Cobalt chloride ($CoCl_2$) treatment of cells in vitro has been shown to induce cellular changes that are similar to those seen following hypoxia. To identify genes that are differentially expressed in response to treatment with $CoCl_2$, we compared the mRNA expression profiles of PC-3 cells that were treated with $CoCl_2$ with those of untreated PC-3 cells, using specific arbitrary primers and two anchored oligo(dT) primers provided in the ACP-based GeneFishing kits. The results of this study demonstrated that the puromycin-sensitive aminopeptidase (PSA) gene was down regulated in PC-3 cells that were treated with $CoCl_2$. This downregulation of PSA expression, in turn, suppressed the proliferation, migration, and invasion of PC-3 cells, as well as the secretion and expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9).
The effects of Gamisoohwabunchungum and Gamisoohwabunchungum plus Cervi Pantotrichum Cornu on rats with nephrosis induced by a single tail-intravenous injection of PAN(puromycin amjnonucleoside), 2.5mg/100g of body weight was evaluated in the present study. The effects of Gamisoohwabunchungum and Gamisoohwabunchungum plus Cervi Pantotrichum Cornu on PAN nephrosis was evaluated by measuring the concentrations of albumin, total protein, total lipid, cholesterol, triglyceride in the serum and the amount of protein in the urin. The results are summarized as follows; 1 In The Gamisoohwabunchungum and Gamisoohwabunchungum plus Cervi Pantotrichum Cornu group as compared to The Control group, The concentrations of albumin and total protein in the serum were significantly increased. 2. In The Gamisoohwabunchungum and Gamisoohwabunchungum plus Cervi Pantotrichum Cornu group as compared to The Control group, The concentrations of total lipid, cholesterol and triglyceride in the serum were significantly decreased 3. In The Gamisoohwabunchungum and Gamisoohwabunchungum plus Cervi Pantotrichum Cornu group as compared to The Control group, The amount of urine protein during 24 hours were significantly decreased . 4. In The Gamisoohwabunchungum plus Cervi Pantotrichum Cornu group as compared to The Gamisoohwabunchungum group, The concentrations of total protein in the serum were significantly increased. 5. In The Gamisoohwabunchungum plus Cervi Pantotrichum Cornu group as compared to The Gamisoohwabunchungum group, The concentrations of cholesterol and triglyceride in the serum were significantly decreased To conclude, it can be inferred that Gamisoohwabunchungum and Gamisoohwabunchungum plus Cervi Pantotrichum Cornu have the effects of improving proteinuria, hypoproteinemia, hyperlipidemia in nephrotic syndrome.
Sodium retention is a hallmark of nephrotic syndrome. We investigated whether sodium retention is associated with changes of natriuretic peptide system at different stages (i.e., a sodium retaining stage and a compensatory stage) of nephrotic syndrome. At day 7 after PAN(puromycin aminonucleoside) injection, the urinary excretion of sodium was decreased, along with the development of ascites and positive sodium balance. The plasma and urinary ANP(atrial natriuretic peptide) immunoreactivities were increased. ANP mRNA expression was increased in the heart and kidney, whereas that of NPR(natriuretic peptide receptor)-A and NPR-C mRNA was decreased in the kidney. The expression of NEP was decreased in the kidney. At day 14, urinary excretion of sodium did not differ from the control. The plasma ANP level and heart ANP mRNA expression returned to their control values. The expression of ANP mRNA in the kidney was increased in association with increased urinary ANP immunoreactivities. The expression of NPR-A in the kidney became normal, whereas that of NPR-C kept decreased. The expression of NEP(neutral endopeptidase) remained decreased. These findings suggest that the increased renal ANP synthesis in association with decreased metabolism via NEP and NPR-C may play a compensatory role against the development of sodium retention in nephrotic syndrome. The decreased of NPR-A expression in the kidney may contribute to the ANP resistance at day 7. The subsequent recovery of NPR-A expression may play a role in promoting sodium excretion in later stage(at day 14).
In order to study the effects of $\alpha$-tocopherol acetate in glomerular injury, the minimal change nephrosis disease was induced by puromycin aminonucleoside (PAN) in spontaneously hypertensive rats, and we examined biochemical analysis in serum and morphological changes. The experimental animals were divided to control, PAN-treated (30 mg/kg, I.p.), vitamin E-treated (200 mg/kg, P.O.), and PAN+vitamin E-treated groups. After PAN injection, the rate of increase of body weight was lower than the other treatments. In addition, at 8 days after PAN injection, total protein content in serum was the lowest, whereas both blood urea nitrogen and serum creatinine contents were the highest in all experimental groups, which their changes of serum parameters were statistically significant. In morphological changes, the glomerular tissue at 8 days after PAN injection clearly showed obstruction of urinary space and proliferation of mesangial cells, and that loss and fusion of pedicles, vacuolization and edema of endothelial cells, and thickness of basal lamina were ultrastructurally showed in the glomerulus. Glomerular injury was significantly prevented by administration of vitamin E having an antioxidant effect. It suggested that the glomerular injury induced by PAN was accelerated by hypertension, and renal dysfunction might be induced by oxidative injury.
