• 제목/요약/키워드: REF

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단핵구세포주 THP-1의 분화과정에서 Ref-1의 역할 (The Role of Ref-1 in the Differentiation Process of Monocytic THP-1 Cells)

  • 김다솔;김강미;김관회;박영철
    • 생명과학회지
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    • 제34권4호
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    • pp.271-278
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    • 2024
  • Redox factor (Ref)-1은 세포질과 핵을 오가며 산화환원(redox) 환경에 민감한 transcription factors의 조절과 손상된 DNA의 교정 등 다양한 기능을 수행하는 단백질이다. 하지만, 단핵구(monocyte)의 대식세포(macrophage)로의 분화과정에서 Ref-1의 역할은 잘 알려져 있지 않다. 본 연구에서는 인간 단핵구세포주 THP-1을 이용하여 Ref-1의 단핵구 분화과정에 미치는 영향을 조사하였다. 분화제 phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA)는 시간이 지날수록 세포의 부착능을 증가시키고 포식기능의 현저한 증가를 보이지만, Ref-1의 세포 내 양을 현저히 감소시켰다. Ref-1의 억제제인 E3330와 siRNA 기법을 이용한 Ref-1 knock- down은 PMA에 의한 세포 부착능과 막표면 분화인자의 발현을 현저히 감소시켰다. 이는 PMA에 자극을 받은 THP-1 세포의 분화 초기과정에는 Ref-1의 역할이 절대적으로 필요하다는 것을 의미한다. 단핵구 분화과정에서 Ref-1의 작용기전을 조사하기 위하여, PMA로 자극한 THP-1 세포의 세포질과 핵에서 Ref-1의 분포를 조사하였다. 놀랍게도, PMA 자극은 Ref-1을 빠르게 핵으로 이동하는 결과를 나타내었다. Ref-1의 핵으로의 이동이 단핵구 분화에 필요함을 증명하기 위하여, nuclear localization sequence (NLS)가 제거된 Ref-1 vector를 사용하였다. 그 결과, 핵으로의 이동이 제한된 ∆NLS Ref-1의 과발현은 PMA 자극에 의한 막표면 단백질의 발현 억제와 포식기능의 현저한 감소를 보였다. 이를 종합하면, Ref-1은 분화제 자극에 의한 분화 유도 초기과정에 핵으로 이동하여 다양한 분화인자의 발현에 관여하는 것으로 보인다.

Bradykinin으로 자극한 혈관내피세포에서 Ref-1의 세포내 과발현에 의한 NO 생성 증진 효과에 대한 연구 (Adenoviral-Mediated Ref-1 Overexpression Potentiates NO Production in Bradykinin-Stimulated Endothelial Cells)

  • 송주동;김강미;이상권;김종민;박영철
    • 생명과학회지
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    • 제17권7호통권87호
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    • pp.905-909
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    • 2007
  • Redox Factor-1 (Ref-1)은 손상된 DNA의 복구 및 많은 세포내 산화환원에 민감한 transcription factors의 활성화에 기여하는 양면의 역할을 수행하는 단백질이다. 본 연구에서는 혈관내피세포에서의 nitric oxide (NO) 생성과정에서 Ref-1의 역할을 살펴보았다. Ref-1의 세포내 과발현을 위하여 adenoviral vector를 사용하였고 bradykinin으로 자극한 혈관내피세포에서 생성되는 NO 측정을 위하여 fluorophore DAF-2를 사용하였다. Ref-1 과 발현은 bradykinin으로 자극한 혈관내피세포의 NO 생성을 증가시켰다. 또한 자극되지 않은 Ref-1 과발현 세포는 viral vector로 감염되지 않은 그리고 control로 사용한 AdD1312로 감염된 세포보다 높은 fluorescence intensity를 나타내었다. 이와 비슷하게, Ref-1 과발현은 bradykinin으로 자극한 세포뿐만 아니라 자극하지 않은 세포에서도 감염되지 않은 그리고 AdD1312로 감염된 세포와 비교할 때 endothelial NO synthase (eNOS)의 활성을 크게 증가시켰다. 이는Ref-1 자신이 eNOS의 효소활성을 직접 조절할 수 있다는 것을 의미한다. 결론적으로 Ref-1이 혈관계에서 NO생성에 의해 기인되는 endothelium-dependent vasorelaxation에서 중요한 역할을 한다는 것을 시사한다.

