From the soils of soybean fields in Cotton Branch Station (CBS) and Pine Tree Station (PTS), Arkansas, USA, various single spore isloates of sudden death syndrome (SDS) pathogen were obtained on modified Nash & Snyder's medium (MNSM) with dilution plating technique and transferred to potato dextrose agar (PDA) medium to identify the cultural colony shape. The colony shapes of these isolates resembled F. solani isolate 171 which was white and chalky shaped on MNSM and most of them had unique form of morphology which produced white margin and blue center colony on PDA. Although, some of these isolates had more dark blue or showed slightly different color, all isolates that were selected randomly for green-house inoculation assay produced typical foliar symptoms on leaves of soybean, Hartz 6686. To determine the genetic differences among the isolates, mitochondrial DNA restriction fragment length polymorphism (RFLP) was conducted with fourty isolates from both fields, using mtDNA probes, 2U18 and 4U40, derived from Colletotrichum orbiculare. We obtained distinctive RFLPs in each treatment of restriction enzyme, EcoRI and HaeⅢ. Isolates, 11-2-5 and 14-3-1-1, from CBS and isolates, 104-3-1-2 and 701-1-5-1, from PTS showed different band patterns from 171 in both or in either treatment of restriction enzymes. Even if some of these isolates showed heterogeneous, they were more closer to 171 than PN603. And, also, rest of the thirty-six isolates had exactly same polymorphisms as 171 in each treatment of restriction enzyme. Although, some of the isolates showed the different morphological shape on PDA and slightly different band patterns on RFLPs, all of the isolates selected on MNSM due to their distinctive colony shape from other fungi produced the typical foliar symptoms on soybean leaves in greenhouse inoculation assay. It might be suggested that these isolates were not genetically different from check isolate 171 and they were unique strain of F. solani.
Many prospective studies have confirmed the predictive value of plasma fibrinogen levels for vascular diseases, including ischemic heart disease. Several polymorphisms of the $\beta$fibrinogen gene have been investigated in relation to plasma fibrinogen levels. The blood samples for DNA were collected from 109 healthy Koreans who have no relationship by blood (67 males and 42 females) in due consideration of some other factors such as gender, age, and smoking status. Four polymorphisms of the $\beta$fibrinogen gene that consist of HaeIII, AluI, MaII and BcII restriction fragment length polymorphisms (RFLPs) were investigated to examine the associations between RFLPs and plasma fibrinogen levels. In conclusion, the significant associations between HaeIII, AluI, MnII RFLPs(H$_1$H$_2$, M$_1$M$_2$, $A_1$A$_2$) and the concentration of plasma fibrinogen were shown by the smokers as well as by the old people more than 50, whereas the association between BcII and plasma fibrinogen were shown no connection with the status of age and smoking. The concentration of plasma fibrinogen was significantly shown higher by the old people ($\geqq$50) by the younger people ($\leqq$49) in male and also higher by the smokers than by the nonsmokers.
The methods of isoelectric focusing of 4 isozymes in polyacrylamide horizontal slab gels and restriction fragment length polymorphisms (RFLPs) were applied to characterize the biochemical phenotypes of 19 cultivars of barley. Among 19 barley cultivars screened, 7 esterase, 3 phosphoglucose isomerase, 4 peroxidase and 2 alcohol dehydrogenase isozyme phenotypes were distinguished by isoelectric focusing. When purified DNA of each cultivar was digested with restriction enzyme EcoRV and analyzed its RFLPs with barley DNA markers pMSU 51 or pMSU 71, two distinct RFLP patterns were shown. Based on the four isozymes and two RELP polymorphisms, 19 cultivars of barley were classified into 13 biochemical phenotypes. Phylogenetical relationships among 13 biochemical phenotypes classified were determined using Nei's F-statistics and the phylogenetic dendrogram was constructed.
Hypertension is a multifactorial disorder in which the genetic and environmental factors are involved. In a view of the effects for hypertension as a risk factor for hypertension, we investigated the genotype and allele frequencies in the four RFLPs of the apo AI-CIII-AIV gene cluster (G to A mutation at position -75 in the apo AI promoter SstI RFLP in the ape CIII gene and HincII and HinfI RFLPs in the apo AIV gene) in the Korean patients with hypertension and normal controls. The AA genotype frequency of the G to A promoter polymorphism in hypertensives was significantly higher than that of normotensives (P < 0.05). None of the other polymorphisms showed a difference in genotype frequency between two groups. Therefore, our result suggest that the G to A promoter polymorphism of the ape AI gene may be useful as genetic marker in the ethiology of hypertension.
