Extended use of porcine blood in food ingredients depends on the decolorization of red blood cell concentrates and the modification of its functional properties. The purpose of this study is to compare the relative effect of cation ion exchanger for decolorization of porcine red blood globin. The globin extract is freeze-dried for determination of various functional properties, such as solubility, emulsion capability and foaming ability. Since the isoelectric point of blood globin is located at pH 6.8, which is the neutral pH ranges (6-8), so its functionalities are inferior around these pHs. This weakness has been the main reason, which limit the extended use of blood globin in food industry. Acetylation and succinylation of blood globin can be an alternative way to improve its functionalities. These results may provide new information to understand the decolorization mode by cation ion exchanger for the blood globin. With chemical, the functionalities of blood globin could be obviously improved. The above findings could enable food industry to extend the use of blood globin as a food ingredient.
This study was compared microbiological safety with gamma-irradiated porcine tendon and skin, as materials for the development of xenografts to regenerate damaged tissues and protect secondary contamination. The porcine tendon and skin were gamma-irradiated after inoculation of bacteria and virus to evaluate irradiation sensitivity of microorganisms. The result showed that the porcine tendon and skin were not different on the sensitivity of microorganisms by gamma irradiation. Bacteria inoculated in the porcine tendon and skin were confirmed that E. coli was the $D_{10}$ values of $0.32{\pm}0.082$ and $0.25{\pm}0.1kGy$ on tendon and skin, and B. subtilis was $4.00{\pm}0.312$ and $3.88{\pm}0.3kGy$ on gamma irradiation, respectively. Moreover, Virus inoculated in the porcine tendon and skin was observed that poliovirus (PV) was $6.26{\pm}0.332$ and $6.88{\pm}0.3kGy$, and porcine parvovirus (PPV) was $1.75{\pm}0.131$ and $1.73{\pm}0.2kGy$ and bovine viral diarrhoea virus (BVDV) was $3.70{\pm}0.212$ and $3.81{\pm}0.2kGy$ on gamma irradiation, respectively. Virus showed higher resistance compared to bacteria on gamma irradiation, but was not detected CPE (cytopathic effect) by virus both tendon and skin at 25 kGy, a standard dose recommended from IAEA for sterilization of medical products. Therefore, These results were considered that gamma irradiation could control effectively bacteria and virus to develop safe porcine xenograft, and apply same irradiation doses to all tissues including tendon and skin of porcine.
This study was to determine the microbiological safety and tensile strength of gammairradiated porcine tendon for the development of safe xenografts. Escherichia coli and Bacillus subtilis were used as model pathogens and inoculated as $10^6{\sim}10^7log$ colonies forming unit $(CFU)g^{-1}$. As model virus from porcine, porcine parvovirus (PPV), bovine viral diarrhoea virus (BVDV) and poliovirus were inoculated as $10^5{\sim}10^6$ tissue culture infectious dose $(TCID)_{50}g^{-1}$ into porcine skin. The $D_{10}$ value of E. coli and B. subtilis was measured as $0.32{\pm}0.082kGy$ and $4.0{\pm}0.312kGy$, respectively. Additionally, the $D_{10}$ values of PPV, BVDV and poliovirus were also shown as $1.75{\pm}0.131kGy$, $3.70{\pm}0.212kGy$ and $6.26{\pm}0.332kGy$, respectively. Gamma irradiation decreased the tensile strength of porcine tendon. Results indicate that microbiological safety of porcine tendon can be improved significantly by gamma irradiation. However, further studies are needed to improve the tensile strength of gamma-irradiated porcine tendon.
Ochratoxin A (OTA) is a well-known mycotoxin that causes disease through the ingestion of contaminated food or feed, for example, in the porcine industry. The intestinal epithelium acts as the first barrier against food contamination. We conducted a study on the exposure of the porcine intestinal epithelium to OTA. We used the intestinal porcine epithelial cell line IPEC-J2 as an in vitro model to evaluate the altered molecular mechanisms following OTA exposure. Gene expression profiling revealed that OTA upregulated 782 genes and downregulated 896, totalling 1678 differentially expressed genes. Furthermore, immunofluorescence, quantitative real-time polymerase chain reaction, and western blotting confirmed that OTA damages the tight junction protein ZO-1. Moreover, OTA activated the expression of inflammatory genes (IL-6, IL-8, IL-10, NF-kB, TLR4, and TNF-α). In summary, this study confirmed that OTA alters various molecular mechanisms and has several adverse effects on IPEC-J2 cells.
This study was conducted to determine the prevention effect of poly-gamma-glutamic acid (${\gamma}-PGA$) on tissue damage induced by gamma irradiation for development of xenograft. Porcine tendons were treated at various doses of ${\gamma}-PGA$ (0.1, 0.5, 1 and 5%) and then gamma-irradiated (30 kGy). Prevention effects on tissue damage were measured as the result of tensile strength, hydroxyproline contents and viscosity of ${\gamma}-PGA$. Tensile strength was remarkably decrease in gamma-irradiated porcine ligament, but increased by ${\gamma}-PGA$ treated one. Among the ${\gamma}-PGA$ treatment doses, 1% treated group showed the highest values of tensile strength compared to non-treated group. Hydroxyproline contents was significantly increased by gamma irradiation, but decreased by the ${\gamma}-PGA$ treatment. Particularly, 1 and 5% ${\gamma}-PGA$ treated group were exhibited lower values of hydroxyproline contents than other group. In the result of viscosity, gamma-irradiated ${\gamma}-PGA$ (1%) was remarkably increased. Base on the results, it demonstrated that gamma irradiation induces severe alteration of mechanical property and collagen contents on porcine ligament, but ${\gamma}-PGA$ can effectively prevent these tissue damage.
