Ipriflavone (IP), a non-hormonal isoflavone derivative, has been shown to interfere with bone remodeling by inhibiting bone resorption and stimulating bone formation. IP consistently increased the amount of Ca incorporated into the cell layer by mesenchymal stem cells (MSCs). In this study, we developed the novel IP loaded poly(L-lactide-co-glycolide) (PLGA) scaffolds for the possibility of the application of the tissue engineered bone. IP/PLGA scaffo1ds were prepared by solvent casting/salt leaching method and were characterized by porosimeter, scanning electron microscopy, determination of residual salt amount, differential scanning calorimetry, and X-ray diffractometer, respectively. IP/PLGA scaffolds were implanted into the back of athymic nude mouse to observe the effect of IP on the osteoinduction compared with control PLGA scaffo1ds. Thin sections were cut from paraffin embedded tissues and histological sections were stained H&E, von Kossa, and immunohistochemical staining for Type I collagen and osteocalcin. It can be observed that the porosity was above 91.7% and the pore size was above 101 $\mu\textrm{m}$. Control scaffo1d and IP/PLGA scaffo1ds of 50% IP were implanted on the back of athymic nude mouse to observe the effect of IP on the induction of cells proliferation for 9 weeks. The evidence of calcification, osteoblast, and osteoid from the undifferentiated stem cells in the subcutaneous sites and other soft connective tissue sites having a preponderance of stem cells has been observed. From these results, it seems that IP plays an important role for bone induction in IP/PLCA scaffolds.
In this study, biodegradable superporous hydrogels(SPHs) with fast swelling and superabsorbent properties were prepared using biodegradable crosslinkers and their physicochemical properties were characterized. A biodegradable crosslinker (PLA-PEG-PLA DA) was synthesized by a ring opening polymerization of D,L-lactide (LA) using hydrophilic poly(ethylene glycol) as a macroinitiator, followed by diacrylation of the end groups for the introduction of polymerizable vinyl groups. Various kinds of hydrogels with different chemical compositions were prepared and characterized in terms of swelling ratio, swelling kinetics, and biodegradation properties. The synthetic results were confirmed by $^1H$-NMR, FT-IR and GPC measurements, and the porous structures of the prepared SPHs and their porosities were identified by a scanning electron microscope and mercury porosimetry, respectively. The physicochemical properties of SPHs could be controlled by varying their chemical compositions and their cytotoxicity were found to be very low by MTT assay.
STATEMENT OF PROBLEM: A biochemical approach for surface modification has offered an alternative for physicochemical and morphological methods to obtain desirable bone-implant interfaces. PURPOSE: The purpose of the present study was to investigate cell responses to poly (D,L-lactide-co-glycolide) (PLGA)/$1{\alpha}$,25-(OH)$_2D_3$ coating with reference to cellular proliferation and differentiation in vitro. MATERIAL AND METHODS: 96 titanium discs were fabricated and divided into four groups. Group 1 was anodized under 300 V as control. Group 2, 3 and 4 were anodized then coated with 3 ml PLGA/$1{\alpha}$,25-(OH)$_2D_3$ solutions. Amount of the solutions were 2 ul, 20 ul and 200ul respectively. The osteoblast-like Human Osteogenic Sarcoma (HOS) cells were seeded and cultured for 1, 3 and 7 days. MTSbased cell proliferation assay and ALPase activity test were carried out. RESULTS: PLGA nanoparticles were observed as fine, smooth and round and HOS cells attached to the anodized surfaces through strand-like and sheet-like filopodia. After 3 days of culture, the dendritic filopodia were exaggerated and sheet-like cytoplasmic projections covered the coated titanium surfaces. After 3 days of culture, all of the groups showed increased cellular proliferation and the lowest proliferation rate was measured on group 2. Higher amount of incorporated $1{\alpha}$,25-(OH)$_2D_3$ (Group 3 and 4) improved cellular proliferation but the differences were not significant statistically (P > .05). But they increased the rate of ALP activities than the control group at day 3 (P < .05). CONCLUSION: Biodegradable PLGA nanoparticles incorporated with vitamin D metabolite positively affected proliferation and differentiation of cells on the anodized titanium surface.
