벤조피렌은 IARC에 의해 그룹 1로 분류된 다환방향족 탄화수소 유기물로서 불완전 연소 시 부산물로 발생되며 유전독성과 발암성이 강한 것으로 알려져 있다. 벤조피렌의 오염원은 매우 다양하여 환경오염 등으로 인해 조리 또는 가공과정에서 열분해 되어 생성되는 것으로 알려져 있다. 전 세계적으로 가장 널리 음용되고 있는 대표적인 기호음료인 원두커피 또한 생두를 볶는 과정에서 고온의 배전 과정을 거치는 제조공정을 감안할 때 벤조피렌이 생성될 가능성이 있어 본 연구에서는 생두의 종류와 로스팅 정도에 따른 원두커피분말과 원두커피 추출물의 색도 및 벤조피렌 함량을 조사하였다. Hunter scale의 L값과 b값은 배전이 진행될수록 감소하는 경향을 보였고 a값은 약배전 시까지는 증가하였다가 중, 강배전으로 진행될수록 감소하는 결과를 보였다. 벤조피렌의 검출한계(LOD)와 정량한계(LOQ)는 0.03과 $0.09{\mu}g/kg$이었다. 원두커피 분말의 벤조피렌 함량은 강배전의 조건에서 로스팅한 원두분말에서만 검출되었다. 생두를 강배전 조건으로 로스팅을 실시한 경우에는 $0.142{\sim}0.757{\mu}g/kg$의 함량을 보였고 중배전 및 약배전 조건의 커피분말과 원두커피 추출물 모두 불검출의 결과를 보였다. 이는 식품의약품안전청에서 식용유지에서 벤조피렌의 기준을 $2.0{\mu}g/kg$ 이하로 설정한 기준에 미치지 않는 안전한 수준이며, 원두의 로스팅 과정이 벤조피렌이 생성되는 고온에 미치지 못하고 열원방식이 직화식이 아닌 전기적인 열풍방식으로 이루어지기 때문인 것으로 판단된다.
Formation of adduct was studied in benzo(a)pyrene(BP)- and doxorubicin(Dx)-treated human NC-37 cells and isolated nuclei. Major adducts formed were determined by fluorescence absorption spectrophotometery and DNA-lin-ked protein assay. When isolated nuclei were exposed to carcinogens BP and DMBA, and anticancer drugs m-AMSA, ellipticine and Dx, varying degrees of adduct formation occured between DNA-protein complex and these drugs. When the mixture was centrifuged 1.7 M sucrose solution, binding BP and DMBA appeared to be similar between the sediment and the supernatant. When the sediment was centrifuged again with 0.35% polymin-P, the amount of BP bound was 2-fold greater in the protein(1077$\pm$55cpm) than in DNA fraction (470$\pm$20cpm), whereas that of DMBA was 1.6-fold greater in the DNA than in protein fraction. In the case of m-AMSA, ellipticine and Dx, the amount of binding was slightly greater in supernatant than in sediment in centrifugation with 1.7 M sucrose, and more than 3 times greater in the DNA- than in protein- fraction in centrifugation with 0.35% polymin P. DNA fractions which associated with a subset of nonhistone chromosomal protein were isolated from NC-37 cells exposed to $^{3}$H-BP and $^{14}$C-Dx. They were separated into two distince components DNA-S and DNA-P by centrifugation with 2M Nacl chromatin extraction. The results indicated that the amount of $^{3}$H-BP bound was 6.0-fold greater in DNA-P as compared with DNA-S, while that of $^{14}$C-Dx binding appreaed to be 6.2-fold greater in DNA-S than in DNA-P fraction. When $^{3}$H-BP binding wasdetermined in the presence of cold Dx, the amount of binding was reduced only in the DNA-P fraction, indicating that the interaction between DNA and protein is decreased. Gene expression by these drugs, BP treated cells were increased to compare with nomal cells but reduced by treatment with BP-Dx. These results suggest that the protein moiety which tightly bound to DNA-P fraction may play an important role in the regulation of gene expression.