In this study, we used more reliable experimental materials and methods to detect the effects of osteopontin (OPN) on boar sperm in vitro capacitation, acrosome reaction, and fertilization efficiency. We reorganized and obtained the OPN protein of the porcine source. Immunofluorescence and Western blot show the localization and expression of the OPN protein before and after sperm capacitation. To determine whether OPN can affect sperm during sperm capacitation, we examined cyclic adenosine monophosphate (cAMP) concentrations after sperm capacitation, and the results showed that OPN significantly increased the cAMP concentration in sperm (p < 0.05). Flow cytometry showed that 0.1 ㎍/mL OPN-treated sperm had better acrosome reaction ability. In vitro fertilization (IVF) showed that 0.1 ㎍/mL OPN significantly increased the rate of embryo division. In conclusion, this study found that 0.1 ㎍/mL porcine OPN protein can significantly improve porcine capacitated sperm motility, cAMP concentration after capacitation sperm, acrosome reaction ability, and embryo division during IVF and provides new clues to explore the mechanism of OPN's function on sperm.
Technologies on preimplantation porcine embryos have been developed quickly and significantly. Successful development of systems for culture of porcine zygotes to the blastocyst stage has made it possible to utilize follicular oocytes for in vitro production of embryos and thus stimulated research on various embryo technologies. Recent technological development of embryo cryopreservation, separation of X- and Y-bearing spermatozoa and non-surgical embryo transfer has also made it easy to utilize in vivo- and in vitro-produced embryos for artificial manipulation to produce clones and transgenic pigs. Further progress in overcoming various problems associated with each embryo technology will result in acceptable efficiency to utilize porcine embryos with a high or increased quality. Combining these technologies will accelerate further expansion of the swine industry not only for meat production but also for the production of therapeutic recombinant proteins and xonografts.
Regulator of G protein signaling 16 (RGS16) is known to be associated with porcine circovirus type 2 (PCV2). PCV2 associated disease (PCVAD) is a serious problem in the swine industry. The representative symptoms of PCVAD are high viral titer proliferation and decreased average daily gain. In this study, we identified single nucleotide polymorphisms (SNPs) in the RGS16 region, including the upstream region. Of the 22 identified SNPs, rs332913874, rs326071195, and rs318298586 were genotyped in 142 Yorkshire pigs. These SNPs were significantly associated with the PCV2 viral load. Moreover, the haplotype combination was also related to the PCV2 viral load. The haplotype and diplotype analysis also had a significant difference with the PCV2 viral load. Taken together, our results suggest that RGS16 SNPs considerably affect the PCV2 viral load.
Porcine transmissible gastroenteritis (TGE) has been a significant cause of economic losses in pig farming industry since 1950s. Although transmissible gastroenteritis virus (TGEV) has declined in recent years, it should not be excluded because of its characteristics; the frequency of gene mutation, the mortality in piglets, and the possibility for sudden incidence. Therefore, the herd-level monitoring of the virus is important to prevent further circulation of TGE. The aim of this study is to develop a large-scale sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) with high specificity to rapidly detect TGEV in feces by using monoclonal antibodies (Mabs). The TGEV specific Mabs were produced in hybridoma cells. Among the Mabs belonged to the IgG class developed by this study, the final selected 8H6, 1B7, 4G3, and 1F8 were identified to have the neutralization ability against TGEV. The sandwich ELISA was established using 8H6 as a reporter antibody and 1B7 and the reported 5C8 as a capture antibody. The developed sandwich ELISA was able to distinguish TGEV from other pathogenic diarrheal agents (porcine rotavirus, porcine reovirus, porcine epidemic diarrhea virus (PEDV), E. coli, and C. perfringens) in tissue culture as well as fecal samples. And the detection rate of TGEV in feces was 80% compared with RT-PCR. The results suggested that the developed sandwich ELISA may be useful in the herd-level monitoring for effective preventive measures due to the early diagnosis of TGEV using a large amount of samples.
In this presented study, we established a method for diagnosis of porcine epidemic diarrhea(PED) by in situ hybridization(ISH), which made distinct progress in diagnostic pathology. We also carried out the retrospective diagnosis through ISH to assume the exact time of the first outbreak and incidence of PED in Korea. The outbreak of PED in Korea reported in 1992. However, since the end of 1980's, some researches of pig-industry have already suspected the outbreak of PED, not transmissible gastroenteritis(TGE). In this experiment, we performed the ISH using 80 formalin-fixed and paraffin-embedded tissues of porcine intestine which were requests for pathological diagnosis from 63 farms whose primary sign was diarrhea from 1984 to 1991. We prepared biotinylated cDNA probe(492base pairs) for ISH by nick translation method and carried out the ISH, using $Microprobe^{TM}$ capillary action system(Fisher $Biotech^R$). We detected PED virus in intestinal mucosa of 2 cases in 1992, 1 case in 1988, and 1 case in 1987. As a result, we assume that the outbreak of PED in Korea have already started since 1987.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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