마우스 내피세포주 MAE의 NO 생성과정에서 과발현된 Ref-1의 AKT 활성 조절에 대한 연구 (Effect of Overexpressed Ref-1 on AKT Phosphorylation for NO Production in Mouse Aortic Endothelial Cell Line)

  • 송주동;이상권;박영철
    • 생명과학회지
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    • 제18권12호
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    • pp.1651-1656
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    • 2008
  • Redox factor-1 (Ref-1)은 산화적으로 손상된 DNA의 복구와 세포내 산화환원에 민감한 전사인자들의 활성화에 필수적인 역할을 수행한다. 본 연구에서는 마우스 유래 혈관내피세포주 (MAE)에서 nitric oxide (NO) 생성과정에 관여하는 AKT 활성화의 측면에서 adenoviral vector를 사용하여 과발현된 Ref-1의 역할을 살펴보았다. NO 측정을 위하여 fluorophore DAF-2를 사용하였다. 과발현된 Ref-1은 bradykinin으로 자극한 세포뿐만 아니라 자극되지 않은 세포의 NO 생성도 증가시켰다. 놀랍게도 이 과발현된 Ref-1은 AKT의 직접적인 인산화를 유도하였으며, AKT 저해제로 널리 사용되는 wortmannin에 의해 반응이 억제되었다. 또한, Ref-1에 의한 직접적인 AKT 활성화를 증명하기 위하여 HA-tagged activation-deficient AKT를 과발현시키는 adenoviral vector를 사용하였다. 이 방법을 이용한 AKT 활성의 저해는 과발현된 Ref-1에 의한 NO 생성 및 bradykinin 자극에 의한 NO 생성을 억제하였다. 이들 결과는 Ref-1이 마우스 혈관내피세포에서 직접적인 AKT 인산화를 통하여 eNOS 활성화를 유도한다는 것을 의미한다.

Yeast two-hybrid system을 이용한 Ref-1 (redox factor-1) 결합 단백질의 분리 및 동정 (Detection of Ref-1 (Redox factor-1) Interacting Protein Using the Yeast Two-hybrid System)

  • 이수복;김규원;배문경;배명호;정주원;안미영;김영진
    • 생명과학회지
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    • 제14권1호
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    • pp.26-31
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    • 2004
  • 본 연구는 redox regulator로 알려 진 Ref-1 (Redox factor-1)과 결합하는 새로운 단백질을protein-protein interaction의 원리를 이용한 방법인 yeast two-hybrid assay로 검색, 동정하고, 검색된 단백질의 in vitro, in vivo 기능을 규명하는 데 그 목적을 두고, mouse 11-day Embryo cNA library를 prey로, full length REF-1을 bait로 하여 yeast strain 인 HF7C에 cotransformatiom시킨 후 histidine, leucine, tryptophan이 결핍된 SD plate에서 키워 자란 yeast transformants를 $\beta$-galactosidaseassay하여 screening하여 분리한 세 개의 clone중 한 clone이 DNA sequencing으로 확인한 결과 mouse thioredoxin임을 확인하였다.

Ape1/Ref-1 Stimulates GDNF/GFR ${\alpha}$ 1-mediated Downstream Signaling and Neuroblastoma Proliferation

