Attempts were made to investigate the antagonistic activity of soil borne microorganisms Pseudomonas spp. and Trichoderma spp. against to the pathogens of turf diseases Rhizoctionia solani spp. and Pythiom spp. in vitro by a dual culture bioassay. Inhibition zone between the edge of the my-celium and the margin of each antagonistic bacteria, Pocudontonas, on potato dextrose agar was measured 3 days after incubation at 28˚C. Psudomonas spp. showed relatively high inhibition of mycelium growth of R. solani AG-i and Pythium spp. which cause brown patch and pythium blight, respectively. Antagonistic fungi Trichodenma spp. also showed effective inhibition against mycelium growth of both pathogens, more proper methods of measuring the inhibition effects were required because of fast growth of Trichodenna hypae. Brown patch and pythium blight both, re-quire most higher rate of fungicide use to control in golf curses in Korea. Application of antagon-istic microorganisms are useful as biological resources an approach to sole environmental contamination.
The mycelial growth of Pythium graminicola, P. ultimum, P. rostratum was best at -3 osmotic potential. P. monospermum was best grown at -8 bars osmotic potential. Mycelial growth by Pythium spp. was prevented at -42 bars for P. graminicola, P. ultimum and P. monospermum. Sporangial formation by P. graminicola and P. ultimum was influenced by water potential in much the same way as mycelial growth: -3 bars was maximum and -42 bars or below was minimal. Pythium spp. tested was grown faster on PDA than other media including oat meal agar. P. ultimum was best grown on any media among Pythium spp. tested.
1990년부터 1996년에 걸쳐 전국 35개 골프장에서 한지형잔디인 creeping bentgrass, Kentucky bluegrass 그리고 난지형잔디인 zoysiagyass의 잎마름 증상으로부터 Pythium spp. 125균주를 분리 하였고, 이를 동정한 결과 P. aphanidermatum, p. arrhenomanes, P. catenulatum, p. gramlnicola, p. myriotylum, P. oligandrum, P. periplocum, P. rostratum, P. torulosum, P. ultimum Trow var. ultimum 그리고 P. vanterpoolii로 모두 11개 종으로 동정되었다. 본 실험에서 사용한 semi-solid 상태의 'sucrose-asparagine bentgrass leaf culture' 방법을 이용할 경우 Pythium spp.의 동정에 필요한 포자낭, 장란기, 장정기 그리고 난포자의 형태적 특징의 관찰이 용이하였다. 동정된 Pythium spp.는 국내에서는 잔디류에 대하여 처음 보고되는 것이고, 이 중에서 P. arrhenomunes, P. cutenulatum, P. graminioota, P. oligandrum, P. periplocum, P. rostratum, P. torulosum 그리고 P. vanterpoolii는 국내에서 처음 보고되는 미기록종이다. P. myriotylum, P. rostratum, P. torulosum, P. vanterpoolii의 경우는 PCA 배지상에서 특이한 균사생장형을 나타내므로 이를 균 동정에 이용할 수 있었다.
To examine the control effect of damping-off on radish caused by Pythium spp., researchers used the isolates of a fungivorous nematode, Aphelenchus avenae, and antagonistic fungi, Trichoderma spp. These were used as biocontrol agents, either alone, or in combination. Growth rates of the A. avenae isolates and fungal damages by the nematodes varied depending on Trichoderma spp., which contained lower T. koningii and T. virens cultures than other Trichoderma cultures. Phythium spp. were damaged by all five Aphelenchus isolates, but the multiplication rate of nematode isolate Aa-3 was very poor. Antibiotic activity of T. virens and T. harzianum to Pythium spp. was stronger than that of T. koningii. Control efficacy against damping-off of radish was most enhanced under the treatment using the nematode-T. harzianum combination. On the contrary, the combinations of the nematodes and T. virens or T. koningii mostly did not increase or decreased their control effect vis-$\`{a}$-vis that of the nematodes or antagonistic fungi being used alone. The results suggest that the fungivorous nematodes may play a leading role in the disease control, and that the activity of the fungivorous nematodes may be activated by T. harzianum, but inhibited by T. koningii and T.virens.
