• 한국수산과학회지
• /
• 제51권3호
• /
• pp.328-331
• /
• 2018

We developed and subsequently characterized mouse monoclonal antibodies (MAbs) against nervous necrosis virus (NNV, RGNNV genotype). We established six hybridoma clones secreting MAbs against NNV antigen: 2B1, 2B11, 2C12, 13C1-1, 13C1-2 and 14D11. All six MAbs belonged to the IgG2a isotype with a kappa light chain and their reactivity recognized against the 41 kDa coat protein of NNV by Western blot analysis. The affinity constants of the six MAbs were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). All six MAbs reacted with two NNV isolates (SgNag05 and Gemunodo06), while no reactivity was observed with five know fish viruses, namely marine birnavirus, infectious pancreatic necrosis virus, viral hemorrhagic septicemia virus, hirame rhabdovirus, and infectious hematopoietic necrosis virus. Moreover, high ELISA optical density (OD) values (0.87-1.42) were observed in the brain tissues of NNV-infected sevenband grouper, while low OD values (less than 0.12) were recorded in the brain tissues of uninfected fish. These results suggest that these six MAbs are highly competent and useful for the detection of NNV with the RGNNV genotype.

• 한국어병학회지
• /
• 제25권2호
• /
• pp.111-116
• /
• 2012

본 연구에서는 2006-2008년 남해안 일대의 해상가두리에서 사육중인 능성어에서 발생하는 viral nervous necrosis (VNN)의 발생양상을 조사하였다. VNN은 사육 수온이 $24-26^{\circ}C$ 범위인 8월부터 발생하기 시작하여 수온이 $20-25^{\circ}C$ 범위인 9-10월까지 지속되었고, 성어보다는 치어에서 폐사율이 높게 나타나는 것으로 확인되었다. 폐사되는 패턴으로는 급성으로 인한 대량폐사와 소량으로 지속적으로 폐사되는 경우가 확인되었다. 능성어로부터 분리된 NNV 분리주들의 coat protein gene을 계통분석한 결과, 분리주들은 모두 RGNNV 유전자형에 속하였다. 이상의 결과로 능성어 양식장에서의 VNN은 RGNNV type의 NNV에 의해 여름철 7-9월(사육수온: 약 $24^{\circ}C$)에 치어뿐만 아니라 성어에서 발생하는 것으로 확인되었다.

• 한국어병학회지
• /
• 제34권2호
• /
• pp.133-140
• /
• 2021

With the recent isolation of a new betanodavirus in shellfish, Korean Shellfish Nervous Necrosis Virus (KSNNV), it has also been identified the reassortant KSNNV of two RNA segments, in which one segment is KSNNV genotype but the other one is known genotype. In this study, we confirmed that the ressortant KSNNVs obtained in previous screening study of our laboratory for betanodaviruses in shellfish were KS/RGNNV and RG/KSNNV type by performing two consecutive multiplex RT-PCR on each RNA1 and RNA2 segment (R1- and R2-discriminative multiplex two-step RT-PCR, respectively) to determine the genotype of each segment based on the size of amplicon. In the pathogenicity analysis, none of the reassortants induced specific external symptoms or mortality of VNN, but viruses of 2 × 10⁴~10⁵ copies/mg or more were detected at 14 days after injection (10⁷ copies/fish) in brain tissues of 4 species except for crucian carp and common carp among the 6 species of juvenile fish used. In addition, the histopathological features of weak but distinct vacuole formation were also found in the brain of these infected fish, but no difference was found between the two reassortants KS/RGNNV-KG and RG/KSNNV-CM.

• 한국어병학회지
• /
• 제31권2호
• /
• pp.71-79
• /
• 2018

2015년 2월부터 2018년 8월까지 총 1,253 마리의 자연산 명태 (Gadus chalcogrammus)를 강원도 고성 아야진항 근해에서 정치망을 사용하여 포획한 후, 바이러스 (viral hemorrhagic septicemia virus, VHSV; nervous necrosis virus, NNV; marine birnavirus, MABV) 모니터링을 RT-PCR법으로 수행하였다. One-step PCR법으로 비장시료 및 뇌시료에서는 대상 바이러스가 모두 검출되지 않았으며, 일부 시료를 two-step PCR법으로 검사한 결과 VHSV는 19.7% (36/183)의 비장시료에서 검출되었다. 또한, NNV는 4.4% (8/183)의 비장시료, 1.2% (3/259)의 뇌시료에서 검출되었다. 검출된 바이러스의 계통분석 결과, 기존의 국내에서 분리되는 바이러스의 유전형에 각각 속하는 것으로 나타났다 (Genotype IVa, RGNNV genotype). 바이러스의 분리를 시도하지 않아 검출된 바이러스의 활성은 알 수 없지만, 모든 양성 시료가 two-step PCR법으로 검출되었으므로 매우 낮을 것으로 추측된다.

• 한국어류학회지
• /
• 제29권3호
• /
• pp.157-164
• /
• 2017

2015년 겨울, 우리나라 남해안 소재 육상 양식장에서 사육 중이던 능성어의 약 30%가 폐사하였다. 수온 $9{\sim}12^{\circ}C$의 겨울철에 발생한 능성어 폐사는 신경괴사성바이러스 (NNV) 감염에 의한 바이러스성뇌망망증 (VER)으로 밝혀졌다. 시험어는 비정상적인 유영, 배를 위로한 채 수면을 떠 다니는 현상, 체색흑화, 안구백탁 및 부레의 과도한 팽창 소견을 보였다. 원인 바이러스는 일반적으로 고수온기 능성어에 감염되는 RGNNV genotype이 아닌, 냉수성 어류에서 분리되는 BFNNV genotype으로 밝혀졌으며, NNV 가장 근연관계가 높은 Pacific cod betanodavirus (PCNNV)와 99.7~100% 상동성을 보였다. 병리조직학적 관찰 결과, 바이러스성뇌망망증 (VER)의 특징적인 병변인 뇌조직의 공포화 및 괴사를 수반하였다. 이 연구는 수온 $12^{\circ}C$ 이하의 겨울철에 능성어에 감염된 BFNNV genotype에 대한 첫 보고이다.