(1) 산란후 유정란의 RNA량은 계속 증가하여 제 5일에 최고 (제 1일의 약 2.1배)에 달하고 제 6일부터 약간 감소된다. 이와 같은 RNA 량의 변동은 잠란의 배자형성 및 발육과 밀접한 관계가 있는 것으로 생각된다. (2) 무정란의 RNA 량은 산란직후부터 유정란의 그것에 비하여 대단히 적고 (약 절반임) 제 4일까지 약간의 증가를 보이나 제 5일부터 감소한다. (3) 조사유정란은 방사선조사(3,000 r)후 제 2일까지는 RNA 량이 약간 증가하나 그 후부터는 별 변동이 없다. 즉 방사선 조사로 란 RNA 합성이 크게 억제됨을 알 수 있다.(4) 침산처리란은 침산처리 제 4일부터 RNA 량이 격증하여 부화 1일 전인 제 7일까지 계속된다. 비침산란은 해기간중 RNA 량의 변동이 거의없다. 조사침산처리란 (1,500 r)에 있어서는 조사후 제 3일까지는 비조사란과 달라 RNA 량이 감소되었다가 제 4일부터 격증하여 제 7일까지 계속된다.
RNA 함량이 증가되고, 증식속도가 더 빠른 효모 변이주를 선별하기 위해, 모균주 Saccharomyces cerevisiae MTY62 세포에 화학적 돌연변이제인 ethylmethane sulfonate를 처리하여, YPD 배지에서는 잘 자라고 KCl 함유 배지에서는 자라지 않는 변이주들을 선별하였다. 이 변이주들 중 시험관 및 플라스크 배양을 통해 균체농도와 RNA 함량이 모균주 MTY62에 비해 각각 1.5배, 1.3배 증가한 M40-10 변이주를 최종적으로 선별하였다. 변이주 M40-l0을 발효조 회분배양한 결과, 최대비증식속도는 $0.38 h^{-1}$ , RNA 농도는 3210 mg-RNA/1, RNA 함량은 183mg-RNA/g-DCW 값을 보여, 모균주에 비해 각각 23%, 15%, 12%씩 증가하였다. M40-10 변이주를 간헐적 유가배양한 결과, 최대 균체농도는 35.6 g-DCW/1을, 최대 RNA 농도는 5677mg-RNA/l을, RNA함량은 160 mg-RNA/g-DCW을 나타내어 모균주보다 우수하였다. 일정속도의 유가배양에서도 M40-10 변이주의 최대 균체농도는 46.4g-DCW/1, RNA 농도는 6270mg-RNA/1, RNA 함량은 135mg-RNA/g-DCW을 보였다. 이들 유가배양에서 배양 중반기인 20시간 전후에서는 모균주에 비해 변이주의 세포농도는 30%, RNA 농도는 10% 정도 증가되었다. 또한 유가배양 말기까지도 RNA 분해는 거의 일어나지 않아, M40-10 변이주는 산성 RNase 활성이 크게 감소한 변이주임을 알 수 있었다.
천연풍미소재로 정미성 nucleotide 함량이 높은 효모추출물을 만들기 위해서 세포내 RNA 함량이 높은 효모균주 S , cerevisat MTY 62를 선별하여TRh, 당밀과 CSL배지로 발효조 회분배양과 유가배양을 수행하였다. 여러가지 단양한 간헐적 유가배양 중에서 40% 당밀과 20% CSL의농축기질액을 50ml 다섯번 공급하는 간헐적 유가배양 (IFB-IV) 에서 최대 세포농도는 33.8g-DCW/1 RNA 농도는 5221 mg/l RNA 함량은 153 mg-RNA/g DCW 값을 나타내었다. 일정속도의 유가배양에서는 기질 요액(40% molasses, 20% CSL)을 배양 9~13시간에서는 49 ml/h 13~21 이시간에서는 24 ml/h 그 이후로는 18 ml/h 로 기질공급속도를 단계적으로 감소시키는 유가배양 (CFB-III) 에서 42.7g-DCW-1 최대 세포농도를 5545 mg RNA/1의 RNA농도를 보여, 간헐적 및 일정 속도 유가배양 중에서 가장 높은 세포농도와 RNA 농도 값을 나타내었다. 그러나 RNA 함량 면에서는 가장 낮은 130 mg-RNA/g-DCW 값을 보여다. 즉 세포농도가 높을수록 RNA 함량은 감소하는 경향을 나타내었다. 이 상의 두 가지 유가배양에 대해 비증식속도 ($\mu$)에 따른 RNA 함량을 조사한 결과, $\mu$값이 증가할수록 RNA 함량도 증가하였다. 그러나 일정한 $\mu$에서는 일정속도의 기질공급 방식보다 간헐적 기질공급 방식이 더 높은 RNA 함량을 나타내었다.
In order to maximize the RNA accumulation and biomass production in Saccharomyces cerevisiae MTY62, a high-content RNA yeast strain, fed-bach cultures were performed with optimized industrial medium including molasses and corn steep liquor. Among the feeding modes examined, the constant feeding mode resulted in the cell concentration of 35.7 g-DCW/L and the RNA concentration of 5434 ${\mu}g-RNA/mL$, which were about 2-fold increased levels, compared to the results of bach culture. However, the RNA content (153 mg-RNA/g-DCW) in the fed-batch cultures was lower than that in the batch culture (171 mg-RNA/g-DCW).