  • Kang, Mi-Young;Kim, Kweon-Young;Yoon, Young;Kang, Yoon-Sung;Kim, Hong-Beum;Youn, Cha-Kyung;Kim, Dong-Hui;Kim, Mi-Hwa
    • The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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    • 제13권5호
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    • pp.349-356
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    • 2009
  • We previously reported that glial cell line-derived neurotropic factor (GDNF) receptor ${\alpha}$ 1 (GFR ${\alpha}$ 1) is a direct target of apurinic/apyrimidinic endonuclease 1 (Ape1/Ref-1). In the present study, we further analyzed the physiological roles of Ape1/Ref-1-induced GFR ${\alpha}$ 1 expression in Neuro2a mouse neuroblastoma cells. Ape1/Ref-1 expression caused the clustering of GFR ${\alpha}$ 1 immunoreactivity in lipid rafts in response to GDNF. We also found that Ret, a downstream target of GFR ${\alpha}$ 1, was functionally activated by GDNF in Ape1/Ref-1-expressing cells. Moreover, GDNF promoted the proliferation of Ape1/Ref-1-expressing Neuro2a cells. Furthermore, GFR ${\alpha}$ 1-specific RNA experiments demonstrated that the downregulation of GFR ${\alpha}$ 1 by siRNA in Ape1/Ref-1-expressing cells impaired the ability of GDNF to phosphorylate Akt and PLC ${\gamma}$-1 and to stimulate cellular proliferation. These results show an association between Ape1/Ref-1 and GDNF/GFR ${\alpha}$ signaling, and suggest a potential molecular mechanism for the involvement of Ape1/Ref-1 in neuronal proliferation.

DOI 서비스의 중심 CrossRef와 KISTI의 DOI Center (CrossRef the leading DOI service organization & DOI Center in KISTI)

  • 오혜민;조은진;강무영
    • 한국정보관리학회:학술대회논문집
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    • 한국정보관리학회 2011년도 제18회 학술대회 논문집
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    • pp.67-70
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    • 2011
  • 국내학술지의 국제적 이용과 인용확대를 위해 국가출연기관인 한국과학기술정보연구원(KISTI)은 CrossRef에 Co-Sponsoring Member로 가입하여 디지털 콘텐츠의 식별과 접근을 위한 고유 식별 체계인 DOI(Digital Object Identifier) 번호부여 및 DOI 기탁사업을 추진해오고 있다. CrossRef는 논문, 회의자료, 단행본 자료의 DOI 기탁업무를 수행하는 전 세계적인 비영리기관이며 DOI에 기반하여 Cited-by linking 서비스를 시행하고 이용자들의 필요에 따른 다양한 학술서비스를 제공하고 있다. 따라서 본 논문에서는 CrossRef에서 시행하는 서비스인 DOI, CrossCheck, Cited-by linking을 소개하고 KISTI를 통한 CrossRef서비스와 KISTI에서 운영하는 DOI Center 대해 기술하고자 한다.

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DOI 수집 API 개발에 관한 연구 (A Study on the Development of DOI Lookup API)

  • 김선태;예용희
    • 정보관리연구
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    • 제39권1호
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    • pp.221-237
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    • 2008
  • CrossRef는 DOI 식별자 및 학술메타정보를 수집할 수 있는 다양한 쿼리(OpenAPI)를 제공하고 있으며, 이를 활용해 출판사 및 정보서비스 기관에서 다양한 서비스를 개발하도록 독려하고 있다. 본 연구에서는 CrossRef에서 제공하는 쿼리를 면밀히 분석하였으며, 다양한 방법으로 DOI를 자동수집 하는 API를 개발하였다. 또한 자체적으로 학술메타데이터를 보유한 기관이 개발된 API를 활용할 수 있는 방법을 제시하였다.

Reference Evapotranspiration Calculator Software를 이용한 기상관측소 기준증발산 추정 (Estimation on Trends of Reference Evapotranspiration of Weather Station Using Reference Evapotranspiration Calculator Software)

