Bacillus licheniformis fermenting soybean product with highest score in consumer acceptance had been isolated from homemade Cheongkookjang. In order to develop the medium composition, effects of ingredients including nitrogen sources, carbon sources, metal ions and phosphate were examined for protease production of the isolate. Potato starch increased the protease productivity, while glucose repressed it. Yeast extract was the most effective nitrogen source for enzyme production. The calcium was found to increase protease activity slightly while cell growth and enzyme production was completely inhibited by divalent ions such as $Zn^{2+}$, $Cu^{2+}$ and $Co^{2+}$. The maximum protease productivity was reached approximately 800 unit/mL in the optimized medium consisting of potato starch (1.5%), yeast extract (1.5%), $CaCl_2$(0.7%), $K_2HPO_4$(0.03%) and $KH_2PO_4$(0.03%). The protease activity of culture filtrate was gradually decreased after incubation for 28 h.
A marine bacterium for producing an collagenolytic protease was isolated from the southern sea of Korea and identified as Vibrio vulnificus and named as Vibrio vulnificus CYK279H. This strain producing an collagenolytic protease was showed high activity toward collagen and gelatin as substrate. The optimum initial pH, NaCl, and temperature for cell growth and protease production was 7.5, 2.0% and 25$^{\circ}C$, respectively. Optimization for collagenolytic protease production was composed of 0.3% D-galactose, 0.6% yeast extract, 4.0% gelatin, 0.2% (NH$_4$)$_2$SO$_4$, and 0.2 mM ferric citrate in artificial sea water. The maximum protease production was required gelatin and yeast extract. The collagenolytic protease production by Vibrio vulnificus CYK279H reached a maximum of 73 unit/l after the cultivation for 18 h under the optimized medium.
The effects of inorganic salts and feather concentrations on pretense production by Bacillus megaterium F7-1 were investigated. Pretense production was dependent on the presence of phosphates in the medium. Supplementation of medium with calcium ion slightly increased protease production. The highest protease production was obtained at $1.4\%$ feather. The optimal medium contained $2.0\%$ glucose, $0.8\%$ skim milk, $0.06\%\;K_{2}HPO_{4}\%,\;0.04\%\;KH_{2}PO{4},\;0.06\%\;NaCl,\;0.03\%\;MgCl_{2}\cdot6H_{2}O,\;0.002\%\;CaCl_{2}\cdot2H_{2}O,\;and\;1.4\%$ whole feather. By using this optimized medium, increased production of the protease was achieved compared with the cases of using basal medium.
Kim, Hyun-do;Yun, Chul-Won;Choi, Jong-il;Han, Se Jong
Korean Chemical Engineering Research
/
v.53
no.4
/
pp.524-529
/
2015
This study was conducted to optimize the medium composition for cold-adaptive protease production of Enterobacteriaceae sp. by response surface methodology (RSM). Yeast extract, and TritonX-100 were identified as the significant factors affecting protease from one-factor-at-a-time method. RSM studies for optimizing protease production of Enterobacteriaceae sp. have been carried out for three parameters including yeast extract concentration, TritonX-100 concentration, and culture pH. These significant factors were optimized as 6.690 g/L yeast extract, 0.018 g/L Triton$^{TM}$ X-10, and pH 6.677. The experimentally obtained protease activity was 8.03 U /L, and it became 1.5-fold increase before optimization.
For production of thermophilic and alkaline protease, Bacillus sp. strain AP-5 was isolated from a compost. The production of the protease was reached at maximum for 4 days at $55^{\circ}$ in standing culture. Chitin and Cellulose as carbon source, and Skim Milk as nitrogen source were favorable for the production of the enzyme. Optimal temperature and optimal pH of the enzyme was $55^{\circ}$ and 11, respectively. Metal ion didn't effect on the enzyme activity, the protease was very stable at heat treatment of 30 min at $55^{\circ}$.
A Nuluk, a Korean traditional koji for brewing, was made with wheat flour and Rhizopus japonicus T2 which had a good aroma and strong abilities in producing saccharogenic and proteolytic enzymes, and cultural conditions for the production of those two enzymes were tested. The productivity of saccharogenic enzyme was markedly improved when Nuluk was made with unsteamed wheat flour as compared with that with steamed one, but that of acid protease was reduced. The addition of water containing 0.5% hydrochloric acid was unfavorable for the production of saccharogenic enzyme and neutral protease. The optimum ratio of water added to wheat flour for the production of saccharogenic enzyme and proteolytic enzyme was 28% on the basis of wheat flour. The productivity of saccharogenic enzyme was enhanced "when the Nuluk was molded after 10~20 hours precultivation but that of proteolytic enzyme was reduced as compared with no molding. The optimum temperature for the production of saccharogenic enzyme was 28f and that of proteolyic enzyme was also 28$^{\circ}C$. The optimum cultural time for the production of saccharogenic enzyme was 36 ~72 hours at 3$0^{\circ}C$ and that of proteolytic enzyme was 36 hours.ours.