This study was conducted to measure the total protein, DNA, and RNA contents of corpus luteum(CL) in various stages of estrous cycle and pregnancy. CLs were collected from a local slaughterhouse and stages of the estrous cycle of CL were classified as CL1~2, days 1 to 10; CL3(with/without central cavity), days 11 to 17; CL4, days 18 to 20 by method of Ireland et. al(1980) and stages of the pregnancy of CL were classified as P1~3, months 11~3: P4~6, months 4~6; P7~9, months 7~9 of pregnancy. CL3 with/without central cavity(CC) was identified as described by Kastelic et. al.(1990)-CL with CC, more than 2mm in diameter; CL without CC, less than 2mm in diameter. In total protein content, CL3 with CC was significantly lower than P7~9(p<.05). The total DNA content was lower in CL3 with CC than CL3 without CC and CL4(p<.05). In protein : DNA ratio, CL3 with CC was significantly lower than CL4(p<.05), CL3 without CC was significantly lower than P7~9(p<.05), CL4 was significantly lower than CL3 with CC, P1~3 and P7~9(p<.05). No differences were observed in RNA content, protein:RNA ratio, RNA/DNA of CLs in stages of estrous cycle and pregnancy.
진딧물이 하나의 ribosomal RNA 유전자(rDNA)단위는 총 길이가 13,061bp이며 총 G/C비율은 59%이다. 그것을 구성하고 있는 각 영역의 길이와 G/C비율은 다음과 같다. 5’ETS는 G/C비율이 69%이고 843bp이다 . 18S rRNA 는 2,469bp이며 G/C비율은 59%이다. ITS I길이는 229bp이며 70%의 G/C비율이다. 5.8S rRNA는 160bp이며 63%의 G/C비율이다. ITS II는 325bp이며 70%dml G/C비율이다. 28S rRNA는 4, 147bp이고 60%의 G/C비율이다. IGS는 4,888bp로 55%의 G/C비율이다.
The effects of temperatures, starvation, and kind of foods on growth, RNA/DNA ratio and protein contents during metamorphosis and early juvenile stage of olive flounder (Paralichthys olivaceus) were examined. During metamorphosis, warm-acclimated fish showed higher RNA and DNA content than those of the cold-acclimated fish, excepting H stage (28 DAH) at which the ratio was higher at cold temperature. RNA/DNA ratio during metamorphosis showed similar values at two temperatures tested. However, after 42 DAH warm-acclimated juveniles had higher DNA content compared with cold-acclimated fish, resulted in marked decreases in RNA/DNA ratios. Higher RNA content at H stage of cold-acclimated fish was consistent with an increase in protein content. Growth of fish rearing at warm temperature was higher than those of fish at cold temperature during all experiments. In starvation experiment, contents of DNA, RNA and protein significantly decreased. Even though there were no significant differences in total length (TL) and body weight between the live mysid-fed and artificial pellet-fed fish at 35 mm TL, both RNA/DNA and protein/DNA ratios of the former group was significantly higher than those of the latter due primarily to lower DNA content of the live mysid-fed group. The results from this study suggest that temperature, starvation and kind of foods should be considered when RNA/DNA ratio applied to assessing the cultured larval and juvenile fish condition.
Short interfering RNA(siRNA)는 특별한 gene의 발현을 막는데 사용될 수 있고 그 gene의 기능과 치료의 적용에 많은 가능성을 가지고 있지만, 효과적인 siRNA를 디자인하는 방법은 아직까지 명확하지 않다. 효과적인 siRNA는 서열적인 경향을 가지고 있는데 낮은 G/C content, Sense strand의 3' 끝에 적은 안정성과 1번 위치에는 G/C, 19번 위치에는 A/U의 존재 여부를 들 수 있다. 이러한 특성 말고도 최근에는 mRNA의 2차구조가 RNAi 작용에 중요한 역할을 하게 되는데 복잡한 구조(hairpin, multi loop)를 가지고 수소결합을 많이 하여 안정한 상태에 있는 부분은 siRNA의 기능을 크게 줄어들게 한다. 또한, siRNA가 특정한 mRNA에 작동하도록 BLAST 검색을 하여 부작용의 가능성을 배제한다.
The influence of refeeding with either vitamin, mineral, fibre of water on protein synthesis and mRNA content in the liver and breast muscle of fasted chicks was investigated. At 15 d of age, chicks were fasted for 2 d and then refed either vitamin, mineral, fibre or water. The fractional synthesis rate (FSR) of protein was measured after 30 min of refeeding by using a large dose injection of L - 2, $6[^3H]$ phenylalanine. In the liver, FSR was reduced by fasting and tended to increase but not significantly by refeeding with vitamin or mineral. FSR was not affected by refeeding with fibre or water. There was no influence of fasting and refeeding on ribosomal capacity (the RNA : protein ratio) and ribosomal efficiency (total protein synthesised per total RNA). The absolute synthesis rate (ASR) of liver protein and hepatic mRNA content were reduced by fasting and unchanged by refeeding. In the muscle, FSR, ASR and mRNA content were significantly decreased by fasting and not recovered by refeeding with either vitamin, mineral, fibre or water. It concluded that vitamin, mineral, fibre and water have little capacity to stimulate liver and muscle protein synthesis reduced by fasting.
In order to investigate the characteristics for RNA accumulation, continuous cultures of S. cerevisiae MTY62 under the carbon-limitation or carbon-phosphate-limitation were performed. In the carbon-limited chemostat, the highest RNA content of 144 mg-RNA/g-dry cell was observed at the dilution rate of $0.30\;hr^{-1}$. In the carbon and phosphate-limited chemostat, the culture condition with the dilution rate of $0.25\;hr^{-1}$ gave the maximal RNA content of 209 mg-RNA/g-dry cell. The accumulation rate of RNA $(mg-RNA/L\;{\cdot}\;hr)$ was decreased at higher dilution rate in the carbon and phosphate-limited chemostat.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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