Corynebacterium glutamicum is one of the well-studied industrial strain that is used for the production of nucleotides and amino acids. Recently, it has also been studied as a possible producer of organic acids such as succinic acid, based on its ability to produce organic acids under an oxygen deprivation condition. In this study, we conducted the optimization of medium components for improved succinate production from C. glutamicum under an oxygen deprivation condition by Plackett-Burman design and applied a response surface methodology. A Plackett-Burman design for ten factors such as glucose, ammonium sulfate, magnesium sulfate, potassium phosphate ($K_2HPO_4$ and $KH_2PO_4$), iron sulfate, manganese sulfate, biotin, thiamine, and sodium bicarbonate was applied to evaluate the effects on succinate production. Glucose, ammonium sulfate, magnesium sulfate, and dipotassium phosphate were found to have significant influence on succinate production, and the optimal concentrations of these four factors were sequentially investigated by the response surface methodology using a Box-Behnken design. The optimal medium components obtained for achieving maximum concentration of succinic acid were as follows: glucose 10 g/l, magnesium sulfate 0.5 g/l, dipotassium phosphate ($K_2HPO_4$) 0.75 g/l, potassium dihydrogen phosphate ($KH_2PO_4$) 0.5 g/l, iron sulfate 6 mg/l, manganese sulfate 4.2 mg/l, biotin 0.2 mg/l, thiamine 0.2 mg/l, and sodium bicarbonate 100 mM. The parameters that differed from a normal BT medium were glucose changed from 40 g/l to 10 g/l, dipotassium phosphate ($K_2HPO_4$) 0.5 g/l changed to 0.75 g/l, and ammonium sulfate ($(NH_4)_2SO_4$) 7 g/l changed to 0 g/l. Under these conditions, the final succinic acid concentration was 16.3 mM, which is about 1.46 fold higher than the original medium (11.1 mM) at 24 h. This work showed the improvement of succinate production by a simple change of media components deduced from sequential optimization.
When bougainvilleas are subjected to indoor low-light conditions, flower bracts regularly abscise. This study elucidates the effects of plant growth regulators on bract longevity of potted bougainvillea. Potted 'Taipei Red' bougainvillea in four different bract development stages were treated with 1-MCP (1-methylcyclopropene), NAA (1-naphthaleneacetic acid), SNA (sodium salt of naphthaleneacetic acid), IBA (indolebutyric acid), BA (6-benzylaminopurine), $KH_2PO_4$ (potassium dihydrogen phosphate), Put (diamine putrescine), SA (salicylic acid), or STS (silver thiosulfate) and were moved to indoor low-light conditions after treatments. Experimental results indicate that 1-MCP, NAA, SNA, BA, Put, and SA prolonged bract longevity, and this effect increased as bract stage increased. The effect of STS was significant in early bract stages and decreased as bract stages increased. Additionally, 1-MCP, NAA, SNA, BA, Put, SA, and STS treatment significantly reduced endogenous ACC (1-aminocyclopropene-1-carboxylate) content and ACC oxidase activity, suggesting that the inhibition of ethylene production was achieved via physiological metabolism. However, treatment with IBA or $KH_2PO_4$ had no effect on the bract longevity at any stage. In the combined chemical treatments, NAA + STS or NAA + SA were effectively for prolonging bract longevity and contained less protein or chlorophyll degradation, decrease ACC oxidase or ethylene production than the control. In conclusion, we propose that combined chemical treatment significantly prolonged the bract longevity and more effectively than single chemical treatment at any stage.