An analytical method the determination of benzo(a)pyrene (BaP) and its hydroxylated metabolites, 1-hydroxybenzo(a)pyrene (1-OHBaP), 3-hydroxybenzo(a)pyrene (3-OHBaP), benzo(a)pyrene-4,5-dihydrodiol (4,5-diolBaP) and benzo(a)pyrene-7,8-dihydrodiol (7,8-diolBaP), in rat urine and plasma has been developed by HPLC/FLD and GC/MS. The derivatization with alkyl iodide was employed to improve the resolution and the detection of two mono hydroxylated metabolites, 1-OHBaP and 3-OHBaP, in LC and GC. BaP and its four metabolites in spiked urine were successfully separated by gradient elution on reverse phase ODS $C_{18}$ column (4.6 mm I.D., 100 mm length, particle size 5 ㎛) using a binary mixture of MeOH/H₂O (85/15, v/v) as mobile phase after ethylation at 90 ℃ for 10 min. The extraction recoveries of BaP and its metabolites in spiked samples with liquid-liquid extraction, which was better than solid phase extraction, were in the range of 90.3- 101.6% in n-hexane for urine and 95.7-106.3% in acetone for plasma, respectively. The calibration curves has shown good linearity with the correlation coefficients (R²) varying from 0.992 to 1.000 for urine and from 0.996 to 1.000 for plasma, respectively. The detection limits of all analytes were obtained in the range of 0.01-0.1 ng/mL for urine and 0.1-0.4 ng/mL for plasma, respectively. The metabolites of BaP were excreted as mono hydroxy and dihydrodiol forms after intraperitoneal injection of 20 mg/kg of BaP to rats. The total amounts of BaP and four metabolites excreted in dosed rat urine were 3.79 ng over the 0-96 hr period from adminstration and the excretional recovery was less than 0.065% of the injection amounts of BaP. The proposed method was successfully applied to the determination of BaP and its hydroxylated metabolites in rat urine and plasma for the pharmacokinetic studies.
채소류 및 과일류 중 PAHs 분석방법을 확립하고 오염실태 파악을 위하여 서울, 춘천, 대전, 광주, 부산의 5대 도시 시장에서 채소류 13종, 과일류 5종 총 210건을 채취하였다. 균질화된 시료를 dichloromethane으로 초음파추출하고 탈수한 후 Sep-Pak Florisil Cartridge로 정제하여 HPLC/FLD로 동시 정량 분석하였다. 시료에 표준물질을 spike하여 전처리 후 기기분석한 결과, 각각의 PAH에 대한 회수율은 약 95~102%였으며, 검출한계는 PAH에 따라 차이는 있으나 0.002~0.5 ng/g 수준이었다. 채소류 및 과일류 중 8가지 총 PAHs의 평균 함량은 0.19 ng/g이었으며 개별 평균 PAH 함량은 benzo(a)anthracene 불검출, chrysene 0.014 ng/g, benzo(b)fluoranthene 0.031 ng/g, benzo(k)fluoranthene 0.016 ng/g, benzo(a)pyrene 0.019 ng/g, dibenzo(a,h)anthracene 0.091 ng/g, benzo(g,h,i)perylene 0.016 ng/g, indeno(1,2,3-c,d)pyrene 불검출 수준이었다.
식용유지 중 benzo[a]pyrene 추출법으로 액체-액체 추출법, Soxhlet 추출법, 초음파 추출법 등이 사용되고 있으나 이런 방법들은 추출 시간이 길고 많은 양의 용매를 사용하는 단점이 있다. 따라서 본 연구에서는 간편하고 단시간에 분석이 가능한 QuEChERS법을 적용하여 현재의 복잡한 benzo[a]pyrene 분석법을 개선하고자 하였다. 본 연구에서 적용한 QuEChERS법은 식용유지를 n-hexane saturated acetonitrile과 n-hexane으로 녹인 후 magnesium sulfate, sodium chloride를 이용해 추출하는 방식이다. 이 시험법에 대한 유효성 검증 결과, 검출한계와 정량한계는 각각 0.02, 0.05 ㎍/kg 이며, 직선성은 0.1~10 ㎍/kg 농도 범위에서 검량선 결정계수 (R2)는 0.99 이상이었다. 회수율과 회수율에 대한 상대표준편차는 각각 74.5~79.3 %, 0.52~1.58 % 였으며, 정확성 및 정밀성은 각각 72.6~79.4 %, 0.14~7.20%로 나타났다. 위의 결과들은 식품의약품안전평가원의 「식품 등 시험법 마련 표준절차에 관한 가이드라인 (2016)」 및 「시험법 마련 표준절차 AOAC 가이드라인 (2023)」을 모두 만족하였다. 따라서 본 연구에서 제시된 분석법은 기존 분석법 대비 상대적으로 간편한 전처리 방법으로 분석 시간과 용매 사용량을 각각 92 %, 96 % 정도 절감할 수 있었다.
