Recently there is much interest in the antibacterial activity of nano-sized silver particle (nanosilver) since silver is known to be safe and effective as disinfectant for a long time. Oral malodor is considered to originate in the oral cavity primarily as a result of production of malodorous compounds by oral bacteria. Major compounds responsible for oral malodor are volatile sulfur compounds, which is thought to be generated by the G(-) anaerobic bacteria found normally in the oral cavity, especially on the dorsum of the tongue. The purposes of this study were to investigate the effect of nanosilver on growth of oral malodor generating microorganisms, including Fusobacterium nucleatum, Prevotella melaninogenica, Klebsiella pneumonia, and to determine the optimal culture condition of them. The results were as follows: 1. The optimal culture condition for P. melaninogenica was vacuum culture using desiccator after evacuation of air by vacuum pump in chopped beef meat media. 2. The growth of K. pneumonia was temporarily inhibited by nanosilver (5 ppm and 10 ppm). 3. The morphological alteration and cell damage caused by nanosilver were observed in K. pneumonia.
Objectives: We investigated differences between the tracheostomized and the non-tracheostomized stroke patients through microbiological analysis for the purpose of preliminary explorations of full-scale clinical research in the future. Methods: We collected tracheal aspirates samples from 5 stroke patients with tracheostomy and expectorated sputum samples from 5 stroke patients without tracheostomy. Genomic DNA from sputum samples was isolated using QIAamp DNA mini kit. The sequences were processed using Quantitative Insights into Microbial Ecology 1.9.0. Alpha-diversity was calculated using the Chao1 estimator. Beta-diversity was analyzed by UniFrac-based principal coordinates analysis (PCoA). To confirm taxa with different abundance among the groups, linear discriminant analysis effect size analysis was performed. Results: Although alpha-diversity value of the tracheostomized group was higher than that of the non-tracheostomized group, there was no statistically significant difference. In PCoA, clear separation was seen between clusters of the tracheostomized group and that of the non-tracheostomized group. In both groups, Bacteroidetes, Proteobacteria, Fusobacteria, Firmicutes, Actinobacteria were identified as dominant in phylum level. In particular, relative richness of Proteobacteria was found to be 31% more in the tracheotomized group (36.6%) than the non-tracheostomized group (5.6%)(P<0.05). In genus level, Neisseria (24%), Prevotella (17%), Streptococcus (13%), Fusobacteria (11%), Porphyromonas (7%) were identified as dominant in the tracheostomized group. In the non-tracheostomized group, Prevotella (38%), Veillonella (20%), Neisseria (9%) were genera that found to be dominant. Conclusions: It is meaningful in that the tracheostomized group has been identified a higher rate of microbiotas known as pathogenic in respiratory diseases compared to the non-tracheostomized group, confirming the possibility that the risk of opportunity infection may be higher.
Objectives: We aimed to compare the quality of sleep, tongue diagnosis, oral microbiology differences in insomnia of Liver qi stagnation (LQS) and Non-Liver qi stagnation (NLQS). Methods: 56 patients were classified as LQS or NLSQ type insomnia through the insomnia differentiation questionnaire. The depression scores between the groups were compared through beck depression inventory (BDI), and the sleep quality was compared through Pittsburgh sleep quality index (PSQI) and Insomnia Severity Index (ISI). We analyzed the sleep efficiency, total sleep time, total awake frequency, total and average awake time through actigraph. For the tongue diagnosis, the distribution of tongue coating in six areas were measured through Winkel tongue coating index (WTCI). Linear discriminant analysis was performed to observe the differences in composition of microbial strains between the groups. Results: The scores of BDI, ISI and PSQI were significantly higher in LQS group. The total sleep time in LQS group was significantly less than that of NLQS group. Among the areas of tongue, according to the WTCI, the amount of tongue coating in zones A and C was significantly small. In oral microbial analysis, there was no significant difference between the groups at the phylum level. At the genus level, Prevotella, Veillonella, and Streptococcus were predominant in LQS group, whereas Prevotella, Neisseria, and Streptococcus in NLQS group. Conclusions: It was meaningful that insomnia was more likely in LQS group than in NLQS group, and the composition of oral microorganisms was significantly different, which could lead to the diseases caused by stress.
