This study characterized the genetic variations of 13 populations of Asplenium antiquum and its relative species using randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) markers. A total 88 scorable RAPD bands were generated by the 12 random oligo primers and were analyzed by Nei and Li's genetic distance. High genetic variability was detected between A. antiquum and A. nidus, with the range from 0.568 to 0.682. And slightly low genetic variations showed within the populations of same species. Seven populations of A. antiquum showed slight differences (0.000-0.216), and five populations of A. nidus showed similar low genetic variations (0.114 to 0.171). Two individuals from Sup-seom Island which are growing in might be the regenerated one from abroad. A. antiquum were clustered as two groups (Group I, Group II) by UPGMA phenogram. And five populations of A. nidus were clustered as two groups correlated with geographical distribution. The RAPD data was very useful to define the genetic variations and to discuss the phylogenetic relationships among A. antiquum and the related species..
The Sea:JOURNAL OF THE KOREAN SOCIETY OF OCEANOGRAPHY
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v.12
no.2
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pp.102-111
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2007
RAPD analyses using 60 OPERON primers and 13 URPs were performed in order to assess the genetic variation and frequency of polymorphisms in Korean salmonids. RAPDS were very reproducible and most useful at the sub-species level. In RAPD analysis, 138 polymorphic bands were detected between Oncorhynchus masou subspecies and 99 bands were generated in two types of rainbow trout. Estimated genetic distances between O. masou subspecies were 0.28794, and between wild rainbow trout and an albino mutant was 0.22786. Each species of salmonid was well characterized using URP 4R, the obtained bands could be useful as a species specific RAPD markers.
Ficus deltoidea Jack is an important and popular medicinal plant species found in the Malaysia. Plants are being collected and used based on morphology and authentication to prevent adulteration is not in practice. In this study, twenty-six accessions of F. deltoidea Jack were collected from Kelantan and Terengganu states of Peninsular Malaysia to examine their genetic similarities and differences using randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) technique. Out of 20 arbitrary primers, two primers (D-10 and D-11) were selected which produced reliable DNA polymorphism. D-10 and D-11 primers generated 138 RAPD bands ranging from 250 bp to 3000 bp. Ninety-nine of them were polymorphic loci (72%) and thirty-nine were nonpolymorphic loci (28%). A total of 56 bands with polymorphic loci were amplified with primer D-10 and analyzed by cluster analysis and UPGMA to present a dendrogram depicting the degree of genetic relationship among 26 accessions. Eight RAPD markers were sequenced to determine their identity. RAPD analysis showed the genetic diversity among 26 accessions of F. deltoidea Jack. The RAPD profile and RAPD marker sequences reported in this paper could be used in plant and/or plant material authentication. This study also suggested that RAPD can be a useful technique to study DNA polymorphism in F. deltoidea Jack.
In this study, we performed ovule culture after reciprocal crosses of two Alstroemeria accessions and investigated genetic contribution of parents by using RAPD markers. The best method was half-ovule culture on MS medium supplemented with $60g{\cdot}L^{-1}$ sucrose and $2.2g{\cdot}L^{-1}$ gelrite at 14 days after pollination. Embryos began to germinate after 6 weeks of culture. The complete plantlets were formed after 4 months of culture. In eight progenies and two parental cultivars, 59 polymorphic bands were obtained out of 89 total bands by RAPD analysis using 7 primers. Eight $F_1$ progenies from the crosses between two accessions using reciprocal crosses showed 1:1 contribution of maternal and paternal parents. It is confirmed that $F_1$ progenies were obtained from parental accessions by using RAPD markers. We conclude this cross combination showed pre-fertilization barriers with incompatibility between stigma or style, and pollen because progeny number was different in each cross combination. Thereby, it warrants overcoming pre-fertilization barrier together with post-fertilization barrier in order to broaden the heterozygosity within progeny populations in Alstroemeria breeding program.
