• 제목/요약/키워드: Pneumococcal surface protein A (PspA)

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국내 임상 분리주 Streptococcus pneumoniae KNIH1156으로부터 PspA 단백 항원의 정제 및 면역원성 확인 (The Purification and Immunogenicity of Pneumococcal Surface Protein (PspA) from Invasive Streptococcus pneumoniae KNIH1156 Isolated in Korea)

  • 정경석;배송미
    • 미생물학회지
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    • 제38권1호
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    • pp.38-44
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    • 2002

  • 국내 분리 침습성 균주중선별된 S. pneumoniae KNIH1156 (type 19F)으로부터 페렴구균의 병원성 인자이며 항원학적으로 다양한 표면단백항원인 pneumococcal surface protein A (PspA)를 분리${\cdot}$정제하였다. 폐렴구균을 CDM-ET배지에서 배양하게 되면 배지내로 PspA가 방출된다는 점과 PspA가 인간의 lactoferrin에 특이적으로 결합한다는 사실을 이용하여 CDM-ET 배지에서 S. pneumoniae KNIH1156 을 배양한 후 배양액을 농축하여 lactoferrinaffinity chromatography에 통과시켜 PspA를 분리, 정제하였다. 정제 후 anti-PspA antiserum으로 PspA를 확인하여 순수분리, 정제되었음을 확인하였으며 또한 인간의 lactoferrin과의 결합능력을 유지하고 있음을 확인하였다. 순수하게 분리하여 정제된 PspA의 면역원성을 확인하기 위하여 ICR mice에 욕강주사하였을 때 $LD_{50}$ 가 $1{\times}10^{7.5}$ CFU/ml께서 $1{\times}10^{10}$ CFU/ml로 약 500배 중가함을 관찰하였다. 따라서 본 실험에서S. pneumoniae KNIH1156 으로부터 분리${\cdot}$ 정제한 PspA가 면역원성과 방어능을 가지고 있음을 확인할 수 있었다.

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한국인에서 Streptococcus pneumoniae 분리주의 폐구균 표면 단백 A (Pneumococcal Surface Protein A of Streptococcus pneumoniae Isolates from Koreans)

  • 김경호
    • Clinical and Experimental Pediatrics
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    • 제48권11호
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    • pp.1206-1211
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    • 2005

  • 목 적 : 현재 연구 개발되고 있는 PspA에 근거한 폐구균 단백 백신은 기존의 백신과 달리 여러 종류의 혈청형에 대해 동시에 광범위한 방어 면역을 유도할 가능성이 있다. 동물 실험에서 PspA는 폐구균 보균과 호흡기 감염 뿐 아니라 패혈증에 대해서도 방어 면역을 형성함이 보고되었다. 본 연구는 한국 소아와 어른에게서 분리된 폐구균에서 PspA 백신에 포함된 PspA family인 family 1과 family 2의 분포를 알기 위해 시행되었다. 방 법 : 총 89주의 폐구균을 대상으로 항혈청을 이용하여 슬라이드 응집 방법으로 폐구균 피막의 혈청형을 분류하였다. 또한 PCR을 이용하여 family 1과 family 2의 시발체를 사용하여 분리된 폐구균의 PspA family를 정하였다. 결 과 : 총 89주의 폐구균 분리주에서 17 종류의 폐구균 혈청형이 분류되었다. PspA 종류는 79주(88.8%)에서 결정되었는데 20주(22.5%)가 family 1, 59주(66.3%)가 family 2이었다. 아홉주(10.1%)에서 family 1과 2에 모두 양성 반응을 보였으므로 family 1과 2 단백을 포함하는 PspA 백신의 가능한 방어 범위는 98.9%이었다. 각 PspA family들은 균이 분리된 사람의 나이, 분리된 곳, 혹은 페니실린에 대한 감수성 등과 의미 있는 관련성이 없었으나 피막 혈청형에 따라서는 의미 있는 차이를 보였다. 결 론 : 본 연구에서 분리된 폐구균 분리주의 98.9%가 PspA family 1과 2에 속하였으므로 이를 포함한 백신은 폐구균에 대해 혈청형과 관련 없이 좀 더 광범위한 효과를 보일 것으로 추정된다. 향후 좀더 다양하고 많은 폐구균 분리주를 대상으로 PspA family의 연구가 이루어진다면 PspA 백신의 개발과 적용에 많은 도움이 될 것으로 생각된다.

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Detection of PspA by Interdigitated Nanogap Devices

  • Park, Jimin;Park, Dae Keun;Lee, Cho Yeon;Kang, Aeyeon;Oh, Jihye;Kim, Gyuhee;Lee, Sangho;Yun, Wan Soo
    • 한국진공학회:학술대회논문집
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    • 한국진공학회 2013년도 제45회 하계 정기학술대회 초록집
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    • pp.268.2-268.2
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    • 2013

  • