In order to diagnose canine heartworm infection by antigen capture ELISA, the crude somatic(S), partial somatic(below 45kDa) and excretory/secretory(E/S) antigen of adult heartworm were identified and the antigenicity was examined by silver stain, immunoblot and ELISA. Then, production of monoclonal antibody to specific antigen carried out in this experiment. The bands to S antigen and E/S antigen were recognized between 10 and 200kDa and common bands were recognized strongly 14, 18, 28, 43kDa by silver stain. By western blot analysis, fractions to S antigen were recognized 14, 16, 18, 20, 24, 28, 32, 43, 50, 55kDa, etc. and only a 14kDa to E/S antigen in positive sera which were positive in modified Knott's test and necropsy. In ELISA, the positive sera reacted to antigens(SA, $SA_{45}$, E/S) were significantly different from negative sera by Student's t-test(p<0.05). Four hybridoma cell lines(14, 16, 17, 32kDa) than produce specific monoclonal antibodies for these antigens were obtained by immunizing BALB/c mice with a partially purified somatic antigen (below 45kDa) preparation, by fusing spleen cells with SP2/O cell myeloma cells, and by screening cell culture supernatants for antibody. In these results, it was confirmed that partial somatic antigen(below 45kDa) or E/S antigen can be used for serologic diagnosis of heartworm infection and monoclonal antibody reacting with specific antigen(14kDa) can be used for antigen capture ELISA in prepatent period of canine heartworm infection.
This study was performed to compare DNA content by flow cytometer (FCM) and glutathione S-transferase placental form (GST-P) positive foci for searching objective and accurated properties of tumor. Sprague-Dawley rats aged six weeks were divided into three groups and group 1 and 2 of rats were given an intraperitoneal injection of diethylnitrosamine at 200mg/kg body weight and group 3 of rats were given saline. Three weeks after beginning of the experiment, all groups were performed partial hepatectomy. Group 1 of rats were begun to feed on diets containing 0.02% 2-acetylaminofluorene as a promoter for six weeks, group 2 and 3 of rats were begun to feed on basal diets. At 4, 6, and 8 weeks after initiation, all groups of rats were killed, livers were extracted for H & E stain, immunohistochemical stain, and DNA ploidy analysis. In quantitative analysis for GST-P positive lesion number and area by using Image Analyzer, group 1 and 2 represented significant difference in comparison with group 3. In ploidy distribution, diploid cells of group 1 and 2 were increased significantly in comparison with those of group 3 at 4, 6, and 8 weeks after initiation, respectively tetraploid cells were reduced. But S-phase cells were not changed significantly. It is concluded that ploidy change by FCM is useful as objective data for early detection in hepatocarcinogenesis. Therefore, methodology and study of DNA content are carried out for more objective and accurate ploidy analysis in liver tumor.
This study was designed to investigate the distributions of the positive cells in rat spleens by two monoclonal antibodies of MT1 and MB2. The spleens of immature 10 rats (Sprague Duwely, approximately 200gm) were collected and paraffin-embedded sections of spleens were stained with immunohistochemical methods. Higher proportions of MT1-positive cell number in spleens were ordered as marginal zone(8.5~18.1%), red pulp(2.1~8.8%) and periarterial lymphoid sheath(0~1.6%) in white pulp, and those of MB2-positive cell number are ordered as the central area of the periarterial lymphoid sheath(100%), red pulp(29.1~45.0%), marginal zone(15.2~30.4%), and peripheral area of periarterial lymphoid sheath(2.3~3.5%). The positive cells by MB2 are more numerous in number than by MT1. The above results were concluded that the positive cells by above two monoclonal antibodies were scattered throughout the red pulp and marginal zone, but in the central area of the periarterial lymphoid sheath, the MB2-positive cells only were present.
Tuberculous tracheobronchitis is defined as a specific inflammation of the trachea or major bronchi caused by the tubercle bacillus and recognized as one of the most common and serious complication of pulmonary tuberculosis. It had been a diagnostic challenge in prebronchoscopic era and since 1968, fiberoptic bronchoscopy has been accepted as a safe and valuable diagnostic procedure of tuberculous tracheobronchitis. Now, it remains a troublesome therapeutic problem due to its sequelae such as bronchostenosis, bronchiectasis and bronchial deformity. The authors analyzed the clinical features, radiological findings and bronchoscopic findings with pathologic and bacteriologic study on 61 cases of tuberculous tracheobronchitis and following results were obtained. 1) The peak incidence was in the fourth decade and male to female ratio was 1:3.4. 2) The most common symptom was cough (86.9%) and followed by sputum (49.2%), dyspnea (27.9%), fever (19.8%), weight loss (11.5%), hemoptysis (6.6%), hoarseness (6.6%) and chest discomfort (3.3%) and localized wheezing was heard in 18%. 3) In chest X-ray, consolidation with collapse was observed in 70.5%, and followed by consolidation only (18.0%), mediastinal node enlargement (8.2%), cavitary lesion (6.6%), suspicious hilar mass (3.3%) and miliary lesion (1.6%) and there was no abnormal findings in 4.9%. 4) Bronchoscopy showed hyperplastic lesion in 67.2%, mucosal lesion (18.0%), ulcerative lesion (9.8%) and stenotic lesion (4.9%). The most common site of bronchial lesion was right upper bronchus (36.1%) and followed by right main bronchus (34.4%), left main bronchus (29.5%), left upper bronchus (16.4%), right middle bronchus (8.2%), right lower bronchus (6.6%) and left lower bronchus (3.3%). 5) Chronic granulomatous inflammation with or without caseation necrosis on microscopic examination was confirmed in 69.7%, bronchial washing AFB stain was positive in 34.1%, prebronchoscopic sputum AFB stain was positive in 88.1% and postbronchoscopic sputum AFB stain was positive in 30.1%.
