• 제목/요약/키워드: Protoporphyrinogen

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Purification and Characterization of Bacillus subtilis Protoporphyrinogen Oxidase and Pre-equilibrium Behavior During Oxidation of Protoporphyrinogen IX

  • Jeong, Eun-Ju;Han, Ok-Soo
    • BMB Reports
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    • 제34권1호
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    • pp.39-42
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    • 2001
  • Previous studies indicate that B. subtilis protoporphyrinogen oxidase is poorly inhibited by diphenyl ether herbicides. To better understand the basis of this insensitivity, the enzyme was overexpressed as a soluble protein in E. coli, purified and characterized. The mechanism of oxidation of B. subtilis protoporphyrinogen IX was studied and the enzyme kinetic parameters were determined for protoporpyrinogen IX; $K_m$, and $k_{cat}$ were $6.3\;{\mu}M$ and $0.028\;h-^1$, respectively. The enzyme required flavin adenine dinucleotide as a cofactor and its activity was enhanced by 1 mM n-octylglucopyranoside. The nonenzymatic oxidation rate was dependent on the concentration of protoporphyrinogen IX, suggesting that the reaction involves a pre-equilibrium step followed by a rate-limiting step.

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Bacillus subtilis Protoporphyrinogen Oxidase 유전자 형질전환 담배의 Oxyfluorfen 처리에 대한 생리 · 생장반응 (Physiology and Growth of Transgenic Tobacco Plants Containing Bacillus subtilis Protoporphyrinogen Oxidase Gene in Response to Oxyfluorfen Treatment)

  • 이희재;국용인;정정성;이성범;최규환;한옥수;구자옥
    • 한국잡초학회지
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    • 제18권3호
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    • pp.237-245
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    • 1998
  • Bacillus subtilis protoporphyrinogen oxidase 유전자를 Agrobacterium을 매개체로 이용하여 전이 시킨 후 cauliflower mosaic virus 35S promoter하에서 발현케 한 형질전환 담배를 유기하였다. 이러한 형질전환 담배의 diphenyl ether계 제초제 oxfluorfen에 대한 생리적 반응과 여러 환경 조건에서의 생장 반응을 재배종 담배와 비교하였다. Oxyfluorfen의 처리에 의해 나타나는 세포내 구성물질의 누출과 지질과산화작용은 재배종 담배에서보다 형질전환 담배에서 더 작게 이루어졌다. 형질전환 담배의 생장을 여러 온도, 광도 및 수분 조건에서 조사한 결과, 저광도와 포화수분 조건에서의 생장이 재배종 담배에 비해 다소 저하되는 현상이 나타났을 뿐 기타 조건에서의 생장은 재배종 담배의 생장과 거의 동일하였다. 따라서 B. subtilis protoporphyrinogen oxidase 유전자를 전이시켜 cauliflower mosaic virus 35S promoter하에서 발현케 한 형질전환 담배는 oxyfluorfen에 대해 비교적 높은 저항성을 나타내지만 형질전환에 따른 생장 변화는 크게 일어나지 않음을 알 수 있었다. 한편 이러한 형질전환 담배의 oxyfluorfen에 대한 저항성 기작에 대해서도 논의하였다.

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형질전환 벼에서 Protoporphyrinogen Oxidase의 발현 위치가 제초제 저항성에 미치는 영향 (Expression Site of Protoporphyrinogen Oxidase Influences on Herbicide Resistance in Transgenic Rice)