Water dropworts, Oenanthe javanica and O. javanica var. japonica are called "minari" in Korea and are eaten as a vegetable. Cicuta virosa is common European water hemlock and has toxic properties, such as cicutoxin. Molecular variations of water dropwort species in Korea were investigated using random amplified polymorphic DNA (RAPD). The six populations were studied with 10 primers (Operon, OPB) for RAPD analysis. The 72 DNA fragments (bands) were found among six populations. Among these 72 bands, 61 (84.7%) bands were polymorphic. The typical populations of Cicuta virosa in Korea were small, isolated, and patchily distributed for natural populations and they maintained a high level of genetic diversity. However, when cultivated populations of O. javanica var. japonica were large and widely grown in rice paddies as vegetables, they maintained a lower genetic diversity than those of C. virosa and wild populations of O. javanica. Although the diversity indices of wild populations were shown to be higher than those of cultivated populations, no significant difference for measures of genetic variability was shown. Total genetic diversity value (HT) was 0.342. The interlocus variation in the within-population genetic diversity (HS) was 0.201. The proportion of total genetic variation due to differences among populations (GST) range was 0.414, indicating that 41.4% of the total variation was among populations. In conclusion, the RAPD technique was a useful method for discrimination between C. virosa and O. javanica. In addition, RAPD-OPB markers could further distinguish the strains from different food sources.
The incorporation of RAPD markers into the previous classical and RFLP genetic linkage maps will facilitate the generation of a detailed genetic map by compensating for the lack of one type of marker in the region of interest. The objective of this paper was to present features we observed when we associated RAPD map from an intraspecific cross of a Glycine max$\times$G. max, 'Essex'$\times$PI 437654 with the public RFLP map developed from an interspecific cross of G. max$\times$G. soja. Among 27 linkage groups of RAPD map, eight linkage groups contained probe/enzyme combination RFLP markers, which allowed us the incorporation of RAPD markers into the public RFLP map. Map position rearrangement was observed. In incorporating L.G.C-3 into the public RFLP linkage group a1 and a2, both pSAC3 and pA136 region, and pA170/EcoRV and pB170/HindIII region were in opposite order, respectively. And, pk400 was localized 1.8 cM from pA96-1 and 8.4 cM from pB172 in the public RFLP map, but was localized 9.9 cM from i locus and 18.9 cM from pA85 in our study. A noticeable expansion of the map distances in the intraspecific cross of Essex and PI 437654 was also observed. Map distance between probes pA890 and pK493 in L.G.C-1 was 48.6 cM, but it was only 13.3 cM in the public RFLP map. The distances from the probe pB32-2 to pA670 and from pA670 to pA668 in L.G. C-2 were 50.9 cM and 31.7 cM, but they were 35.9 cM and 13.5 cM in the public RFLP map. The detection of duplicate loci from the same probe that were mapped on the same or/and different linkage group was another feature we observed.
Chung, Sung Jin;Park, Su Jeong;Choi, Young In;Kim, In-Kyung;Lee, Ka-Yeon;Kim, Hun-Joong;Lee, Geung-Joo
Korean Journal of Agricultural Science
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v.40
no.2
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pp.115-121
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2013
Polymorphic bands of two fine-leaf zoysiagrass mutants (CNU 70-1, CNU 70-2) induced via a gamma-ray irradiation on seeds of Zoysia japonica were obtained by using randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) primers. The genotype-specific fragments were then converted into PCR-based sequence characterized amplified region (SCAR) markers, which are now amenable to detecting them among other zoysiagrass species widely noticeable in Korea. The CNU 70-1-specific primer set amplified about 900 bp successfully, while the CNU 70-6 marker produced the expected 1,500 bp band, by which those markers were nominated by CNU 70-1_900 and CNU 70-6_1500 SCARs, respectively. The developed SCAR markers can be an applicable tool in sod industry where illegal appropriation hampers breeder's right and profits due to the turfgrass plant vegetatively propagating.