본 연구는 콘크리트 보수재료로서의 MgO계 세라믹(Magnesia Phosphate Cement: MPC) 모르타르의 기초물성 평가를 위한 것이다. 이를 위해 응결시간, 압축강도, 부착강도를 측정하였으며 수화물의 측정을 위해 X-ray 회절분석을 실시하였다. 시편은 중질 마그네시아(dead burnt magnesia)를 바인더로 사용하였으며 활성제로 칼륨계 인산염을 사용하였고, 응결시간을 지연 시키기 위해 Borax를 지연제로 사용하였다. 또한, 이온침투저항성 평가를 위해 공극구조와 촉진염화물침투시험을 실시하였다. 그 결과 MPC 모르타르의 응결시간은 M/P 비에 따라 16~21분 사이로 빠르게 경화하였으며 지연제인 Borax는 MPC의 응결시간을 68분까지 늦추는 데 도움이 되었다. MPC 모르타르의 압축 강도는 12시간 재령에서 M/P 비에 따라 11.0~30.0 MPa 범위로 발현되었고 특히 M/P 비가 4인 MPC의 압축 강도는 12시간 이내에 30 MPa 정도의 강도를 발현하였다. MPC의 인장 부착강도와 휨 부착강도는 OPC 모르타르에 비해 각각 19 MPa와 17 MPa로 더 높게 측정되었으며 MPC 모르타르의 총 공극량은 OPC 모르타르에 비해 적게 측정되었고 촉진염화물침투시험에서도 MPC 모르타르를 통과한 총 전하가 OPC 모르타르보다 적었으며 이는 공극량과 공극분포로 설명 할 수 있다.
The objective of the present investigation was to study pharmacokinetics of promethazine in Korean healthy subjects using a validated HPLC method. The HPLC analysis was performed on a Capcell Pak CN column with a mixture of acetonitrile-0.02M potassium dihydrogen phosphate (42:58, v/v, pH 6.0) and the analyte was quantified with UV detection at 251 nm. The calibration curve of the drug was linear over the range of 1-40ng/mL in human serum and the limit of quantification (LOQ) was 1 ng/mL. This analytical method was validated and shown to be specific, accurate, precise and reproducible. This method was applied to pharmacokinetic study of promethazine in Korean healthy volunteers following an oral administration of two 25 mg Himazin tablets (50 mg promethazine ${\cdot}$HCI) after overnight fasting. Serum samples were collected at given intervals over a 36-hour period (12 points) and pharmacokinetic parameters were determined from serum concentration-time profile using WinNonlin program. The estimated $AUC_{0__\infty}$, $AUC_{0_\infty}$, $C_{max}$, $T_{max}$ and $t_{1/2}$ of promethazine obtained from Korean healthy subjects were 103.84 ${\pm}$84.30 ng${\cdot}$hr/mL, 87.94${\pm}$81.02 ng${\cdot}$hr/mL, 13.43${\pm}$10.92 ng/mL, 2.00${\pm}$1.16 hr and 5.88${\pm}$3.47 hr, respectively.
Removal of arsenic (As) from soil aggregates with particle sizes of > 2.0, 2.0-0.25, 0.25-0.053, < 0.053 mm by soil washing of $KH_2PO_4$ and the kinetics of As releasing from soil aggregates were investigated. Effects of $KH_2PO_4$ concentration, ratio of liquid/soil and washing duration on the removal were fully explored. The results showed that the high As removal was obtained in > 2 mm aggregates (48.56%) and < 0.053 mm aggregates (42.88%) under the optimum condition ($KH_2PO_4$ concentration of 0.1 mol/L, and liquid/soil ratio (10 mL/g) for 360 min). 62.82% of As was extracted from aggregates with size less than 0.25 mm. Only 11.88% was contributed by the large aggregates (> 2.0mm). Using $KH_2PO_4$ washing, it was also found that extracted As is mainly in form of either specifically sorbed As or As associated with oxides of Fe and Al. Elovich model can describe the removal process of As more precisely than Two-constant kinetic models. The optimum washing conditions and removal process is also applied to bulk soil. This technique in this study is reliable, cost-effective and offers a great potential for practical application in soil remediation.