Purpose : To test whether the expression of ${\beta}$-catenin, a component of podocyte as a filtration molecule, would be altered by puromycin aminonucleoside (PAN) in the cultured podocyte in vitro. Methods : We cultured rat glomerular epithelial cells (GEpC) with various concentrations of PAN and examined the distribution of ${\beta}$-catenin by confocal microscope and measured the change of ${\beta}$-catenin expression by Western blotting and reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR). Results :We found that ${\beta}$-catenin relocalized from peripheral cytoplasm to inner cytoplasm, therefore, intercellular separations were seen in confluently cultured cells by high concentrations of PAN in immunofluorescence views. In Western blotting of GEpC, PAN ($50{\mu}g/mL$) decreased ${\beta}$-catenin expression by 34.9% at 24 hrs and 34.3% at 48 hrs, compared to those in without PAN condition (P<0.05). In RT-PCR, high concentrations ($50{\mu}g/mL$) of PAN also decreased ${\beta}$-catenin mRNA expression similar to protein suppression by 25.4% at 24 hrs and 51.8% at 48 hrs (P<0.05). Conclusion : Exposure of podocytes to PAN in vitro relocates ${\beta}$-catenin internally and reduces ${\beta}$-catenin mRNA and protein expression, which could explain the development of proteinuria in experimental PAN-induced nephropathy.
Seo Hyung Ho;Jung Tae Sung;Lee Eun Sil;Shin Son Moon;Park Yong Hoon;Kim Yong Jin
Childhood Kidney Diseases
/
v.3
no.1
/
pp.35-41
/
1999
Purpose The single administration of PAN(Puromycin-Aminonudeoside) to rats results in nephropathy that are similar to human minimal change nephrotic syndrome. Recently several studies indicate the pathophyslological importance of oxygen free radicals in rats with PAN-induced nephrosis. This study was conducted to evaluate the effect of $\alpha$-tocopherol, an oxygen free radical scavenger, on the histologic and biochemical changes of PAN-induced nephrosis in rats. Methods : Twenty-one Sprague-Dawley rats weighing 180-300 gm were divided into 3 groups. In group I (control group), the rats were given saline intraperitoneally for 12 days, in group II the rats were given PAN 7.5mg/100g of body weight intravenously one time and group III PAN intravenously, followed by $\alpha$-tocopherol 0.5 mg/100g of body weight jntramuscularly for 12 days. Twenty four hour urinary protein and creatinine excretion were measured on day 0, 5, 11 and 18. On the 18th day, rats were sacrificed for the determination of total serum protein, albumin and cholesterol levels. To estimate renal injuries by oxygen free radical, lipid peroxide concentration and reduced glutathione were measured in renal cortex. Histological examination in rat glomerular lesions were performed. Results : From the 5th days of PAN administration, urine protein/creatinine of group II and III were significantly increased compared the group I (P<0.05). But, urine protein/creatinine of group III was significantly lower than group II at 18th days (P<0.05). Total serum protein and albumin of group II were significantly lower than those of group III (P<0.05). Serum cholesterol of group II was significantly higher than that of group III (P<0.05). Lipid peroxide and reduced glutathione in renal cortex of group II were significantly higher than that of group I and III (P<0.05). Electron microscopic strudies of group II showed the loss of epithelial foot processes, but in group III showed preservation of epithelial foot processes. Conclusion : PAN-induced nephropathy was ameliorated significant recovery of foot process change and reduction of the urinary protein excretion by antioxidant, $\alpha$-tocopherol.