  • 최원호;최민하;오현제;박주양
    • 대한토목학회논문집
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    • 제30권2B호
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    • pp.219-231
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    • 2010
  • Reference Evapotranspiration Calculator Software (REF-ET)는 ASCE 및 FAO 기준증발산량을 포함한 총 17개의 FAO Penman-Monteith (PM) 방정식의 연산을 동시에 수행할 수 있는 프로그램으로서, 본 연구에서는 REF-ET에 대한 상세한 소개와 함께 기상관측소의 관측자료를 이용하여 REF-ET의 효용성을 논하였다. REF-ET는 각종 PM 방정식들에 대한 시일 월 단위 모의와 지역적 특성의 반영 및 결측자료에 대한 보정 등이 가능하다. REF-ET를 이용하여 서울 기상관측소의 29년간 증발산량을 모의한 결과, 일복사량에 주로 좌우되는 FAO24-Rd 식과 1957-Makk 식의 상관계수가 각각 0.89와 0.88로 높게 나타났으며, 이는 소형증발접시를 이용한 기준증발산량 관측값이 공기 동력학적 증발량만을 주로 반영하기 때문인 것으로 사료된다. 또한 RMSE/bias 분석을 통해 기준증발산 방정식들에 의한 계산값이 증발접시로부터의 기준증발산량에 비해 다소 과대평가되는 현상을 나타내었으나, 이 경우에도 1957-Makk 식이 가장 정확한 것으로 나타났다. 일단위 시계열 분석시 1957-Makk 식은 여름철의 증발산량을 저평가하는 경향을 나타내었으나, 전체적으로 1.06 mm/day의 오차로 증발산량을 모의 가능하였다. 차후 기상관측자료의 정확도를 높이는 연구들과 REF-ET를 병행한다면, 해당 지역 및 기간에 대한 증발산량 모의 및 관련 특성인자를 파악하는 연구에 활용도가 높을 것으로 기대된다.

Overexpression of Ref-1 Inhibits Lead-induced Endothelial Cell Death via the Upregulation of Catalase

  • Lee, Kwon-Ho;Lee, Sang-Ki;Kim, Hyo-Shin;Cho, Eun-Jung;Joo, Hee-Kyoung;Lee, Eun-Ji;Lee, Ji-Young;Park, Myoung-Soo;Chang, Seok-Jong;Cho, Chung-Hyun;Park, Jin-Bong;Jeon, Byeong-Hwa
    • The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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    • 제13권6호
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    • pp.431-436
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    • 2009
  • The role of apurinic/apyrimidinic endonuclease1/redox factor-1 (Ref-1) on the lead (Pb)-induced cellular response was investigated in the cultured endothelial cells. Pb caused progressive cellular death in endothelial cells, which occurred in a concentration- and time-dependent manner. However, Ref-1 overexpression with AdRef-1 significantly inhibited Pb-induced cell death in the endothelial cells. Also the overexpression of Ref-1 significantly suppressed Pb-induced superoxide and hydrogen peroxide elevation in the endothelial cells. Pb exposure induced the downregulation of catalase, it was inhibited by the Ref-1 overexpression in the endothelial cells. Taken together, our data suggests that the overexpression of Ref-1 inhibited Pb-induced cell death via the upregulation of catalase in the cultured endothelial cells.

하이퍼미디어 기술에 기반한 통합 OPAC구현에 관한 연구 (A Study on Development of Integrated OPAC Based on Hypermedia Techniques)

  • 안태경;김현희
    • 정보관리연구
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    • 제27권1호
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    • pp.1-39
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    • 1996
  • 본 연구는 EconRef이라는 통합 OPAC의 구현에 관한 것으로서, 이 모델은 참고사서의 효율적인 업무처리를 가능하게 해주고, 이용자에게 조직적이고 신속한 정보서비스를 제공하는 것이다. 통합 OPAC은 REGIS와 The Book House와 같은 실제의 시스템을 기초로 하여 KPWin++를 이용하여 구현하였다. KPWin++는 전문가시스템 쉘로서 하이퍼텍스트와 전문가시스템이 결합되어 있다. 이 통합 OPAC 시스템은 6개의 모듈로 참고봉사 전문가시스템 ; 문헌정보원, 전문가정보원, 통계정보원 ; OPAC ; 외부데이터베이스 ; 이용자안내 등으로 구성되었다. 시스템의 평가는 EconRef 시스템과 초급사서 및 고급사서를 비교하였고, 하이퍼텍스트와 전문가시스템이 결합된 OPAC인 REGIS 시스템과 비교하였다. 비교결과 EconRef 시스템은 고급사서와 유사한 반면 초급사서 보다는 우수한 것으로 나타났다.

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