• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제19권4호
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• pp.416-423
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• 2009

Hepatitis B core antigen(HBcAg) is an important serological marker used in the diagnosis of hepatitis B virus(HBV) infections. In the current study, a fast and efficient preparative purification protocol for truncated HBcAg from Escherichia coli disruptate was developed. The recombinant HBcAg was first captured by anion exchange expanded bed adsorption chromatography integrated with a cell disruption process. This online capture process has shortened the process time and eliminated the "hold-up" period that may be detrimental to the quality of target protein. The eluted product from the expanded bed adsorption chromatography was subsequently purified using size-exclusion chromatography. The results showed that this novel purification protocol achieved a recovery yield of 45.1% with a product purity of 88.2%, which corresponds to a purification factor of 4.5. The recovered HBcAg is still biologically active as shown by ELISA test.

• KSBB Journal
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• 제14권4호
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• pp.408-413
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• 1999

빠른 분석시간과 우수한 분리도를 가진 분석기기로서 크로마토그래피가 분취용으로 이용되기 위해서는 많은 시료양을 취급할 수 있어야 한다. 이 경우 충전물과 관의 크기가 커지게 되면 관의 효율은 분석용에 비해서 떨어지게 된다. 순도와 수율에 미치는 변수가 서로 복잡하게 연관되어 있기때문에 특히 분취용 조업조건의 최적화는 많은 경험과 실험이 요구된다. 또한 많은 상관된 실험변수들이 있고 분리하고자 하는 물질의 종류가 다양하기 때문에 수학적 모델을 적용하여 시료가 관내에서 거동 (behavior)을 예측하는 것이 쉽지 않다. 이러한 문제점을 해결하기 위해서 외국에서는 최소한의 실험을 통하여 고분가 가치 물질을 효율적이고 경제적으로 얻기 위한 크로마토그래피용 프로그램을 활발하게 이용하기 시작하였다. 인하대학교 고순도분리연구실에서 개발된 HCI 프로그램은 단지 LC에 국한된 것이 아니라 GC,SFC (supercritical fluid chromatography) 뿐만아니라 연속식 시스템인 SMB (simulated moving bed)까지 확장될 예정이다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제18권5호
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• pp.501-505
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• 1990

토양으로부터 분리한 Streptomyces 속 세균 KIS 13은 thiol 계통 단백질분해효소 활성을 특이적으로 저해하는 저분저량 저해물질을 생성하였다. 저해물질 생성은 세균체성장에 연관된 생성양상이 나타내었다. 배양액으로부토 butanol 추출, silicagel 60 column chromatography, Sephadex LH-2 gel-filtration chromatography, preparative HPLC 등의 과정을 통하여 단백질 분해효소 저해물질을 순수분리하였다. 이 저해물질은 Hammersten casein을 기질로 사용할때, papain에 대하여 non-competitive한 저해양상을 나타내었다.

• Fisheries and Aquatic Sciences
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• 제15권3호
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• pp.191-195
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• 2012

We report here the use of high-speed countercurrent chromatography (HSCCC) in the preparative isolation and purification of the bioactive component, fucosterol, from Pelvetia siliquosa. A crude extract was obtained by ultrasonic extraction of powdered P. siliquosa using methylene chloride and was then subjected to separation and purification by HSCCC, coupled with evaporative light-scattering detection. Preparative HSCCC was performed successfully using a two-phase solvent system, n-heptane:methanol (3:2, v/v), to obtain 10.96 mg fucosterol with 96.8% purity from 50 mg of crude extract; the recovery rate was approximately 90.5%.

• Bulletin of the Korean Chemical Society
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• 제8권4호
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• pp.272-275
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• 1987

Two polyacetylene compounds having diyn-ene chromophore were isolated from fresh Korean ginseng roots through solvent fractionation, partition and silica gel column chromatography. The low pressure semi-preparative liquid chromatography and high performance preparative liquid chromatography were used for final separation of polyacetylenic fractions. The chemical structures of these polyacetylenes were determined to be heptadeca-1,8-dien-4,6-diyn-3,10-diol and heptadeca-1,4-dien-6,8-diyn-3,10-diol by UV, FT-IR, $^1H\;NMR,\;^{13}C\;NMR,$ mass spectra and elemental analysis.

• KSBB Journal
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• 제14권3호
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• pp.371-376
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• 1999

제조용 액체 크로마토그래피를 전산모사하는 것은 최적의 분리와 조건을 위해 필수적이다. 제조용 액체 크로마토그래피에서의 단일 성분과 2성분 용출 피크의 거동을 설명하는 수학적 모델을 equilibrium-dispersive model을 이용해 계산을 수행하였다. 모델의 전산모사를 통해 주입되는 시료부피, 시료속의 용질의 농도, 유속, 컬럼길이가 용출되는 피크에 미치는 영향을 확인해 보았다. Equilibrium-dispersive model로 전산모사된 data를 이용하여 단일 성분 시료 주입에 대해 주입 농도와 유속에 대한 영향을 알아본 결과 주입 농도를 증가시킬수록 용출이 일어나는 시점이 앞당겨져 평균 체류 시간이 감소하고 날카로운 피크를 얻을 수 있다. 유속을 증가시키면 시료의 용출 시점이 앞당겨지고, 고정상과의 충분한 상호 작용을 일으키기 전에 용출되기 때문에 피크가 날카로와 진다. 2성분 시료 주입에 대해 분리도값들을 계산한 결과 두번째로 용출되는 시료의 농도를 증가시킬수록 이 시료성분이 더 빨리 용출되므로 분리도값이 감소함을 알 수 있다. 칼럼길이가 분리도에 미치는 영향을 보면 칼럼길이를 길게 할수록 시료성분이 고정상과의 완전한 상호작용으로 분리가 잘되고, 시료의 주입량을 증가시키면 두 성분간의 용출 피크의 간격이 좁아져 분리도 값이 감소함을 알 수 있다. 이 내용을 바탕으로 다성분 분리에 대한 simulation 연구로 확장할 수 있다.