Antibiotic activity of selected biocontrol agent Trichoderma harzianum ABGS-95 showed 59% to P. graminicola, 65% to P. aphanidermatum and 57% to Rhizoctonia solani compare to non-treated control. ABGC-95 showed resistant to major agrochemicals such as metalaxyl+mancozeb, etridiazole, propamocarb, toclofos methly, terbuconazole, pencycuron and flutolanil. The biocontrol agent T. harzianum ABGC-95 grew vigorously in low nutrient media and water agar. And sand mixture with wheat bran or mowing debris of zoysia grass also provided good growth of the organism. Application of sand mixture of Trichoderma spp. into aeration cores in golf showed most effective biocontrol of pythium blight. Top dressing application of T. harzianum ABGC-95 reached 83% control efficient while spray application of same biocontrol agent showed only 69% control. The biocontrol agent ABGC-95 successfully suppressed the population density of Pythium spp. in soil. The population density of total Pythium spp. in ABGC-95 treated soil was sustained almost same population at beginning(early May) up to end of August, while the population in untreated control plot was increased 5 times that of beginning and even 10 times in pathogen accumulated soil.
1976년(年) 9월(月) 일신품종계(日新品種係)인 수도(水稻)의 유유품종(維新品種)에 주(主)로 발생(發生)된 위조(萎凋)벼와 상자육균대(箱子育菌代) 및 답토양(畓土壤) 등(等) 대상(對象)으로 병해조사(病害調査) 열시(實施)한 결과(結果) Pythium spp와 몇가지 균핵(菌核) 병균류(病菌類)를 공리동정(公離同定)하였다. pythium속(屬) 가운데는 병원성(病原性)이 있고 고온(高溫)에서 잘자라는 Pythium aristosporum Vanterpool과 Pythium sp. Kythium myriotylum Drechsler 그리고 병원성(病原性)이 약(弱)하고 저온성(低溫性)으로 답토(畓土)에서 분리(分離)된 Pythium irregulare Buisman을 동정(同定) 균핵병균(菌核病菌)으로는 우리 나라의 병해목록(病害目錄)에는 미기록종(未記錄種)인 Sclerotivae hydrophilum(구상균씨병)(球狀菌核病)과 Sclerotium oryzae-sativae(복빛균)(福色核菌)였으며 이들 균핵병(菌核病)들의 병원성(病原性)을 보면 소립균핵병(小粒菌核病)이 강(强)한 편(便)이미 그외 균핵병(菌核病)들은 오래된 하부옆(下部葉)와 상병기생성(傷病寄生性)의 약(弱)한 병원성(病原性)을 보여주었다. 그러나 이들 균핵병(菌核病)의 분포(分布)는 답토양중(沓土壤中)에 상당(相當)한 밀도(密度)를 차지하고 있으므로 발생생태(發生生態)에 관(關)한 연구(硏究)가 이루어져야 할 것으로 믿는다.
국내 35개 골프장에 식재된 잔디류의 잎마름 증상으로부터 분리한 125개 Pythium spp. 균주 중 분리시기별, 골프장별 그리고 Pythium spp. 별로 선발한 44개 균주를 사용하여 실내실험을 통해 metalaxyl에 대한 감수성정도를 조사하였다. 다양한 농도(0, 0.1, 1.0, 10.0, 50.0, 100.0 및 $250.0{\mu}g\;a.\;i./ml$)로 metalaxyl을 함유한 Difco corn meal agar 배지에서 균사생장억제 정도를 조사한 결과 1.0과 $10.0{\mu}g\;a.\;i./ml$수준의 metalaxyl에 대해 감수성정도에 따라 크게 2 group으로 나눌 수 있었다. Metalaxyl 함량이 $10.0{\mu}g\;a.\;i./ml$에서 균사생장억제율은 감수성 group에 속한 31개 균쥬는 $66{\sim}98%$, 저항성 group에 속한 13개 균주는 $6{\sim}26%$이었고. $10.0{\mu}g\;a.\;i./ml$에서는 각각 $82{\sim}99%$와 $27{\sim}47%$를 나타냈다. 이처럼 metalaxyl에 저항성을 나타내는 Pythium spp.의 출현과 골프장 잔디에서의 분리는 국내에서 처음 보고되는 것이다. Metalaxyl에 저항성을 나타낸 Pythium spp. 균주 중 분리빈도가 상대적으로 높았던 P. graminicola 중 metalaxyl에 감수성을 나타내는 4개 균주와 저항성을 나타내는 3개 균주를 이용하여 pot 내 creeping bentgrass에 대하여 농약 스크리닝시험을 한 결과 metalaxyl 감수성 균의 경우 $6.25{\mu}g\;a.\;i./ml$ 처리구에서는 병 발생이 없었지만 저항성 균의 경우는 $12.5{\mu}g\;a.\;i/ml$와 그 이상의 처리구에서도 방제가 되지 않았다. 50.0과 $100.0{\mu}g\;a.\;i/ml$ 처리구에서는 creeping bentgrass에 약해를 나타냈다. 병원균 접종 전 약제처리가 발병 후 처리에 비하여 우수한 방제효과를 나타냈다.