급속정중구개확장 후 봉합부에서의 골조직 변화를 관찰하기 위해 유성견 4마리중 1마리는 대조군으로, 3마리는 실험군으로 사용하여 상악골에 급속정중이개장치를 장착한 후 매일 아침, 저녁으로 2회전($180^{\circ}$)씩 활성화시켜 8일간 정중이개를 시킨 직후, 보정 14일후, 보정 28일후에 각각 희생시켜 정중구개봉합부를 절취하여 각각 통법에 따라 H-E 염색, Villanueva 염색, 염기성 인산분해효소 염색, tartrate저항성 산성분해효소 염색을 시행하여 봉합부를 광학현미경으로 관찰하곤 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 정중구개봉합 확장 직후, 교원섬유 다발은 신장되었고 조골세포는 비활성화된 양상으로 소수 관찰되었으며 소수의 골양조직도 관찰되었다. 또한 수평절단 표본에서는 TRAP 염색에 양성반응을 보이는 세포가 소수 관찰되었으나 전두절단 표본에서는 구개골의 성장방향에 따라 비강에 인접한 부위에서 TRAP 염색에 양성반응을 보이는 파골세포들이 다수 관찰되었다. 2. 정중구개봉합 확장 14일후, 교원섬유다발은 신장되었고 ALP 염색에 양성반응을 보이는 조골세포가 소수 관찰되었으며, 수평절단 표본에서는 TRAP 염색에 양성반응을 보이는 세포가 거의 관찰되지 않았으나 전두절단 표본에서는 구개골의 성장방향에 따라 비강에 인접한 부위에서 TRAP 염색에 양성반응을 보이는 파골세포들이 다수 관찰되었다. 3. 정중구개봉합 확장 28일후, 교원섬유다발은 대조군과 유사한 양상으로 배열되었고 ALP 염색에 양성반응을 보이는 조골세포가 다수 관찰되었으며 많은 양의 미성숙골이 형성되었고, 수평절단 표본에서는 TRAP 염색에 양성반응을 보이는 세포가 거의 관찰되지 않았으나 전두절단 표본에서는 구개골의 성장방향에 따라 비강에 인접한 부위에서 TRAP 염색에 양성반응을 보이는 파골세포들이 다수 관찰되었다. 이상의 결과를 종합해볼 때, 정중구개봉합부를 급속확장시킨 후 신생골 형성은 보정 14일이 지난 후부터 관찰되기 시작하였으며, 보정 28일이 지난 후에는 신생골형성이 훨씬 왕성하게 진행되었음을 관찰할 수 있었다.
Objective: The effects on spermatogenesis by expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) and endothelin-1 (ET-1) were investigated. Materials and Methods: Testicular specimens were obtained from 40 infertile males due to primary testicular failure and from 10 fertile males with other urologic problems. The specimens of infertile males were devided into 4 groups according to histologic findings; Sertoli cell only syndrome (A), maturation arrest (B), hypospermatogenesis (C) and sloughing and disorganization (D). VEGF and ET-1 expression were detected with immunohistochemical stain. Results: VEGF expression on Leydig cell was detected in all cases. But, VEGF expression rates on germ cell were significantly higher in infertile group B, C, D compared to that of the control group (p<0.05). ET-1 expression rates on Leydig cell was significantly lower in all infertile group compared to that of the control group (p<0.05). But, ET-1 expression rates on Sertoli cell was significantly higher in all infertile group compared to that of the control group (p>0.05). In germ cell of infertile group, LH, FSH and prolactin were significantly decreased, and estradiol is increased in positive stain group on ET-1 immunohistochemical stain (p<0.05). VEGF and ET-1 expression were not correlated mean seminiferous tubule diameter (p>0.05). Conclusions: Abnormal spermatogenesis would be reflected in VEGF expression in germ cell.