Soybean [Glycine max (L.) Merr.] seed size is a important yield component and is a primary consideration in the development of cultivars for specialty markets. Our objective was to examine the consistency of QTLs for seed size across generations. A 68-plant F$_{2} segregation population derived from a mating between Marcury (small seed) and PI 467.468 (large seed) was evaluated with RAPD markers. In the F$_{2} plant generation (i.e. F$_{3} seed), three markers, OPL09a, OPM)7a, and OPAC12 were significantly (P<0.01) associated with seed size QTLs. In the F$_{2} ; F$_{3} generation (i.e., F$_{4} seed), four markers, OPA092, OPG19, OPL09b, and OPP11 were significantly (P<0.01) associated with seed size QTLs. Just two markers, OPL09a, and OPL09b were significantly (P<0.05) associated with seed size QTLs in both generations. The consistency of QTLs across generations indicates that marker-assisted selection for seed size is possible in a soybean breeding program.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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v.8
no.2
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pp.161-167
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2004
Silkworms sex determination drew high attention from researchers. Sex chromosomes on the silkworm are of ZW type for females and ZZ type for males. Chromosome W plays an important role in sex determination. Although several molecular linkage maps have been constructed for silkworm, very few markers are discovered on the W chromosome. In order to look for molecular markers and to further locate the Fern gene on chromosome W, we used genomic DNA from both female and male larvae of a silkworm strain named 937 as PCR templates for RAPD amplification with 200 arbitrary 10-mer primers. The amplification results showed three female-specific bands, namely ${OPG-07_496}, {OPC-15_1,660} and {OPE-18_1,279}$. Further verification, however, revealed no band from OPG-07 and OPC-15 in either sex in the strain 798, but OPE-18 provided female-specific band in the strains Suluan7 and C108, and absent in both males and strain 798. This indicates that the bands from ${OPG-07_496} and {OPC-15_1,660}$ are probably female-specific in strain 937, and the band from OPE-18 was probably amplified from a common segment shared by most strains. The genomic DNAs from OPG-07 and OPC-15 were cloned and sequenced. Sequence analysis showed that the DNAs from OPG-07 and OPC-15 have high identities with the retrotransposable elements, and DNA from OPC-15 contains a portion of sequence which probably encodes an eukaryotic translation initiation factor 4E binding protein (eIF4EBP).
Cucumber mosaic virus (CMV) is one of the most important viral diseases in pepper (Capsicum annuum L.), and several genes for resistance were reported in Capsicum spp. In Korea, a single dominant gene that is resistant to $CMV_{Fny}$ and $CMV_{P0}$ has been used for breeding. Recently, a new strain ($CMV_{P1}$) was reported that could infect cultivars resistant to both $CMV_{Fny}$ and $CMV_{P0}$. Therefore, breeding of more robust CMV-resistant cultivars is required. In this study, we surveyed the inheritance of $CMV_{P1}$ resistance and analyzed the location of the resistance loci. After $CMV_{P1}$ inoculation of various germplasms and breeding lines, one accession (ICPN18-8) showed no visual symptoms at 15 dpi (days post inoculation) but was susceptible after 45 dpi, and one resistant line (I7339) showed resistance until at 45 dpi. The latter line was used for tests of resistance inheritance. A total of 189 $F_2$ plants were examined, with 42 individuals showing resistance at 15 dpi and a phenotype segregation ratio close to 1:3 (resistant:susceptible plants). In a lateral ELISA test at 45 dpi, 11 plants showed resistance, and the segregation ratio was changed to 1:15. These results indicate that resistance in C. annuum 'I7339' is controlled by two different recessive genes; we named these resistance genes 'cmr3E' and 'cmr3L,' respectively. To locate these two resistant loci in the pepper linkage map, various RAPD, SSR, and STS markers were screened; only nine markers were grouped into one linkage group (LG). Only one RAPD primer (OPAT16) was distantly linked with cmr3E (22.3 cM) and cmr3L (20.7 cM). To develop more accurate markers for marker-assisted breeding, enriching for molecular markers spanning two loci will be required.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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