Lee, Sae A;Cho, Chul Min;Jang, Il Ho;Kang, Jung Sook
Biomedical Science Letters
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v.22
no.4
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pp.160-166
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2016
To provide a basis for a homogeneous fluorescence resonance energy transfer (FRET) immunoassay for celiac disease, we carried out a FRET experiment using guinea pig tissue transglutaminase (tTG) and antibodies to tTG (anti-tTG) purified from rat serum. Fluorescein was utilized as the probe, and a nonfluorescent dye, QSY 7 served as the quencher. We labeled anti-tTG and tTG with fluorescein isothiocyanate and QSY 7 succinimidyl ester, respectively. Fluorescein-labeled anti-tTG was the donor, and QSY 7-labeled tTG was the acceptor of the FRET experiment. When we titrated fluorescein-labeled anti-tTG with QSY 7-labeled tTG, we observed a large decrease in the steady-state fluorescence intensity, which was due to strong FRET from fluorescein-labeled anti-tTG to QSY 7-labeled tTG. Using time-resolved fluorescence spectroscopy, we could also observe a decrease in the fluorescence lifetime, which confirms the steady-state data. We expect that these results might be useful in the development of a novel fluorescence immunoassay for an easy screening and follow-up of celiac patients.
Kim, Jeong-Hwan;Choi, Seok-Keun;Lim, Wang-Jin;Chang, Hyo-Ihl
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.14
no.5
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pp.996-1003
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2004
Nonsteroidal anti-inflammatory drugs such as indomethacin induce severe gastric mucosal damage in humans and rodents. In the present study, the in vivo protective effect of astaxanthin on indomethacin-induced gastric lesions in rats was investigated. The test groups were injected with indomethacin (25 mg/kg) after the oral administration of astaxanthin (25 mg/kg) for 1, 2, and 3 days, while the control group was treated only with indomethacin. Thiobarbituric acid reactive substances in the gastric mucosa, as an index of lipid peroxidation, increased significantly after indomethacin administration and this increase was inhibited by oral administration of astaxanthin. In addition, pretreatment with astaxanthin resulted in a significant increase of the activities of superoxide dismutase (SOD), catalase, and glutathione peroxidase (GSH-px). Histologic examination clearly revealed acute gastric mucosal lesions induced by indomethacin in the stomach of the control group, but were not observed in that of the test group. These results indicate that astaxanthin activates SOD, catalase, and GSH-px, and removes the lipid peroxides and free radicals induced by indomethacin. It is evident that astaxanthin acts as a free radical quencher and antioxidant, and is an effective molecule in the remedy of gastric mucosal lesions.
The effect of the trehalose incorporation on the biological membranes was investigated with respect to the phase of the membranes using the fluorescence intensity change. Spherical phospholipid bilayers, vesicles, were prepared only with the variation in the phase of each layer via a double emulsion technique. In the aqueous inside of the vesicles, 8-Aminonaphthalene-1,3,6-trisulfonic acid disodium salt(ANTS) was encapsulated. As a quencher, p-Xylene-bis(N-pyridinium bromide)(DPX) was included in the buffer where the vesicles were dispersed. The fluorescence scale was calibrated with the fluorescence of ANTS vesicles in p-Xylene-bis(N-pyridinium bromide)(DPX)-included-buffer taken as 100% fluorescence and the mixture of ANTS and DPX in the buffer as 0% fluorescence. Trehalose injection into the vesicle solution led the distortion of the membrane. It was found that the distortion was related to the phase of each layer the vesicle up on the ratio of trehalose to lipid. In the identical measurements at glucose, the behavior of the distortion was completely different from that of trehalose. These results seem to depend on the stability of the vesicles, due to the osmotic and volumetric effects on the headgroup packing disruption.
Deoxygadusol (DO) and structurally related mycosporine-like amino acids, i.e. mycosporine glycine (MO) and mycosporine taurine (MT), were isolated from phytoplankton Prorocentrum micans and studied for the reactivity toward singlet oxygen. These water-soluble compounds with a cyclohexenone chromophore were all shown to be highly effective in quenching singlet oxygen ($^1$$O_2$), with the efficiencies being significantly larger compared with histidine, a well-known $^1$$O_2$ quencher. The $^1$$O_2$ reaction rate constant ( $k_{Q}$) of DG was determined to be 5.4 ${\times}$ 10$^{7}$$M^{-1}$$s^{-1}$ by a steady state method based on competitive inhibition of rubrene oxidation. The feasibility of this method was confirmed by estimating the $k_{Q}$ values for MG and two other quenchers, furfuryl alcohol and 1,4-diazabicyclo [2,2,2]octane, and comparing with those values determined by the time-resolved $^1$$O_2$ decay method in the previous work.ork.