• Journal of Ginseng Research
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• 제43권1호
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• pp.105-115
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• 2019

Background: Ginsenosides with less sugar moieties may exhibit the better adsorptive capacity and more pharmacological activities. Methods: An efficient method for the separation of four minor saponins, including gypenoside XVII, notoginsenoside Fe, ginsenoside Rd2, and notoginsenoside Fd, from Panax notoginseng leaves (PNL) was established using biotransformation, macroporous resins, and subsequent preparative high-performance liquid chromatography. Results: The dried PNL powder was immersed in the distilled water at $50^{\circ}C$ for 30 min for converting the major saponins, ginsenosides Rb1, Rc, Rb2, and Rb3, to minor saponins, gypenoside XVII, notoginsenoside Fe, ginsenoside Rd2, and notoginsenoside Fd, respectively, by the enzymes present in PNL. The adsorption characteristics of these minor saponins on five types of macroporous resins, D-101, DA-201, DM-301, X-5, and S-8, were evaluated and compared. Among them, D-101 was selected due to the best adsorption and desorption properties. Under the optimized conditions, the fraction containing the four target saponins was separated by D-101 resin. Subsequently, the target minor saponins were individually separated and purified by preparative high-performance liquid chromatography with a reversed-phase column. Conclusion: Our study provides a simple and efficient method for the preparation of these four minor saponins from PNL, which will be potential for industrial applications.

• 한국자원식물학회지
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• 제9권1호
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• pp.47-54
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• 1996

할미꽃의 뿌리에 함유되어 있는 제초활성물질의 확인과 동정을 위하여 이들을 추출 정제하고 활성성분 및 제초활성을 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 각종 칼럼크로마토그래피법과 Prep. HPLC의 순차적인 적용에 의해 제초활성물질이 포함된 할미꽃 뿌리의 메타놀추출물을 정제하여 2개의 활성분획을 획득하였다. 2. 최종적으로 얻어진 활성분획들을 100ppm의 농도로 조제하여 처리한 결과, 식용피 유근의 생장 억제율은 대조구에 비해 각각 48% 및 60%로 나타났다. 3. GC-MS Spectrometry에 의해 분리된 활성분획 중의 성분들을 기존자료들과 비교하여 수종의 지방산 에스테르, 2종의 탄화수소류, squalene, evidonol 및 1종의 diazepin 관련 화합물이 동정되었다.

• Environmental Engineering Research
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• 제23권4호
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• pp.390-396
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• 2018

This study investigated the transformation of dissolved organic matter (DOM) in a free-water surface flow constructed wetland. Pyrolysis gas chromatography-mass spectrometry (Py-GC/MS) coupled with preparative high-performance liquid chromatography (prep-HPLC) was used to analyze the compositions of biopolymers (polysaccharides, amino sugars, proteins, polyhydroxy aromatics, lipids and lignin) in DOM according to the molecular size at three sampling points of the water flow: inflow, midflow, and outflow. The prep-HPLC results verified the decomposition of DOM through the decrease in the number of peaks from three to one in the chromatograms of the sampling points. The Py-GC/MS results for the degradable peaks indicated that biopolymers relating to polysaccharides and proteins gradually biodegraded with the water flow. On the other hand, the recalcitrant organic fraction (the remaining peak) in the outflow showed a relatively high concentration of aromatic compounds. Therefore, the ecological processes in the constructed wetland caused DOM to become more aromatic and homogeneous. This indicated that the constructed wetland can be an effective buffer area for releasing biochemically stable DOM, which has less influence on biological water quality indicators, e.g., biochemical oxygen demand, into an aquatic ecosystem.

• 식물병연구
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• 제15권2호
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• pp.112-119
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• 2009

Botrytis cinerea가 생산하는 phytotoxin이 병원성에 미치는 영향을 조사하던 중에 두 개의 새로운 phytotoxin을 발견하였다. 1994년과 1996년에 여러 식물체로부터 분리한 Botrytis cinerea 균주들을 기주별, 지역별, 형태적 특성별로 25개의 균주를 선별한 후 단포자 분리를 실시하였다. 22균주는 오이, 토마토, 고추 담배, 배추 등 5가지 식물에 대해 강하거나 중간 정도의 병원성을 보였다. 그러나 KJ 균주를 포함한 3균주는 병원성이 매우 약하였다. 식물에 대한 phytotoxicity를 조사하기 위하여 25균주의 배양 여액을 담배잎에 leaf-wounding assay를 실시한 결과 2-16균주가 가장 강한 활성을 보였다. 따라서 2-16 균주의 배양액을 ethyl acetate로 추출한 후 flash silica gel column chromatography, silica gel column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, preparative TLC 및 preparative HPLC 등을 통하여 두 개의 phytotoxin을 분리하였다. 분리한 phytotoxin을 질량분석과 핵자기 공명분석을 통해 구조동정을 실시한 결과 3-O-acetyl botcinol과 3-O-acetyl botcinolide로 동정하였다. 두 개의 물질은 leaf-wounding bioassay에서 잎에 괴사를 일으켰으며, 또한 담배 잎에서 심각한 전해질 누출을 일으켰다. 두 생물검정에서 3-O-acetyl botcinol이 3-O-acetyl botcinolide보다 강한활성을보였다. B. cinerea가 생산한 두 개의 phytotoxin에 대해서는 본 논문에서 처음으로 보고하는 바이다.