Pythium spp. 균에 의해 발생되는 피시움마름병(Pythium blight)은 골프장 퍼팅 그린에서 문제가 되는 대표적 병해이다. 본 연구에서는 Pythium aphanidermatum를 피시움마름병 병원균으로 하여 생물학적 방제법에 이용할 수 있는 길항 미생물을 1차 선발하였고, 선발된 길항 미생물에 대해 폿트 수준의 생물 검정 실험을 실시하였다. 두 실험을 동해 선발된 미생물 중에서 Relative Performance Indies 값을 기준으로 가장 우수한 것을 선별하여 피시움마름병에 대한 길항 미생물로 최종 선발하였고, 동정한 결과 Bacillus subtilis로 밝혀졌다. 최종 선발된 미생물은 B. subtilis GB-0365라 명명하였고, 화학 농약에 대한 내성 실험과 혼용 처리에 따른 효과를 검정하여 화학 농약과 시간의 차이를 두고 교호 살포할 경우 방제효과가 보다 높게 나타났다. 골프장의 간이 묘포장에서 자연 발생된 피시움마름병에 대한 B. subtilis GB-0365의 방제효과를 검증한 결과, 무처리 대비 방제가는 56.4%, 화학 농약 대비 방제가는 60.9%로 우수한 방제 효과을 가진 것으로 판명되었다.
본 연구에서는 7종의 약용식물(송절, 지구목, 측백, 대풍자, 유백피, 은행잎, 참오동나무)을 사용하여 잔디의 주요 병원균 6종(R. solani AG 2-2(IV), R. solani AG-1 IB, Pythium sp., S. homoeocarpa, R. cerealis, C. graminicola)을 대상으로 항진균 활성을 실험하였다. 디스크 확산법으로 항진균 활성이 있는 약용식물 추출물을 선발하였고, 선발된 추출물을 사용하여 균사생육 억제 효과를 검정하였다. 디스크 확산법으로 실험 한 결과 7종의 약용식물 중 송절, 측백, 유백피 등 3종의 추출물에서 항진균 활성이 있는 것으로 나타났다. 송절 추출물 1,000배 처리에서 Pythium sp.에 대하여 100%, C. graminicola에 대하여 84.3%의 균사생육 억제율을 나타내었으며, 특히 Pythium sp.에 대해서는 5,000배 처리에서도 89.5%의 균사생육 억제율을 나타내었다.
A lichen-forming fungus was successfully isolated by discharged spore method from Korean lichen (Hetero-dermia sp.) and cultivated in pure culture. The isolate JR0012 inhibited mycelial growth of several plant-pathogenic fungi. Mycelial growth of the four Pythium spp. tested was completely inhibited. Potato dextrose broth was found to be the medium favorable for large-scale production of antibiotics from the isolate. Anti-fungal substances produced in axenic culture were partially purified. This is the first report in Korea of lichen-forming fungus successfully isolated and which exhibited strong antifungal activity against plant-pathogenic fungi, especially the four Pythium spp..
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[게시일 2004년 10월 1일]
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