxide anion, hydroxyl radical] and on reactive nitrogen species (RNS) [nitric oxide and peroxynitrite] as well as measuring the inhibitory effect on $Cu^{2+}$-induced human LDL oxidation. Anti-platelet aggregation and anti-thrombotic effects of Clove extracts were studied ex vivo methods by mesuring the inhibitory effect on thrombin induced platelet aggregation and the fibrinolytic activity. The Clove extracts were found to have a potent scavenging activity, as well as an inhibitory effect on LDL oxidation in vitro. Moreover Clove extracts were exhibited remarkable inhibitory effect on platelet aggregation and fibrinolytic activity. In conclusion, the Clove extracts have anti-oxidative and anti-atherosclerotic effects in vitro and ex vivo system, which can be used for developing pharmaceutical drug against oxidative stress and atherosclerosis.
Kim, Hyuck;Lee, Min-Ja;Lee, Hye-Sook;Jung, Hyun-Jung;Choi, Sung-Kyu;Lee, Chang-Sub;Park, Won-Hwan
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.23
no.3
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pp.631-638
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2009
GLEDITSIAE SPINA (GS) has been used as folk remedies traditionally for treatment of antiphlogistic and antifebrile agents. An ethanol extract and its fraction of GS were assessed to determine the mechanism of its antioxidant activity. Also, inhibitory effect of extract from GS and its fraction measuring the inhibitory effect on $Cu^{2+}$-induced human low-density lipoprotein (LDL) oxidation. GS ethanol extract and its fraction exhibited a concentration-dependent reactive oxygen species (ROS) and reactive nitrogen species (RNS) scavenging activities, including trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC), OPPH radical, superoxide anion, hydroxyl radicals, peroxynitrite and nitric oxide, using different assay systems. Furthermore, the GS ethanol extract and its fraction showed dose-dependent protection of LDL oxidation induced by $CuSO_4$. In addition, the GS ethanol extract and its fraction were characterized as containing a high amount of total phenolics. These results suggest that GS ethanol extract and its fraction might be helpful for preventing oxidative stress and protecting LDL oxidation.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.25
no.2
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pp.280-293
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2011
There is currently increased interest in the identification of antioxidant compounds that are pharmacologically potent and have low or no side effects. Plants produce significant amounts of antioxidants to prevent the oxidative stress caused by photons and oxygen, therefore they represent a potential source of new compounds with antioxidant activity. FARFARE FLOS has been frequently used on the respiratory system including bronchitis, phthisis. In this study, the antioxidant activity of extract from FF was studied in vitro methods by measuring the antioxidant activity by TEAC, measuring the scavenging effects on reactive oxygen species (ROS) [superoxide anion, hydroxyl radical] and on reactive nitrogen species (RNS) [nitric oxide and peroxynitrite] as well as measuring the inhibitory effect on Cu2+-induced human LDL oxidation. The FF extracts were found to have a potent scavenging activity, as well as an inhibitory effect on LDL oxidation. And this study was designed to evaluate whether FFEA may ameliorate oxidative stress and inflammatory status through the antioxidative mechanism in LPS-stimulated RAW 264.7 murine macrophage cell line. Treatment of RAW 264.7 cells with FFEA significantly reduced LPS-stimulated inflammatory response in a dose-dependent manner. In conclusion, the FF extracts have anti-oxidative and anti-inflammatory effects in vitro system, which can be used for developing pharmaceutical drug against oxidative stress and atherosclerosis.
Gelidium (G.) elegans is a red alga inhabiting intertidal areas of North East Asia. We examined anti-oxidative and anti-inflammatory effects of G. elegans, depending on drying and extraction conditions, by determining reactive oxygen species (ROS) and nitric oxide (NO) in 3T3-L1 and RAW 264.7 cells. Extraction yields of samples using hot air drying (HD) and far-infrared ray drying (FID) were significantly higher than those using natural air drying (ND). The 70% ethanol extracts showed the highest total phenol and flavonoid contents compared to other extracts (0, 30, and 50% ethanol) under tested drying conditions. The scavenging activity on 2,2-diphenyl- 1-picrylhydrazyl (DPPH) and nitrite correlated with total phenol or flavonoid content in the extracts. The greatest DPPH scavenging effect was observed in 70% ethanol extract from FID and HD conditions. The production of ROS and NO in 3T3-L1 and macrophage cells greatly decreased with the 70% ethanol extraction derived from FID. This study suggests that 70% ethanol extraction of G. elegans dried by FID is the most optimal condition to obtain efficiently antioxidant compounds of G. elegans.