The effects of Geumguesingitang and Dohongsamultang on rats with nephrosis induced by a single tail-intravenous injection of puromycin aminonucleoside(PAN), 2.5mg/l00g of body weight were evaluated in the present study. The effects of Geumguesingitang and Dohongsamultang on PAN nephrosis were evaluated by measuring (1)the concentrations of albumin, total protein, total lipid, cholesterol, triglyceride, creatinine, blood urea nitrogen(BUN) and uric acid in the serum, (2)the concentrations of protein, creatinine, glucose, occult blood and volume of the 24 hours urine and (3)the volume of intake water. The results are summerized as follows; 1. In the Control group as compared to the Normal. the amount of protein of 24 hours urine was significantly increased, the concentrations of albumin and total protein were significantly decreased. Total lipid, cholesterol and triglyceride in the serum were significantly increased. The concentrations of creatinine, BUN, uric acid in the serum, the amount of glucose and occult blood of 24 hours urine were also increased significantly. 2. In the Geumguesingitang group as compared to the Control, the increase in the amount of urinary protein during 24 hours induced by PAN was significantly suppressed, and the concentrations of total protein and albumin in the serum were significantly increased. The concentrations of total lipid, cholesterol and triglyceride in the serum were significantly inhibited. The decrease of the concentrations of creatinine and uric acid in the serum were also observed significantly. 3. In the Dohongsamultang group as compared to the Control, the increase of the amount of protein and glucose of the 24 hours urine induced by PAN were significantly inhibited, and the concentrations of total protein and albumin in the serum were increased significantly. The concentrations of total lipid, cholesterol and triglyceride in the serum were decreased significantly. The decrease of the concentrations of creatinine and uric acid in the serum were observed significantly. It can be inferred that Geumguesingitang has effects on improving proteinuria, hypoproteinemia effectively. It has an effect on hyperlipidemia significantly relieved. And relieving azotemia when nephrotic syndrome is accompanied by the acute renal failure. It can be inferred that Dohongsamultang improves hyperlipidemia effectively. It has effects on proteinuria, hypoproteinemia in nephrotic syndrome significantly relieved. And relieving azotemia when nephrotic syndrome is accompanied by the acute renal failure.
The heat shock response is a universal stress response observed in all organisms and cultured cells. The response is regulated at both the transcriptional and translational level. Heat shocked Drosophila melanogaster Kc cells are used as the system for the study of translational regulation. In this system non-heat shock messages are associated with polysome but are not translated in a heat shocked condition. To figure out the change in the translation machinery. the effects of translation elongation inhibitors were tested on Kc cells. The result showed that the sensitivity of translation to these drugs changed in heat shocked cells. The significant changes were the decreased inhibition of heat shock protein synthesis by cycloheximide, emetine. and puromycin. and the increased inhibition of heat shock protein synthesis by verrucarin A. implying that the translation elongation mechanism in heat shocked cells changed.
As a result of genome projects, the research to elucidate the function of a protein of interest has recently been well-recognized. In order to facilitate functional genomics, a useful mammalian gene expression vector is required. Using an infectious CDNA clone of BVDV pNADLclns-, we have developed a mammalian gene expression vector. In this study, a replication-competent full-length infectious CDNA clone containing puremycin acetyltransferase (pac) gene (pNADLclns-/pac) was successfully generated. The viral RNA replication and viral protein NS3 synthesis were examined by detecting metabollically $^{32}P$-labelled genomic viral RNA and immunoblotting with a mouse anti-NS3 antibody. To generate viral replicon as an expression vector, we examine if the viral structural genes (C, E0, El, E2) are required for viral replication by deletion analysis. As a result, all of the structural proteins are dispensable for viral replication per se, but essential for infectious viral particle formation. Based on our deletion analysis, we have generated a replication-competent BVDV viral replicon (pNADLclns-/pac/${\Delta}S$), whose structural genes are all deleted. In addition to NADLclns- /pac/${\Delta}S$, NADLclns-/ luc/${\Delta}S$ viral replicon containing luciferase gene as a reporter was constructed and fecund to be replication-compotent in HeLa and BHK cells as well as MDBK cells. Therefore, BVDV viral replicon developed in our study will be a useful tool to express a protein of interest in various mammalian cells.
Human Erythropoietin (EPO) gene is cloned in quail fibrosarcoma cell, QT35. Because molecular weight of EPO is similar to that of serum albumin, cell culture with serum containing medium makes purification of EPO very difficult. Using fractional factorial study, we have developed serum free medium for the recombinant QT35 cell lines, QT N4D4 and QT SY-IMP, which have cloned EPO with glutamine synthetase (GS) gene amplification system and with puromycin selective marker, respectively. Among the seven frequently used medium components, fibronectin, BSA, and EGF were the most important for EPO production. However, sufficient fibronectin supplement to the medium did not make any good attachment of QT35 to culture plate over 3 days. Therefore, to maximize EPO production, we attempted a medium-shift at confluence from serum containing medium to serum free medium(QT SFM6). Using the medium-shift protocol with QT SFM6, nearly the same productivity of EPO was achieved comparing with that without medium-shift. This result was true in both QT35 cell lines in three types of culture, i.e. T flask, microcarrier and roller bottle cultures.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.