Objective: Temperature could influence protein and amino acid deposition as well as gut microbiota profile and composition. However, the specific effects of ambient temperature on amino acids deposition and gut microbiota composition remain insufficiently understood. Methods: A total of 300 one-day-old Avian broilers were randomly divided into three groups and reared at high, medium, and low temperature (HT, MT, and LT), respectively. Breast muscle and fecal samples were collected for amino acid composition analysis and 16S rRNA gene sequence analysis. Results: Our data showed that compared to the MT group, there was a decrease of muscle leucine and tyrosine (p<0.05), as well as an increase of methionine in the HT group (p<0.05) and a decrease of serine in the LT group. Examination of microbiota shift revealed that at genus level, the relative abundance of Turicibacter and Parabacteroides was increased in the HT group (p<0.05) and that the relative abundances of Pandoraea, Achromobacter, Prevotella, Brevundimonas, and Stenotrophomonas in the LT group were higher than those in the MT group (p<0.05). In addition, there were substantial correlations between microbes and amino acids. In the HT group. Turicibacter was negatively correlated with aspartic acid and tyrosine, whereas Parabacteroides was positively correlated with methionine (p<0.05). In the LT group, there were multiple positive correlations between Achromobacter and arginine, isoleucine or tyrosine; between Prevotella and cysteine or phenylalanine; between Brevundimonas and cysteine; and between Stenotrophomonas and cysteine as well as a negative correlation between Stenotrophomonas and serine. Conclusion: Our findings demonstrated that amino acid content of breast muscle and intestinal microbiota profile was affected by different ambient temperatures. Under heat exposure, augmented abundance of Parabacteroides was correlated with elevated methionine. Low temperature treatment may affect muscle tyrosine content through the regulation of Achromobacter.
Objectives: Dental plaque emits red fluorescence under a visible blue light near the ultra-violet end of the light spectrum. The fluorescence characteristics of each microorganism have been reported in several studies. The aim of this study was to evaluate changes in red fluorescence of oral microorganisms that is affected by blood in the culture media. Methods: The gram-positive Actinomyces naeslundii (AN, KCTC 5525) and Lactobacillus casei (LC, KCTC 3109) and gram negative Prevotella intermedia (PI, KCTC 3692) that are known to emit red fluorescence were used in this study. Each bacterium was activated in broth and cultivated in different agar media at $37^{\circ}C$ for 7 days. Tryptic soy agar with hemin and vitamin $K_3$ (TSA), TSA with sheep blood (TSAB), basal medium mucin (BMM) medium, and BMM with sheep blood (BMMB) were used in this study. Fluorescence due to bacterial growth was observed under 405-nm wavelength blue light using the quantitative light-induced fluorescence-digital (QLF-D) device. The red, green, and blue fluorescence values of colonies were obtained using image-analysis software and the red to green ratio (R/G value) and red to total RGB ratio (R/RGB value) were calculated for quantitative comparison. Results: The QLF-D images of the AN, LC, and PI colonies showed red fluorescence in all media, but the fluorescence of all bacteria was reduced in TSA and BMM media, compared with in TSAB and BMMB media. Both the R/G and the R/RGB values of all bacteria were significantly reduced in growth media without blood (P<0.001). Conclusions: Based on this in vitro study, it can be concluded that red fluorescence of oral bacteria can be affected by growth components, especially blood. Blood-containing medium could be a significant factor influencing red fluorescence of oral bacteria. It can be further hypothesized that bleeding in the oral cavity can increase the red fluorescence of dental plaque.
Purpose: The purpose of this study was to investigate the increase or decrease of important intestinal beneficial bacteria and inhibitory bacteria in 30 stools of clinical subjects after ingesting Zen fermentation broth as a mixed microbial fermentation solution for eight weeks. Methods: Intestinal bacteria were identified by PCR amplification using specific primers. Results: Bifidobacterium genus gi% of test group ingested Zen-fermented broth was 55.15% before and 70.1% after ingestion, so it was a significant difference (p<.009). Lactobacillus genus of the test group was 46.87% before and 60.91% after ingestion, it was a significant difference (p<.01). Clostridium genus of the test group was 85.64% before and 65.99% after ingestion. There was a significant difference (p<.017) as the pre-post-difference decreased to -19.65%. Bacteroides genus of the test group was 17.11% before and 20.22% after ingestion. There was a significant difference (p<.048) as the pre-post-difference increased to 3.11%. Prevotella genus of the test group was 14.01% before and 16.79% after ingestion, so it was not a significant difference. Conclusions: Intestinal bacteria increased the proliferation of beneficial bacteria and suppressed harmful bacteria in the intestines after ingesting the Zen-fermented broth of the mixed microorganism. The Zen fermentation broth evaluated as a beneficial drink for intestinal health.