Oxidative stress by free radicals is a major cause of neuronal cell death. Excitotoxicity in hypoxia/ischemia causes an increase in reactive oxygen species (ROS) and a loss of mitochondrial membrane potential (MMP), resulting in dysfunction of the mitochondria and cell death. Pinelliae Rhizoma (PR) is a traditional medicine for incipient stroke. We investigated the effects of PR Water-Extract on the modulation of ROS and MMP in a hypoxic model using cultured rat cortical cells. PR Water-Extract was added to the culture medium at various concentrations (0.25${\sim}$5, 5.0 ${\mu}g/ml$) on day in vitro 12(DIV12), given a hypoxic shock (2% $O_2$/5% $CO_2$, $37^{\circ}C$, 3 hr), and cell viability was assessed on DIV15 by Lactate Dehydrogenase Assay (LDH assays). PR Water-Extract showed a statistically significant effect on neuroprotection (10${\sim}$15% increase in viability; p<0.01) at 1.0 and 2.5 ${\mu}g/ml$ in normoxia and hypoxia. Measurement of ROS production by $H_2DCF-DA$ stainings showed that PR Water-Extract efficiently reduced the number and intensity of ROS-producing neurons, especially at 1 hr post shock and DIV15. When MMP was measured by JC-1 stainings, PR Water-Extract efficiently maintained high-energy charged mitochondria. These results indicate that PR Water-Extract protects neurons in hypoxia by preventing ROS production and preserving the cellular energy level.
Kim, Kyung-Ae;Yi, Hyo-Seung;Yun, Hyun-Jeong;Park, Sun-Dong
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.23
no.6
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pp.1320-1331
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2009
Oxidative stress and inflammation are important events in the development of chronic inflammatory diseases including arthritis, atherosclerosis, diabetes, hypertension. Cynomorium songaricum (CS) has been used as a traditional Korean herbal medicine, and it is currently used in traditional clinics to treat frequent urination, spermatorrhea, weakness of the sinews and constipation in the folk medicine. The aim of this study was to determine whether fractionated extracts of CS inhibit free radical generation such as DPPH radical, superoxide radical, nitric oxide and peroxynitrite, production of nitrite an index of NO, $PGE_2$, iNOS, COX-2 and pro-inflammatory cytokines in lipopolysaccharide (LPS)-treated RAW 264.7 macrophages. Cytotoxic activity of extracts on RAW 264.7 cells was measured using 5-(3-caroboxymeth-oxyphenyl)-2H-tetra-zolium inner salt (MTS) assay. Our results indicated that the most superior extract which scavenged DPPH radical, reactive oxygen species (ROS) and RNS was CS ethyl acetate extract (CSEA). Moreover, CSEA significantly inhibited the LPS-induced NO, $PGE_2$ production and iNOS, COX-2 expression accompanied by an attenuation of TNF-$\alpha$, IL-$1{\beta}$ and IL-6 formation in macrophages. Furthermore, CSEA treatment also blocked LPS-induced intracellular ROS production and the activation of NF-${\kappa}B$. These findings indicate that CSEA inhibits the production of pro-inflammatory mediators and cytokines via the suppression of ROS production and NF-${\kappa}B$ activation. Take together, these results indicate that CSEA has the potential for use as an natural anti-oxidant and an agent of anti-chronic inflammatory diseases.
Kim, Yeo Jin;Cho, Eun Ju;Lee, Ah Young;Seo, Weon Taek
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.49
no.2
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pp.138-147
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2021
The overproduction of reactive nitrogen species (RNS) and reactive oxygen species (ROS) causes oxidative damage to neuronal cells, leading to the progression of neurodegenerative diseases. In this study, we determined the nitric oxide radical (NO), hydroxyl radical (·OH), and superoxide anion radical (O2-) scavenging activities of apigenin. Our results showed that apigenin exhibited remarkable, concentration-dependent ·OH, O2-, and NO radical scavenging activities. Particularly, apigenin indicated the strongest ·OH radical scavenging activity with 93.38% in the concentration of 100 µM. Furthermore, we also investigated the protective effects of apigenin against hydrogen peroxide (H2O2)-induced oxidative stress in SH-SY5Y cells. The H2O2 treatment resulted in a significant decrease in cell viability, as well as an increase in lactate dehydrogenase (LDH) release and ROS production compared with the H2O2-nontreated SH-SY5Y cells. However, the cell viability significantly increased in the apigenin-treated group, as well as inhibited ROS generation and LDH release compared with the H2O2-induced control group. To elucidate the protective mechanisms of apigenin against oxidative stress in SH-SY5Y, we analyzed the apoptosis-related protein expression. The apigenin treatment resulted in the downregulated expression of apoptosis-related protein markers, such as cytochrome C, cleaved caspase-3, poly (ADP)-ribose polymerase (PARP), and B-cell lymphoma 2-associated X (Bax), as well as the upregulated expression of anti-apoptosis markers such as B-cell lymphoma 2 (Bcl-2). In this study, we report that apigenin exhibits a neuroprotective effect against oxidative stress in SH-SY5Y cells. These results suggest that apigenin may be considered as a potential agent for neurodegenerative disease prevention.
Hong, Seong In;Ghimire, B.;Hong, Young Jun;Choi, Eun Ha
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2015.08a
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pp.155.1-155.1
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2015
Nowadays, Plasma has been used in biological, medical such as wound healing, plant grow, killing cancer. When plasma generated, UV light and ROS(Reactive oxygen species), RNS(Reactive nitrogen species) can generated and those things effect to biological material. So we made simple plasma device using needle type of electrode and generated plasma. We used three kinds of gas and measured applied voltage and current. Also we observed optical emission spectrum. Using deuterium ramp, we can observed absorption spectrum and calculated radical density by lambert-beer's law. It is around ~1016cm3. And we can see the time-resolved absorption spectrum from monochromator, PMT(photo multiply tube), IV-converter, oscilloscope.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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