Gilson Khang;Park, Chong-Soo;John M. Rhee;Lee, Sang-Jin;Lee, Young-Moo;Park, Myoung-Kyu;Lee, Hai-Bang;Lee, Ilwoo
Macromolecular Research
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v.9
no.5
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pp.267-276
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2001
In order to endow with new bioactive functionality from demineralized bone particle (DBP) as natural source to poly(L-lactide) (PLA) synthetic biodegradable polymer, porous DBP/PLA as natural/synthetic composite scaffolds were prepared and compared by means of the emulsion freeze drying and solvent casting/salt leaching methods for the possibility of the application of tissue engineered bone and cartilage. For the emulsion freeze drying method, it was observed that the pore size decreased in the order of 79$\mu\textrm{m}$ (PLA control) > 47$\mu\textrm{m}$ (20% of DBP) > 23 $\mu\textrm{m}$ (40% of DBP) > 15$\mu\textrm{m}$ (80% of DBP). Porosities as well as specific pore areas decreased with increasing the amount of DBR. It can be explained that DBP acts like emulsifier resulting in stabilizing water droplet in emulsion. For the solvent casting/salt leaching method, a uniform distribution of well interconnected pores from the surface to core region were observed the pore size of 80 ∼70 $\mu\textrm{m}$ independent with DBP amount. Porosities as well as specific pore areas also were almost same. For pore size distribution by the mercury intrusion porosimeter analysis between the two methods, the pore size distribution of the emulsion freeze drying method was broader than that of the solvent casting/salt leaching method due to the mechanism of emulsion formation. Scaffolds of PLA alone, DBP/PLA of 40 and 80%, and DBP powder were implanted on the back of athymic nude mouse to observe the effect of DBP on the induction of cells proliferation by hematoxylin and eosin staining for 8 weeks. It was observed that the effect of DBP/PLA scaffolds on bone induction are stronger than PLA scaffolds, even though the bone induction effect of DBP/PLA scaffold might be lowered than only DBP powder, that is to say, in the order of DBP only > DBP/PLA scaffolds of 40 and 80% DBP > PLA scaffolds only for osteoinduction activity. In conclusion, it seems that DBP plays an important role for bone induction in DBP/PLA scaffolds for the application of tissue engineering area.
Kim, Cho-Min;Kim, Soon-Hee;Oh, A-Young;Kim, Geun-Ah;Lee, Il-Woo;Rhee, John-M.;Khang, Gil-Son
Polymer(Korea)
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v.32
no.6
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pp.529-536
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2008
We manufactured poly (L-lactide-co-glycolide) (PLGA) scaffolds impregnated demineralized bone particle (DBP) and hyaluronic acid (HA) by ice-particle leaching method and tested their ability of sustained release of brain derived neurotrophic factor (BDNF). BDNF (50 and 200 ng) mixed with PLGA, DBP/PLGA, HA/PLGA and DBP/HA/PLGA scaffold. The release profiles of BDNF from BDNF loaded scaffolds were assayed using ELISA. Morphological changes of scaffolds by BDNF release were also observed by SEM. BDNF stably and sustainedly released from DBP/HNPLGA than from PLGA and DBP/PLGA scaffolds. DBP/HA/PLGA scaffolds showed the great structural changes, which demonstrated BDNF release amount from DBP/HA/PLGA scaffolds were highest in all groups. We suggest that BDNF loaded DBP/HNPLGA scaffold would be very useful for nerve regeneration.
Proceedings of the Polymer Society of Korea Conference
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2006.10a
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pp.263-263
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2006
Poly (ethylene glycol)(PEG) - Poly (${\varepsilon}-caprolactone(CL)$) - Poly (D,L lactide(LA) (PCLA-PEG-PCLA) was synthesized by ring-opening polymerization to form temperature sensitive hydrogel triblock copolymer. The triblock copolymer was acrylated by acryloyl chloride. ${\beta}-amino$ ester was used as a pH sensitive moiety, in this study ${\beta}$- amino ester obtained from 1,4-butandiol diacrylate, and 4, 4' trimethylene dipiperidine, it have pKb around 6.6. pH/temperature sensitive penta-block copolymer (PAE-PCL-PEG-PCL-PAE) was synthesized by addition polymerization from acrylated triblock copolymer, 1,4-butandiol diacrylate, and 4, 4' trimethylene dipiperidine. Their physicochemical properties of triblock and penta-block copolymers were characterized by $^1H-NMR$ spectroscopy and gel permeation spectroscopy. Sol-gel phase transition behavior of PAE-PCL-PEG-PCL-PAE block copolymers were investigated by remains stable method. Aqueous media of the penta-block copolymer (at 20 wt%) changed from a sol phase at pH 6.4 and $10^{\circ}C$ to a gel phase at pH 7.4 and $37^{\circ}C$. The sol-gel transition properties of these block copolymers are influenced by the hydrophobic/hydrophilic balance of the copolymers, block length, hydrophobicity, stereo-regularity of the hydrophobic of the block copolymer, and the ionization of the pH function groups in the copolymer depended on the changing of environmental pH, respectively. The degradation and the stabilization at pH 7.4 and $37^{\circ}C$, and the stabilization at pH 6.4 and $10^{\circ}C,\;5^{\circ}C,\;0^{\circ}C$, of the gel were determined. The results of toxicity experiment show that the penta block copolymer can be used for injection drug delivery system. The sol?gel transition of this block copolymer also study by in vitro test ($200{\mu}l$ aqueous solution at 20wt% polymer was injected to mouse). Insulin loading and releasing by in vitro test was investigated, the results showed that insulin can loading easily into polymer matrix and release time is around 14-16days. The PAE-PCL-PEG-PCL-PAE can be used as biomaterial for drug, protein, gene loading and delivery.