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2014.02a
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pp.103.1-103.1
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2014
Due to their excellent optical and electrochemical properties, conjugated polymers have attracted much attention over the last two decades and employed to opto-electrical devices. In particular, conjugated polymers possess many attractive features that make them suitable for a variety of sensing task. For example, their delocalized electronic structures can be strongly modified by varying the surrounding environment, which significantly affected molecular energy level. In other word, conjugated polymers can detect and transduce the environmental information into a fluorescence signal. Conjugated polymers also display amplified quenching compared to small molecule counterparts. This amplified fluorescence quenching is attributed to the delocalization and migration of the excitons along the conjugated polymer backbones. Long backbones of conjugated polymer provide the transporting path for electron as a conduit, allowing that excitons migrate rapidly into quencher site along the backbone. This is often referred to as the molecular wire effect or antenna effect. Moreover, structures of conjugated polymers can be easily tailored to adjust solubility, absorption/emission properties, and regulation of electron/energy transfer. Based on this versatility, conjugated polymers have been utilized to many novel sensory platforms as a promising material. In this tutorial, I will highlight a variety of fluorescence sensors base on conjugated polymer and explain their sensory mechanism together with selected examples from reference literatures.
Proceedings of the Korea Society of Environmental Toocicology Conference
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2002.10a
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pp.164-164
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2002
에스트로젠을 처리한 송사리의 간으로부터 choriogenin vitellogenin estrogen receptor의 발현량을 전사수준에서 Real-time을 사용하여 정량.비교하였다. 시험어종으로는 부화 후 5개월 이상된 성숙한 수컷 송사리(Oryzias latipes)를(체중 약 250mg/마리)를 사용하여 17$\beta$-estradiol(25ppt, 50ppt, 100ppt)에 24시간 노출시켰다. Fluorescence dye는 choriogenin vitellogenin estrogen receptor의 경우 FAM (6-carboxyfluorescein)을 사용하였으며, $\beta$-actin의 경우는 VIC를 사용하였다. 프로브에 사용하는 quencher dye는 TAMRA(6-carboxy-N',N',N',N'-tetramethyl rhodamine)을 사용하였다. Internal control로 사용된 $\beta$-actin은 17$\beta$-estradiol의 농도에 상관 없이 0~10pM 범위에서 일정하게 발현됨을 보여주었다. vitellogenin choriogenin L 및 choriogenin H는 17$\beta$-estradiol의 농도에 의존하여 발현이 증가되는 용량-반응양상(Dose-dependent)을 나타내었다. 반면, estrogen receptor는 모든 처리군에서 $10^{-2}$pM 정도로 발혐됨에 따라 본 시험농도의 17$\beta$-estradiol에 의해서는 거의 유도발현이 되지 않음을 보여주었다. choriogenin L, choriogenin H, vitellogenin I 및 estrogen receptor 발현감수성을 비교한 결과, 25ppt 및 50ppt의 17$\beta$-esoadiol 농도에서는 ChgL > ChgH > VTG I >ER의 순으로 감수성이 높았으며, 100ppt 노출에서는 ChgL > VTG I > Chg H > ER의 순으로 감수성이 높게 나타났다. 결론적으로 choriogenin이 에스트로젠물질에 의한 가장 민감한 생체지표임을 알 수 있었다.
The fluorescence characteristics of copolymers of styrene-maleic anhydride(PSMAn), styrene-maleic acid (PSMA), and PSMA complexed with $Eu^{3+}$ (PSMA-Eu) in tetrahydrofuran were studied. The excimer of PSMA and PSMA-Eu with 75% mole fraction of styrene appears to have larger binding energy than that with 50% or 67% styrene. The ratio of excimer to monomer intensities showed little change with the increase of styrene concentration up to $8.0{\times}10^{-3}M$, indicating the excimer formation is due to intramolecular process. Three existing mechanisms for intramolecular excimer formation are considered inadequate to explain the observed behavior. The quenching of excimer intensity by benzyl-acetate, mesitylene, and $CCl_4$ is interpreted in terms of the molar volume of quencher.
We fabricated pyrromethene 597(PM597) solid-state dyes which were dissolved in PMMA(poly- methylmethacrylate) and characterized the lasing characteristics. The laser was end-pumped by a frequency doubled Q-switched Nd : YAG laser. We obtained the slope efficiency of $76\%$ at lasing wavelength of 585 nm. We demonstrated the laser lifetime to be more than 100,000 shots with output energy of 250 mJ and repetition rate of 4 Hz by adding singlet oxygen quencher DABCO(1,4-diazabicyclo [2,2,2]octane) to the solid-state dye.
The remote real-time uranium concentration analysis using nitrogen laser, optode, photomultiplier and optical fiber is studied. The optode for the remote collection of uranium fluorescence is designed. The fluorescence intensity at time zero is calculated in order to exclude the quenching effect and the temperature fluctuation and used for more precise estimation. The fluorescence change is very sensitive to the uranium concentration change. The method shows the detection limit of 0.06ppm and the linearity between 0.1ppm and 2ppm of the aqueous uranium concentration.
A simple and new uranium analysis technique for raffinate solution of nuclear fuel conversion process was developed using a time-resolved laser-induced fluorimetry. The addition of 4 M-phosphoric acid more than 10 times in volume to the raffinate sample was found to be efficient for obtaining stable uranium fluorescence signal which was not influenced by many fluorescence quenchers. A calibration curve of a good linearity for the fluorescence intensity vs. the uranium concentration was obtained at the range of 3.0$\times$10$^{-6}$-6.0$\times$10$^{-5}$ M U $O_2$$^{2+}$ in the raffinate samples.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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