The mitochondrial DNA (mtDNA) restriction fragment length polymorphi는 (RFLPs) of five populations were analyzed to delineate the stocks of Penaeus chinensis (Osbeck) in the Yellow Sea. Comparison of P. chinensis with P. japonicus to clarify the nucleotide divergence between two species was also carried out. Based on the fragment patterns, three composite haplotypes were analyzed in P. chinensis mtDNA as four naplotypes were in P. japonicus. Most individuals of each P. chinensis population are shared by one dominant haplotype. Another two haplotypes haying variations at the C/a I and hull sites were also distributed evenly in the Korean and Chinese populations. It is suggested that the gene exchange occurring between populations in the Yellow Sea is frequent. Average length of the mtDNA molecule was estimated to be about 16.44 kb in P. chinensis and 16.31 kb in P. japonicus, Sequence divergence (p) of mtDNA between two species estimated by using Upholt's (1977) fomula was $13.7\%$.
This study was performed to detect genetic variation of the heart fatty acid-binding protein (H-FABP) gene by PCRRFLPs approach and its association with intramuscular fat (IMF) content. Data from 223 individuals, including one Chinese native pig breed and four western pig breeds, were analyzed. The results showed that for the H-FABP gene, there was one polymorphic HinfI site in the 5'-upstream region, whereas there were one HaeIII and one HinfI (marked as $HinfI^*$) polymorphic site in the second intron, respectively. The three PCR-RFLPs were present in all breeds tested. The allele frequencies, however, revealed significant differences between them (p<0.05). Furthermore, the allele frequency distribution of HinfI in the Laiwu Black and that of $HinfI^*$ in the Hampshire breed were at disequilibrium, which might be the result of selective breeding. Results also indicated that for HinfI, HaeIII and $HinfI^*$ HFABP RFLP, significant (p<0.05) contrasts of 0.78%, -0.69% and 0.72% were detected in the least square means of IMF content between the homozygous genotype HH and hh, DD and dd, BB and bb classes, respectively. It implied that the HHddBB genotype had the highest IMF content in this experimental population and these H-FABP RFLPs could serve, to some extent, as genetic markers for use in improvement of IMF content.
Leptin and IGFBP-3 are two proteins that play an important role in growth and metabolism of the animals. They are also involved in the immune function of animals and, thus, are candidate genes for the study of association with immune functions. Polymerase Chain Reaction-Restriction Fragment Length Polymorphism (PCR-RFLP) of these two genes was done to screen 64 crossbred (Holstein Friesian${\times}$Hariana) female calves of one year of age. From each RFLPs (fragments) three genotypes were observed. In all the RFLPs the mutant homozygotes were very less in numbers and, hence, were excluded from the least squares analysis. The serum IgG level was estimated using SRID assay. The mean level of serum IgG was $28.83{\pm}2.73mg/ml$. The effect of these identified genotypes on serum IgG level of calves at one year of age was analysed using least squares analysis. The HaeIII RFLP-AB genotype had significantly (p<0.05) higher serum IgG level ($31.86{\pm}3.05$) than the HaeIII RFLP-AA ($25.62{\pm}2.96$) genotype. There was no significant effect of leptin genotypes on the IgG level. The present results indicated a role of the IGFBP-3 gene on serum IgG level of cattle calves.
Based on the co-linearity in the Triticeae, comparative RFLP analysis of 2M chromosome of Ae. comosa Sibth et Sm. was performed with 2MS and 2M additional lines of Triticum aestivum L. cv. Chinese Spring. Among the wheat RFLP probes conserved in the short arms of wheat chromosome 2, those above psr912 were located on the long arms of 2M in Aegilops comosa. The rest probes on the short arm and all the probe sequences on the long arm of group 2 chromosome in wheat were conserved on the equivalent chromosomal position in Aegilops comosa. So, it is apparent that some chromosomal segment from the short arm had been transferred to long arm while reconstructing 2M chromosome relative to wheat chromosomes. The break-point was located between psr912 and psr131 of the short arm. This rearrangement of chromosome 2M might be a molecular evidence of the M genome speciation from an ancestral type.
DNA restriction fragment length polymorphisms(RFLPs) were used for the classification of 22 leading silkworm races and wild silkworm, Bombyx mandarina. A genomic DNA library from silkworm was partially constructed and was prescreened to evaluate the selected DNA probes. Three DNA probes (SP1-13, SP1-28, 10-42) were selected to determine the polymorphism between silkworm races. As a result, high polymorphism with the probe SP1-28, moderate polymorphism with SP1-13 and monomorphism with 10-42 were obse-rbed.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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