Protease production and its characteristics were investigated with Mucor racemosus f. racemosus PDA 103 which was isolated from Korean traditional meju. Optimum culture conditions of the strain for the production of the protease in basic medium[bean(Baektae):H2O=1:1(w/v)] were as follows: pH 6, 3$0^{\circ}C$ and 72hrs. Optimum pH and temperature for the enzyme activity of the protease produced by Mucor racemosus f. racemosus were pH 5 and 5$0^{\circ}C$, respectively. The enzyme was relatively stable a pH2.0~5.0 and at temperature below 4$0^{\circ}C$. Phenylmethane-sulfonyl fluoride and Ag+ inhibited the enzyme activity. This indicates that the enzyme is serine protease. Km value was 0.9$\times$10-4M and Vmax value was 5.93$\mu\textrm{g}$/min. This enzyme hydrolyzed casein more rapidly than bovine albumin.
Alkalophilic bacteria isolated from compost were selected, identified and tested for production of alkaline protease. The bacterium was tentatively assigned to Bacillus sp. based on the morphological, cultural and biochemical characteristics. The optimum pH of growth was 10 Galactose and Sodium glutamate enhanced the production of alkaline protease. The protease was most active at pH 11.0 and $60^{\circ}C$ and stable in the range of pH 5-11 and temp. $30^{\circ}-55^{\circ}C$. The protease was stabilized by the presence of calcium salts.
Analysis of Production of Thermostable Alkaline Protease using Thermoactinomyces sp. E79. Jung, Sang Won, Sung-Sik Park, Yong-Cheol Park" Tae Kwang Oh2, and Jin-Ho Seo*, Department of Food Science and Technology, Seoul National University, Suwon 441-744, Korea, 1lnterdisciplinary program [or Biochemical Engineering & Biotechnology, Seoul National Univer5it}~ Seoul 151 "7421 Koreal 2Microbial Enzyme RU, Korea Research Institute of Bioscience & Biotechnology, Po. Box 1151 Yusong, Taejon 305"6001 Korea - This research was undertaken to analyze fermentation properties of Thermoactinomyces sp. E79 for production of a thermostable alkaline protease, which is able to specifically hydrolyze defatted soybean meal (DSM) to amino acids. TIle optimum pH for cell growth and protease production was pH 6.7, Thermoactinomyces sp. E79 did not grow at pHlO Among carbon sources tested, soluble starch was the best for protease production, while glucose repressed protease production. Tryptone was found to be the best nitrogen source for cell growth and soytone was good tor protease production. Oxygen transfer rate played an important role in producing thermostable alkaline protease. Ma'<..imum values of 6.58 glL of dry cell weight and 43.0 UJmL of protease activity were obtained in a batch fermentation using a 2.5 L jar fermentor at 1.93 X 102 hr-l of volumetric oxygen transfer coeff'jcient (kLa). Addition of 200 mgIL humic acid to the growth medium resulted in 1.64 times higher protease activity and 1.77 times higher cell growth than the case without humic acid addition.
The purpose of this research was to investigate the production and characterization of alkaline protease from Micrococcus sp. PS-1 newly isolated from seawater. Micrococcus sp. PS-1 was grown in Luria-Bertani (LB) medium. Its optimal temperature and pH for growth were $30^{\circ}C$ and 7.0, respectively. The effect of nitrogen sources was investigated on optimal enzyme production. A high level of alkaline protease production occurred in LB broth containing 2% skimmed milk. The protease was purified in a 3-step procedure involving ultrafiltration, acetone precipitation, and dialysis. The procedure yielded a 16.43-purification fold, with a yield of 54.25%. SDS-PAGE showed that the enzyme had molecular weights of 35.0 and 37.5 kDa. Its maximum protease activity was exhibited at pH 9.0 and $37^{\circ}C$, and its activity was stable at pH 8.0-11.0 and $25-37^{\circ}C$. The protease activity was strongly inhibited by PMSF, EDTA, and EGTA. Taken together, the results demonstrate that the protease enzyme from Micrococcus sp. PS-1 probably belongs to a subclass of alkaline metallo-serine proteases.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.