The role of phospholipids in the membrane binding and subsequent insertion of the microsomal protein rabbit cytochrome P450 (P450) lA2 into phospholipid bilayers was investigated. The insertion of P450 lA2 into phospholipid bilayers was determined by the amount of quenching of Trp fluorescence of P450 lA2 by pyrene and brominated and doxyl-labeled phospholipids.(omitted)
This study proposes a pH-dissolved-oxygen monitoring system using 8-HydroxyPyrene-1,3,6-trisulfonic acid Trisodium Salt (HPTS) and tris(4,7-diphenyl-1,10-phenanthroline)Ruthenium(II) chloride (Rudpp). Commercial water-quality sensors are electrochemical devices that require frequent calibration and cleaning, are subject to high maintenance costs, and have difficulties conducting measurements in real-time. The proposed pH-dissolved-oxygen monitoring system selects a thin-film sensing layer to measure the change in fluorescence intensity. This change in fluorescence intensity is based on reactions with hydrogen ions in an aqueous solution at a given pH and specific amount of dissolved oxygen. The change in fluorescence intensity is then measured using light-emitting diodes and photodiodes in response to HPTS and Rudpp. This method enables the development of a relatively small, inexpensive, and real-time measureable water-quality measurement system.
A typically designed 'Peptide Lego' has two distinct surfaces: a hydrophilic side that contains the complete charge distribution and a hydrophobic side. In this article, we describe the fabrication of a unique lego-type peptide with the AEAEYAKAK sequence. The novel peptide with double amphiphilic surfaces is different from typical peptides due to special arrangement of the residues. The results of CD, FT-IR, AFM and DLS demonstrate that the peptide with the random coil characteristic was able to form stable nanostructures that were mediated by non-covalent interactions in an aqueous solution. The data further indicated that despite its different structure, the peptide was able to undergo self-assembly similar to a typical peptide. In addition, the use of hydrophobic pyrene as a model allowed the peptide to provide a new type of potential nanomaterial for drug delivery. These efforts collectively open up a new direction in the fabrication of nanomaterials that are more perfect and versatile.
A purpose of this study was carried out to investigate the concentrations of four elements of PAHs(Polycyclic Aromatic Hydrocarbons) in suspended particulate matters of underground shopping stores in Seoul city. The particulate matters were collected at five underground shopping stores(Yongdungpo, Myongdong, Ulchiro, Express Terminal, Chamshil) in the Seoul area during February-October, 1992. Samples were collected using cascade impactor of low volumn air sampler and were analysed using High Performance Liquid Chromatography(HPLC) with fluorescence detector. Calibration on HPLC analyse is nearly accord with retention time between the standard solution and the samples. Analysed results obtained favorable analysing recovery rate of 97.3% and coefficient of variation of 1.60%. Mean concentrations of suspended particulate matters in five underground shopping stores wre 216.3 g/$m^3$ and observed higher at fine particles(117.2 g/$m^3$) which is respirable particulates than coarse particles(99.2 g/$m^3$). Concentrations of four species PAH were determined with anthracene of 16.8ng/$m^3$, fluoranthene of 72.3ng/$m^3$, benzo(a)pyrene of 0.54ng/$m^3$, and benzo(k)fluoranthene of 0.29ng/$m^3$, respectively. Fluoranthene levels were significantly higher than those levels in other components. PAHs concen-tration at shopping areas showed 21.3ng/$m^3$ in Yongdungpo, 35.1ng/$m^3$ in Myongdong, 23.4ng/$m^3$ in Ulchiro, 11.1ng/$m^3$ in Express Terminal, and 21.4ng/$m^3$ in Chamshil, respectively. Particularly, benzo(a)pyrene and benzo(k)-fluoranthene were detected over 83 percentage in fine particles, while fluoranthene wre highly detected in coarse particles. Also, higher concentrations of benzo(a)pyrene, benzo(k)fluoranthene were found in winter while levels of anthracene and fluoranthene were found higher in summer than other seasons.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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