본 연구에서는 이온쌍 역상 HPLC/UV를 이용하여 건강한 한국인에서 분리된 말초혈액단핵구(PBMCs)에서 이노신 5'-일인산 탈수소효소(IMPDH)의 활성을 측정하였다. IMPDH는 이노신 5'-일인산(IMP)을 잔토신 5'-일인산(XMP)로 전환시키는 베타-니코틴아마이드 아데닌 디뉴클로티드 수화물(${\beta}-NAD^+$) 의존성 탈수소효소이며, 이것의 활성은 기질인 IMP와 조효소인 $NAD^+$의 존재 하에서 분해한 PBMCs로 부터 생성된 XMP에 해당하는 HPLC 크로마토그램을 정량적으로 분석함으로써 측정하였다. 생성된 XMP는 260 nm에서 검출하였다. 이동상으로는 7 mM tetra-n-butylammonium hydrogen sulfate가 포함된 37 mM potassium dihydrogen phosphate (pH 5.5)와 methanol의 혼합용액(85:15, v/v)을 사용하였으며, 유속은1 mL/min이었다. 정량 범위는 $0.2-50.0\;{\mu}M$이었으며, 이 때 정량 한계(LOQ)는 $0.2\;{\mu}M$이었다. 또한, 본 연구에서 확립된 시험법은 일내 정밀성(0.88-1.47%), 정확성(98.74-99.99%)과 일간 정밀성(0.85-5.24%), 정확성(99.95-101.65%)을 측정하여 검증하였다. 11명의 건강한 한국인에 대한 IMPDH 활성 측정 결과, 18.29-36.60 nmol/h/mg protein(평균값 $27.70{\pm}6.28\;nmol/h/mg$ protein)이었다.
A rapid, selective and sensitive reversed-phase HPLC method for the determination of glipizide in human serum was validated and applied to the pharmacokinetic study of glipizide. Glipizide and internal standard, tolbutamide, were extracted from human serum by liquid-liquid extraction with benzene and analyzed on a Nova Pak $C_{18}\;60{\AA}$ column with the mobile phase of acetonitrile-potassium dihydrogen phosphate (10 mM, pH 3.5) (4:6, v/v). Detection wavelength of 275 nm and flow rate of 0.7 ml/min were fixed for the study. The assay robustness for the changes of mobile phase pH, organic solvent content, and flow rate was confirmed by $3^3$ factorial design using a fixed glipizide concentration (500 ng/ ml) with respect to its peak area and retention time. And also, the ruggedness of this method was investigated at three different laboratories using same quality control (QC) samples. This method showed linear response over the concentration range of 10-1000 ng/ml with correlation coefficient greater than 0.999. The lower limit of quantitation using 0.5 ml of serum was 10.0 ng/ml, which was sensitive enough for pharmacokinetic studies. The overall accuracy of the quality control samples ranged from 82.6 to 105.0% for glipizide with overall precision (% C.V.) being 1.13-13.20%. The percent recovery for human serum was in the range of 85.2 93.5%. Stability studies showed that glipizide was stable during storage, or during the assay procedure in human serum. The peak area and retention time of glipizide were not significantly affected by the changes of mobile phase pH, organic solvent content, and flow rate under the conditions studied. This method showed good ruggedness (within 15% C.V.) and was successfully used for the analysis of glipizide in human serum samples for the pharmacokinetic studies at three different laboratories, demonstrating the suitability of the method.
A selective and sensitive reversed-phase HPLC method for the determination of fenoprofen in human serum was developed, validated, and applied to the pharmacokinetic study of fenoprofen calcium. Fenoprofen and internal standard, ketoprofen, were extracted from human serum by liquid-liquid extraction with diethyl ether and analyzed on a Luna C18(2) column with the mobile phase of acetonitrile-3 mM potassium dihydrogen phosphate (32:68, v/v, adjusted to pH 6.6 with phosphoric acid). Detection wavelength of 272 nm and flow rate of 0.25 mL/min were fixed for the study. The assay robustness for the changes of mobile phase pH, organic solvent content, and flow rate was confirmed by $3^{3}$ factorial design using a fixed fenoprofen concentration $(2\;{\mu}g/mL)$ with respect to its peak area and retention time. And also, the ruggedness of this method was investigated at three different laboratories using same quality control (QC) samples. This method showed linear response over the concentration range of $0.05-100\;{\mu}g/mL$ with correlation coefficients greater than 0.999. The lower limit of quantification using 1 mL of serum was $0.05\;{\mu}g/mL$, which was sensitive enough for pharmacokinetic studies. The overall accuracy of the quality control samples ranged from 92.27 to 109.20% for fenoprofen with overall precision (% C.V.) being 5.51-11.71 %. The relative mean recovery of fenoprofen for human serum was 81.7%. Stability (freeze-thaw, short and long-term) studies showed that fenoprofen was not stable during storage. But, extracted serum sample and stock solution were allowed to stand at ambient temperature for 12 hr prior to injection without affecting the quantification. The peak area and retention time of fenoprofen were not significantly affected by the changes of mobile phase pH, organic solvent content, and flow rate under the conditions studied. This method showed good ruggedness (within 15% C.V.) and was successfully used for the analysis of fenoprofen in human serum samples for the pharmacokinetic studies of orally administered Fenopron tablet (600 mg as fenoprofen) at three different laboratories, demonstrating the suitability of the method.
