Pseudomonas syringae pv. tabaci produces tabtoxin and causes wildfire disease on tabacco and bean plants. In this study, bacteriophage of P. syringae pv. tabaci were isolated from sewage by top agar overlay method, and physiological and genetical characteristics of the phage were investigated. Plaques of isolated phage were turbid and ranged in size from 1 to 2 mm. The stability range of pH was between 6.0 and 9.0, and stability of temperature was up to 30${\circ}C$ and inactivated at 70${\circ}C$. The adsorption rate of phage was about 85% for 30min. The latent period and mean burst size as dertermined in one step growth experiments were 3 hrs and 200 PFU/bacterium, respectively. Genomic material of isolated phage was dsDNA of which size was about 30kb.
Pseudomonas syringae pv. tabaci(Pa45) Tox$^{-}$ cells were infected with phage Ps90 strain isolated form the natural source, and the Ps90 lysogenized bacterial cells were then obtained. The lyxohenized cells produced tabtoxin and the phage induction occured when the cells treated with mitomycin C. The Southren hybridization alnalysis of the four EcoRI-treated plasmid fragments and the EcoRI-digested genomic DNA of Tox$^{+}$ and Tox$^{-}$ strains using phage DNA as a probe showed that only those DNA fragment of Tox$^{+}$ strain were related to the Ps90 phage DNA. Based on these results, the tabtoxin producing DNA fragments of the bacteris are presumed to have originated from the same phage DNA, and to be responsible for the pathogenecity of the bactrial strains.
The hrp gene cluster in the plant pathogen Pseudomonas syringae is a key determinant of pathogenicity. Recent studies have demonstrated that specific host cell induction of the Ralstonia solanacearum hrp gene cluster is controlled by the PrhA (plant regulator of hrp) receptor. To characterize the role that P. syringae PrhA plays in the virulence of plant cells, a prhA homolog was isolated from P. syringae pv. tabaci and a $\Delta$prhA mutant was constructed by allelic exchange. The $\Delta$prhA mutant had reduced virulence in the host plant, and co-culture of P. syringae pv. tabaci and plant cell suspensions induced a much higher level of hrpA gene transcription than culture in hrp-inducing minimal medium. These results indicate that PrhA of P. syringae is a putative pathogen-plant cell contact sensor, therefore, we used a hrpA-gfp reporter fusion to monitor the in situ expression of PrhA. The results of this study demonstrated that PrhA induces hrp gene expression in P. syringae pv. tabaci in the presence of plant cells.
Tabtoxin produced in Pseudomonas syringae pv. tabace irreversibly inhibits its known physiological target, glutamine synthetase so that causes wildfire disease on leaves of host plant. In this study, we examined a rapid and sensitive microbiological method for tabtoxin assay in several media. In minimal A agar medium nd minimal glucose agar medium, growth inhibition zone of Agrobacterium tumefaciens was larger than that of other indicator strain. However, mostly, growth inhibition zone of indicator strains on the minimal glucose agar medium was smaller than that of on the miniaml A agar medium. In complex agar medium, growth inhibithiton zone was not observed in all the tested indicator strains. Pseudomonas syringae pv. tabaci produced more tabtoxin according to the incubation time. When glutamine was added to the minimal glucose agar medium, growth inhkbition zone of Agrobacterium tumefaciens was reduced.
Choi, Yeon Hee;Lee, Jun Seung;Yun, Sora;Baik, Hyung Suk
Journal of Life Science
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v.25
no.2
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pp.136-150
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2015
Pseudomonas syringae pathovar tabaci is a plant pathogenic bacterium that causes wildfire disease in tobacco plants. In P. syringae pv. tabaci, PsyI, a LuxI-type protein, acts as an AHL synthase, while primary and secondary sequence analysis of PsyR has revealed that it is a homolog of the LuxR-type transcriptional regulator that responds to AHL molecules. In this study, using phenotypic and genetic analyses in P. syringae pv. tabaci, we show the effect of PsyR protein as a quorum-sensing (QS) transcriptional regulator. Regulatory effects of PsyR on swarming motility and production of siderophores, tabtoxin, and N-acyl homoserine lactones were examined via phenotypic assays, and confirmed by quantitative real-time reverse transcription-polymerase chain reaction (qRT-PCR). Further qRT-PCR showed that PsyR regulates expression of these virulence genes in response to environmental signals. However, an upstream region of the gene was not bound with purified MBP-PsyR protein; rather, PsyR was only able to shift the upstream region of psyI. These results suggested that PsyR may be indirectly controlled via intermediate-regulatory systems and that auto-regulation by PsyR does not occur.
Park, Myung-Ryeol;Kim, Young-Cheol;Park, Ju-Yeon;Han, Song-Hee;Kim, Kil-Yong;Lee, Sun-Woo;Kim, In-Seon
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.18
no.10
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pp.1659-1662
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2008
Pseudomonas chlororaphis O6 exhibits induced systemic resistance (ISR) against P. syringae pv. tabaci in tobacco. To identify one of the ISR metabolites, O6 cultures were extracted with organic solvents, and the organic extracts were subjected to column chromatography followed by spectroscopy analyses. The ISR bioassay-guided fractionation was carried out for isolation of the metabolite. High-resolution mass spectrometric analysis of the metabolite found $C_{9}H_{9}O_{3}N$ with an exact mass of 179.0582. LC/MS analysis in positive mode showed an $(M+H)^{+}$ peak at m/z 180. Nuclear magnetic resonance ($^{1}H,\;^{13}C$) analyses identified all protons and carbons of the metabolite. Based on the spectroscopy data, the metabolite was identified as 4-(aminocarbonyl) phenylacetate (4-ACPA). 4-ACPA applied at 68.0 mM exhibited ISR activity at a level similar to 1.0 mM salicylic acid. This is the first report to identify an ISR metabolite produced by P. chlororaphis O6 against the wildfire pathogen P. syringae pv. tabaci in tobacco.
Plant matrix metalloproteases (MMPs) are a family of apoplastic metalloproteases closely related to human matrilysins. Up-regulation of Nicotiana benthamiana matrix metalloprotease 1 (NMMP1) expression by treatment with pathogens, ethephon and aging indicates that the gene is related to plant defense and the aging process through ethylene signaling. NMMP1 expression was higher than in normal growth leaves following infection with an incompatible pathogen Pseudomonas syringae pv. tomato T1 or a compatible pathogen P. syringae pv. tabaci and in aged leaves. Transient overexpression of NMMP1 in N. benthamiana leaves lowered the growth of P. syringae pv. tabaci. However, NMMP1-silenced leaves showed increased growth of P. syringae pv. tabaci. These data strongly suggest that NMMP1 in N. benthamiana is a defense related gene, which is positively regulated by ethylene.
Eighty-five percent methanol extract of Agrimonia pilosa has antibacterial activity against Pseudomonas syringae pv. lacrymans (bacterial leaf spot pathogen), Ralstonia solanacearum (tomato bacterial wilt pathogen) and Pseudomonas syringae pv. tabaci (Tobacco wild fire pathogen.). The active substance was purified by silica gel column chromatography and HPLC. The molecular weight of the active compound was determined by LC-Mass as 687.2. With NMR analysis, the active substance was identified as Agrimol B.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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