  • 정선요
    • 한국잡초학회지
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    • 제30권3호
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    • pp.225-232
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    • 2010
  • 과산화계 제초제 oxyfluorfen이 처리된 비형질전환 벼와 형질전환 벼에서 Protox 발현 위치가 제초제 저항성에 미치는 영향을 비교하였다. Arabidopsis protoporphyrinogen oxidase(Protox; AP 계통)를 색소체에만 발현하는 형질전환 벼와 Myxococcus xanthus Protox 유전자를 색소체와 미토콘드리아에 모두 발현하는 형질전환 벼(TTS 계통)가 형질전환 시스템으로 사용되었다. Oxyfluorfen이 처리된 TTS4 계통은 AP 계통이나 비형질전환 벼에 비해 낮은 수준의 세포질 누출 및 malonyldialdehyde를 보여주었고, 높은 5-aminolevulinic acid 합성 능력을 유지하였다. Oxyfluorfen 작용 동안, TTS4 계통은 AP1 계통보다 높은 제초제 저항성을 보여주었는데, 이는 색소체만에서의 Arabidopsis Protox의 발현에 비해 색소체와 미토콘드리아에서의 M. xanthus Protox의 쌍발현이 광역학적인 protoporphyrin IX의 축적을 더 효율적으로 억제하였기 때문일 것이다. 이 결과들은 미토콘드리아 내 Protox의 발현이 Protox 저해형 제초제에 대한 식물의 저항성에 크게 기여함을 의미한다.

Oxyfluorfen에 대한 내성(耐性) 및 감수성(感受性) 벼품종(品種)의 생리활성(生理活性) 기구 (機構) - III. Protoporphyrinogen oxidase(Protox)활성(活性)과 Protoporphyrinogen IX(PPIX) 축적(蓄積) (Different Physiological Activity of Selected Rice Cultivars to Diphenylether Herbicide, Oxyfluorfen - III. Differential Protoporphyrinogen Oxidase(Protox) Activity and Protoporphyrinogen IX(PPIX) Accumulation)

  • 국용인;구자옥;전재철
    • 한국잡초학회지
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    • 제16권2호
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    • pp.150-159
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    • 1996
  • Oxyfluorfen 내성(耐性) 및 감수성(感受性) 벼품종(品種)과 감수성 피를 공시하여 oxyfluorfen 처리에 의한 protox 활성저해(活性沮害), PPIX 축적량(蓄積量)과 tetrapyrro1e 생합성(生合性) 억제제(抑制齊) 처리에 의한 oxyfluorfen의 제초활성(除草活性) 억제효과를 조사하였다. 1. Oxyfluorfen 처리에 따른 protox 활성저해(活性沮害)는 내성(耐性) 벼품종(品種)들보다 감수성(感受性) 벼품종(品種)들과 피에서 컸다. 특히,$10^{-6}$ 처리 이상의 농도에서 감수성(感受性) 벼품종(品種)들과 피에서는 완전히 억제되었으나, 내성(耐性) 품종(品種)들에서는 무처리에 대비하여 32~59%의 활성(活性)을 유지하였다. 2. 처리농도가 증가할수록 PPIX의 축적량(蓄積量)은 증가하였고, 광노출 4시간까지는 증가하나 그 이후에는 감소하는 경향이었다. 3. Oxyfluorfen 처리에 의한 PPIX 축적량(蓄積量)은 암조건(暗條件)에서보다 광조건(光條件)에서 많았다. 광 암조건(光 暗條件)에서 감수성(感受性) 벼품종(品種)들과 피는 내성(耐性) 벼품종(品種)들에 비하여 PPIX 축적량(蓄積量)이 많았다. 특히, 감수성(感受性)인 피는 PPIX 축적량(蓄積量)이 벼품종(品種)에 비해 많았다. 4. Tetrapyrrole 생합성(生合性) 억제제(抑制齊)인 GC와 DA를 처리하면 oxyfluorfen에 의한 제초활성(除草活性)은 억제되었으며, 내성(耐性) 벼품종(品種)보다는 감수성(感受性) 벼품종(品種)이나 피에서 그 효과가 떨어지는 경향으로서 엽록소 함량이나 PPIX 축적량(蓄積量)에서도 동일한 경향을 나타내었다.