대두 자반병에 대하여 저항성인 계통 선발을 위한 Mass-screening technique를 확립하고 이 종자잡종법을 이용하여 수집재내종 및 각 품종의 저항성검정을 실시한 결과는 다음과 같다. 1. 조숙성인 수집재내종 50계통의 자반병 자연감염률과 종자접종에 의한 자주빛 색소 형성률간에 나타난 정의 상관관계는 r=0.121로서 고도의 유의성이 인정되었으며 이 종자접종법은 효과약인 Mass-screening technique으로서 방사선을 이용한 돌연변이육종에서 자반병저항성 계통선발에 이용가능성이 높았다. 2. 자반병 자연감염률이 극히 낮은 만숙성 수집재내종 85계통은 종자접종에 의하여 대부분이 이병성 반응을 보였으며 이는 포장에서의 만숙계통의 저항성이 유전적인 특성이기 보다는 병해도피 현상에 기인한 것으로 생각되었다. 3. 대두품종의 저항성검정에서 우리나라 대두 36품종을 비롯하여 일본과 대만의 각 16품종, 베트남 11품종, 필리핀 8품종 및 미국 38품종 등 대부분이 이병성이였고 미국품종인 Sac, Hill, Harosoy등이 비교적 저항성 이었다. 4. 각 지역에서 분리한 대두 자반병균 244 isolates 중에서 배지에서 자주빛 색소를 형성하지 않는 두 균주를 제외하고는 모두가 암조건에서는 감자한천배지에서, 광조건에서는 오트밀한친배지에서 자주빛 색소형성이 잘 되었으며 배지에서의 색소형성 정도는 종자에서의 병원성과 밀접한 상관이 있었다.
The present investigation was focussed on histochemical and electron microscopical observations of utero-vaginal(U-V) glands in U-V junctions of domestic hens. In histochemical observations, fine granules by PAS technique for mucopolysaccharides and nile blue stain for acidic lipids were slightly stained on the cytoplasm of U-V glandular epithelium. Larger granules by Sudan black B stain for neutral fat and phospholipids and Sudan III stain for neutral fat were heavily stained on the perinuclear region of the U-V gland epithelial cells. These positive materials were heavily stained on the U-V glandular epithelium of lowfecundity hens and non-laying hens. In scanning electron microscopic findings of the U-V junction surface, the orifices of U-V glands are seen as the crater-like invagination. The neck of the U-V gland and the epithelium of U-V iunction were covered by ciliated epithelial cells. Aggregates of spermatozoa are observed often to be on the necks of the U-V gland. These spermatozoa heads are embedded in the glandular tubules and many spermatozoa tails are free on the epithelium of uterine surface. In transmission electron microscopic findings, the epithelial cells of the U-V glandular orifices were ciliated, columnar cells. The apical regions of these cells contained numerous electrondense, round secretory granules of uniformly size. The epithelial cells of the U-V glandular tubule were columnar or pyramid shape with round or oval nuclei. These epithelial cells have numerous microvilli and also contained electron-dense, round secretary granules of uniformly size and electron-lucent vesicles of various size. Spermatozoa are seen as the cross-sections of various regions of heads and tails in glandular tubules. Also spermatozoa arranged longitudinally parallel within the glandular tubules.
A total of 38 bacterial strains within the classes Bacilli and Deinococci were isolated from various sources in Korea. Samples were collected from animal intestine, urine, soil, tidal flat mud, and kimchi. In the sequence comparison and phylogenetic analysis of 16S rRNA sequences, the 38 isolates were assigned to the classes Bacilli and Deinococci with sequence similarities more than 98.7%. Twenty-four strains and 13 strains were classified the order Bacillales and Lactobacillales in the class Bacilli, respectively. In the order Bacillales, there were nine species in the genus Bacillus, seven species in the genus Paenibacillus, and the remaining eight species in the genera Domibacillus, Halobacillus, Virgibacillus, Lysinibacillus, Paenisporosarcina, Planococcus, Savagea, and Staphylococcus. In the order Lactobacillales, there were four species in the genus Lactobacillus, three species in the genus Leuconostoc, three species in the genus Lactococcus, and the remaining three species in the genera Aerococcus, Enterococcus, and Streptococcus. One species was related to the genus Deinococcus of the order Deinococcales. Most of the isolated strains were Gram-stain-positive, but some were Gram-stain-variable or Gram-stain-negative. Cells were rod or cocci-shaped. Based on the results of 16S rRNA analysis, we report 38 strains as previously unrecorded species to Korea, and the basic characteristics of strains are described herein.
The author observed the effects of the cobalt-60 irradiation on the amelogenesis and dentinogenesis of the albino rat fetuses by means of histological and histochemical methods. Females in oestrus were mated overnight and examined the next morning for evidence of copulation. The lower left abdomen of mothers were exposed to cobalt-60 irradiation on the 10th day of gestation, l00R 200R and 300R respectively. The fetuses were removed from the mothers on the 18th day of gestation. The employed histochemical methods were PAS reaction, colloidal iron reaction, aldehyde fuchsin stain, α-amino acid reaction, -SH radical reaction and methyl- green pyronin stain. The results were as follows; 1. The group irradiated by l00R made no histological differences in comparison with the control group. 2. Increasing the irradiation to 200R, abnormal dentin formation occured, and resulted in enamel hypoplasia and in atrophy and necrosis of odontoblasts. In dentinal papilla, the dilation and the degeneration of the blood vessels, excessive reticular atrophy and osteodentin were revealed. 3. With the more irradiation (200R-300R), the positive material of PAS, α-amino acid and aldehyde fuchsin tended to decrease in the ameloblast and the odontoblast. No significant changes appeared in DNA, the stainability of methylgreen pyronin.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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