A rapid, selective and sensitive reversed-phase HPLC method for the determination of promethazine in human serum was developed, validated, and applied to the pharmacokinetic study of promethazine. Promethazine and internal standard, chlorpromazine, were extracted from human serum by liquid-liquid extraction with n-hexane containing 0.8% isopropanol and analyzed on a Capcell Pak CN column with the mobile phase of acetonitrile-0.2 M potassium dihydrogen phosphate (42:58, v/v, adjusted to pH 6.0 with 1 M NaOH). Detection wavelength of 251 nm and flow rate of 0.9 mL/min were fixed for the study. The assay robustness for the changes of mobile phase pH, organic solvent content, and flow rate was confirmed by $3^{3}$ factorial design using a fixed promethazine concentration (10 ng/mL) with respect to its peak area and retention time. In addition, the ruggedness of this method was investigated at three different laboratories using same quality control (QC) samples. This method showed linear response over the concentration range of 1-40 ng/mL with correlation coefficients greater than 0.999. The lower limit of quantification using 1 mL of serum was 1 ng/mL, which was sensitive enough for pharmacokinetic studies. The overall accuracy of the quality control samples ranged from 96.15 to 105.40% for promethazine with overall precision (% C.V.) being 6.70-11.22%. The relative mean recovery of promethazine for human serum was 63.54%. Stability (freeze-thaw and short-term) studies showed that promethazine was stable during storage, or during the assay procedure in human serum. However, the storage at $-80^{\circ}C$ for 4 weeks showed that promethazine was not stable. Extracted serum sample and stock solution were not allowed to stand at ambient temperature for 12 hr prior to injection. The peak area and retention time of promethazine were not significantly affected by the changes of mobile phase pH, organic solvent content, and flow rate under the conditions studied. This method showed good ruggedness (within 15% C.V.) and was successfully used for the analysis of promethazine in human serum samples for the pharmacokinetic studies of orally administered Himazin tablet (25 mg as promethazine hydrochloride) at three different laboratories, demonstrating the suitability of the method.
Seo, Young-Jin;Kim, Jong-Su;Park, Kee-Choon;Park, Chun-Geun;Ahn, Young-Sup;Cha, Seon-Woo;Kang, Yoon-Ju
한국토양비료학회지
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제48권5호
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pp.421-427
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2015
Angelica gigas Nakai is one of the most widely used herbal medicines and is known to have many pharmaceutical effects including an anti-oxidant, anti-cancer etc. This study was carried out to investigate an effect of fertilization on leaf yield, production of dry-matter and accumulation of pyranocurmarine compounds such as decursin (DE) and decursinol angelate (DA) in Angelica gigas Nakai. Effect of fertilization was determined from response surface regression equation composing of 2 by 3 factorial arrangement of urea, sodium dihydrogen phosphate and potassium chloride. Yield of leaf in Angelica gigas Nakai significantly increased until 100 days after transplanting. Production of leaf also tended to increase with increasing nitrogen fertilization. Model of regression equation showed that leaf production depended upon nitrogen ($Pr>{\mid}t{\mid}$ : 0.087, 0.256 and 0.079). Also, statistical results between nitrogen application level and production of dry-matter showed significant relationship (p<0.05) and contents of dry-matter was highest in 10 kg 10a-1 treatment on 24 Sep. Active compound isolated and purified from leaf and root of Angelica gigas Nakai was identified as DE and DA by gas chromatograph-mass spectrophotometry (GC-MS). Concentration of DA as prevalent compound in leaf was highest on 20 Aug. but decreased on 24 Sep. Amount of DE and DA accumulated in Angelica gigas Nakai significantly increased with growth stages and nitrogen level. The result of our investigation imply that nitrogen fertilization is important factor for production of leaf and accumulation of pyranocurmarine in Angelica gigas Nakai as a medicinal/food materials.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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