Implantable biodegradable wafers were prepared with pamidronate -loaded poly (L-lactide-co-glycolide) (PLGA, 75 : 25 mole ratio by lactide to glycolide, molecular weight : 20000 and 90000 g/mole) by direct compression method for the sustained release of pamidronate to investigate the possibility for the treatment of bone resorption. Pamidronate-loaded PLGA powders were prepared by means of physical mixing and spray drying with the control of formulation factors and characterized by scanning electron microscope and X-ray diffractometer. The pamidronate-loaded PLGA powders fabricated into wafers by direct compression under the constant pressure and time at room temperature. These wafers were also observed for their structural characteristic, release pattern, and degradation pattern. The release rate of pamidronate increased with increasing their initial loading ratio as well as increasing wafer thickness. The molecular weight of PLGA affects the release pattern : the higher molecular weight of PLGA, the faster release rate. It can be explained that the higher viscosity of high molecular PLGA solution at same concentration tends to aggregate PLGA and pamidronate resulting in unstable pharmaceutical dosage form. This system had advantages in terms of simplicity in design and obviousness of drug release rate and nay be useful as an implantable dosage form for the treatment of aural cholesteatoma.
Background: Polymeric nanoparticles are attractive materials that have been widely used in medicine for drug delivery, with therapeutic applications. In our study, polymeric nanoparticles and the anticancer drug, chrysin, were encapsulated into poly (D, L-lactic-co-glycolic acid) poly (ethylene glycol) (PLGA-PEG) nanoparticles for local treatment. Materials and Methods: PLGA: PEG triblock copolymers were synthesized by ring-opening polymerization of D, L-lactide and glycolide as an initiator. The bulk properties of these copolymers were characterized using 1H nuclear magnetic resonance spectroscopy and Fourier transform infrared spectroscopy. In addition, the resulting particles were characterized by scanning electron microscopy. Results: The chrysin encapsulation efficiency achieved for polymeric nanoparticles was 70% control of release kinetics. The cytotoxicity of different concentration of pure chrysin and chrysin loaded in PLGA-PEG ($5-640{\mu}M$) on T47-D breast cancer cell line was analyzed by MTT-assay. Conclusions: There is potential for use of these nanoparticles for biomedical applications. Future work should include in vivo investigation of the targeting capability and effectiveness of these nanoparticles in the treatment of breast cancer.
Linear and star-shaped, poly(lactic acid) (PLA) stereo-block copolymers were synthesized by sequential polymerization of DL-lactic acid and L-lactide in the presence of diol or polyol compounds. The molecular weight of block copolymers could be controlled to some extent by the variation of alcohol content. These block copolymers had relatively narrow molecular weight distributions. The glass transition temperature and melting temperature of block copolymers appeared at around 5$0^{\circ}C$ and 100~14$0^{\circ}C$, respectively. The block copolymers were found to crystallize even at the high D-stereoisomer concentration of 35 mol%, in contrast to the amorphous nature of the random copolymer with similar composition. Also we could observe the crystallinity of PLA stereo-block copolymers varying with annealing temperature and time.
Poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) were grafted to both ends of Pluronic$^{(R)}$ F68 ($(EO)_{75}(PO)_{30}(EO)_{75}$) triblock copolymer to produce poly{(lactic acid)$_m$-co-(glycolic acid)$_n$}-b-poly(ethylene oxide)$_{75}$-b-poly(propylene oxide)$_{30}$-b-poly(ethylene oxide)$_{75}$-b-poly{(lactic acid)$_m$-co-(glycolic acid)$_n$} (PLGA-F68-PLGA) pentablock copolymers. Molecular weights of PLGA blocks were controlled and five kinds of pentablock copolymers with different PLGA block lengths were synthesized using in-situ ring-opening polymerization of D,L-lactide and glycolide with tin(II) 2-ethylhexanoate ($Sn(Oct)_2$) catalyst. PLGA-F68-PLGA pentablock copolymers were characterized by $^1H$- and $^{13}C$-NMR, GPC, and TGA. The numbers (2m, 2n) of repeating units for lactic acid and glycolic acid inside PLGA segments were obtained as (48, 17), (90, 23), (125, 40), (180, 59), and (246, 64), with $^1H$-NMR measurement. From NMR data, the resultant molecular weights were determined in the range of 12,700-29,700, which were similar to those obtained from GPC. Polydispersity index was increased in the range of 1.32-1.91 as the content of PLGA blocks increased. TG and DTG thermograms showed discrete degradation traces for PLGA and F68 blocks, which indicate the weight fractions of PLGA blocks in pentablock copolymers can be calculated by TG profile and it is possible to remove PLGA block selectively. Hydrodynamic radius and radius of gyration of pentablock copolymer micelle were obtained in the range of 46-68 nm and 31-49 nm, respectively, in very dilute (i.e. 0.005 wt %) aqueous solution of THF:$H_2O$ = 10:90 by volume at $25^{\circ}C$.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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