Purpose: The purpose of this study was to investigate whether intestinal proliferation is promoted in beneficial intestinal bacteria or decreased in harmful bacteria before and after ingesting Bacillus fermentation broth (ENM) for 8 weeks in the 16 subjects. Method: Intestinal bacteria were identified by PCR amplification using specific 16S rRNA primers. Results: The Bifidobacterium gene index(%)(gi%) increased to 58.92% in the control group and 69.53% in the test group after the ingestion of ENM, but there was no significant difference. Lactobacillus gi% increased significantly (49.37% in the control and 66.43% in the test) (p<.029). Clostridium gi% was significantly decreased after treatment (83.16% in the control and 67.76% in the test) (p<.077). Bacteroides gi% increased significantly (12.58% in the control and 20.87% in the test) after ingesting (p<.095). Prevotella gi% increased significantly (7.55% in the control and 17.28% in the test) after ingesting (p<.005). After ingesting, the median bacteria increased significantly in the control (20.06%) and the test (35.88%) (p<.001). Conclusions: After ingestion of the ENM, the number of beneficial bacteria increased and the number of harmful bacteria Clostridium tended to decrease. This suggests that ingestion of the Bacillus fermented beverage ENM has an effect on the proliferation of intestinal bacteria.
Sjögren's syndrome (SS) is an autoimmune disease characterized by dryness of the mouth and eyes. The glandular dysfunction in SS involves not only T cell-mediated destruction of the glands but also autoantibodies against the type 3 muscarinic acetylcholine receptor or aquaporin 5 (AQP5) that interfere with the secretion process. Studies on the breakage of tolerance and induction of autoantibodies to these autoantigens could benefit SS patients. To break tolerance, we utilized a PmE-L peptide derived from the AQP5-homologous aquaporin of Prevotella melaninogenica (PmAqp) that contained both a B cell "E" epitope and a T cell epitope. Repeated subcutaneous immunization of C57BL/6 mice with the PmE-L peptide efficiently induced the production of Abs against the "E" epitope of mouse/human AQP5 (AQP5E), and we aimed to characterize the antigen specificity, the sequences of AQP5E-specific B cell receptors, and salivary gland phenotypes of these mice. Sera containing anti-AQP5E IgG not only stained mouse Aqp5 expressed in the submandibular glands but also detected PmApq and PmE-L by immunoblotting, suggesting molecular mimicry. Characterization of the AQP5E-specific autoantibodies selected from the screening of phage display Ab libraries and mapping of the B cell receptor repertoires revealed that the AQP5E-specific B cells acquired the ability to bind to the Ag through cumulative somatic hypermutation. Importantly, animals with anti-AQP5E Abs had decreased salivary flow rates without immune cell infiltration into the salivary glands. This model will be useful for investigating the role of anti-AQP5 autoantibodies in glandular dysfunction in SS and testing new therapeutics targeting autoantibody production.
Fermentation of legume fodder tree leaves by rumen microorganisms was evaluated. The substrates were sun-dried, ground leaves. Gas and volatile fatty acid (VFAs) production were estimated. Using gas production as an index of fermentation at 12 h, the leaves tested ranked as follows; Chamaecytisus palmensis>Gliricidia sepium>Sebania sesban>Tephrosia bracteolate>Leucaena pallida>Vernonia amygdalina>Acacia sieberiana>Sesbania goetzei>Acacia angustissima. Using VFA production, the ranking was a follows; G. sepium>S. sesban>S. goetzei>L. pallida>C. palmensis/V. amygdalina>T. bracteolate> A. sieberiana>A. angustissima. Absolute gas or VFA production rates, were also used to rank the leaves. Extracts (70% acetone) of A. angustissima inhibited the growth of Ruminococcus albus 8, R. flavefaciens FD-1, Prevotella ruminicola D3ID and Streptococcus bovis JBI while the trowth of Selenomonas ruminantium D was depressed when 0.6 ml exracts were added. C. palmensis water extracts enhanced cellulose hydrolysis by R. flavefaciens FD-1. All extracts reduced celluloysis by R. albus 8. R. flavefaciens FD-1 hydrolyzed more (p<0.001) cellulose than R. albus 8.
In general, oleanolic acid (OA) and ursolic acid (UA) have antimicrobial effect against Gram-positive bacteria but not Gram-negative bacteria whereas sophoraflavanone G has antimicrobial activity against both bacterial types. However, the antimicrobial effects of OA, UA, and sophoraflavanone G against periodontopathogens have not been studied to any great extent. The aim of this study was to investigate antimicrobial effect of OA, UA, and sophoraflavanone G against 15 strains (5 species) of oral Gram-negative bacteria, which are the major causative bacteria of periodontal disease. The antimicrobial activity was evaluated by minimal inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) determinations. OA and UA showed antimicrobial effects against all of the Porphyromonas gingivalis strains tested and also Prevotella intermedia ATCC $25611^T$. Interestingly, P. intermedia ATCC 49046 showed greater resistance to OA and UA than P. intermedia ATCC $25611^T$. In contrast, sophoraflavanone G had antimicrobial activity against all strains, with MIC and MBC values below $32{\mu}g/ml$, except Aggregatibacter actinomycetemcomitans. These results indicate that sophoraflavanone G may have potential for use in future oral hygiene products such as dentifrices and gargling solution to prevent periodontitis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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