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아미드 치환체를 갖는 히단토인계 화합물의 합성과 제초활성 연구 (Synthesis and Herbicidal Activities of Hydantoin Derivatives Possessing Amide Subgroup)

  • 고영관;정근회;류재욱;우재춘;구동완;최정섭;김준영;김태준;권오연;정봉진;김대황
    • 농약과학회지
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    • 제10권2호
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    • pp.153-156
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    • 2006
  • 환경친화형 신규 제초제 개발 연구의 일환으로 아미드 치환체를 갗는 히단토인계 Protoporphyrinogen IX oxidase 저해 화합물 5a - 5i들을 합성하였으며, 온실에서 밭조건 경엽처리 제초활성 시험을 실시하였다. 합성된 화합물 중에서 벤질 아미드 치환체를 갖는 화합물들의 제초활성이 우수하였으며 화합물 5h는 대조화합물인 fluthiacet-methyl과의 비교시험 결과 밭조건에서 문제잡초인 바랭이와 자귀풀에 대한 활성이 보다 우수하였다.

하이드록시알킬 치환체를 갖는 테트라하이드로인다졸계 화합물의 합성과 제초활성 연구 (Synthesis and Herbicidal Activities of Tetrahydroindazole Derivatives Possessing Hydroxyalkyl Subgroup)

  • 고영관;정근회;류재욱;우재춘;구동완;최정섭;김준영;김수호;김태준;최인영;석미영;최준혁;정봉진
    • 농약과학회지
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    • 제12권2호
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    • pp.201-205
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    • 2008
  • 환경친화형 신규 고활성 토양처리 제초제 개발 연구의 일환으로 하이드록시 알킬 치환체를 갖는 테트라하이드로인 다졸계 protoporphyrinogen IX oxidase 저해 화합물 $6a{\sim}6h$들을 합성하였으며, 온실에서 밭조건 토양처리 제초활성 시험을 실시하였다. 합성된 화합물중에서 트리메틸 하이드록시 알킬 치환체를 갖는 화합물 6f의 제초활성이 우수하였으며, 다양한 작물 선택성을 갖고 있었다.

Growth and Yield Response of Transgenic Rice Plants Expressing Protoporphyrinogen Oxidase Gene from Bacillus subtilis

  • Kuk, Yong-In;Chung, Jung-Sung;Sunyo Jung;Kyoungwhan Back;Kim, Han-Yong;Guh, Ja-Ock
    • 한국작물학회지
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    • 제48권4호
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    • pp.326-333
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    • 2003
  • Transgenic rice plants expressing a Bacillus subtilis protoporphyrinogen oxidase (Protox), the last shared enzyme of the porphyrin pathway in the expressed cytoplasm or the plastids, were compared with non-trangenic rice plants in their growth characteristics such as tiller number, plant height, biomass, and yield. Transgenic rice plants of $\textrm{T}_3$ generation had 8 to 15 % and 25 to 43% increases in tiller number compared to non-transgenic rice plants at 4 and 8 weeks after transplanting(WAT); similar values were observed for $\textrm{T}_4$ generation at 4 and 8 WAT. However, the plant height in both $\textrm{T}_3$ and $\textrm{T}_4$ generations was similar between transgenic rice plants and non-transgenic rice plants at 4 and 8 WAT. Transgenic rice plants had 13 to 32% increase in above-ground biomass and 9 to 28% increase in grain yield compared to non-transgenic rice plants, demonstrating that biomass and yield correlate with each other. The increased grain yield of the transgenic rice plants was closely associated with the increased panicle number per plant. The percent of filled grain, thousand grains and spikelet number per panicle were similar between transgenic and non-transgenic rice plants. Generally, the growth and yield of transgenic generations ($\textrm{T}_2$, $\textrm{T}_3$, and $\textrm{T}_4$) and gene expressing sites (cytoplasm-expressed and plastid-targeted transgenic rice plants) were similar, although they slightly varied with generations as well as with gene expressing sites. The transgenic rice plants had promotive effects, indicating that regulation of the porphyrin pathway by expression of B. subtilis Protox in rice influences plant growth and yield.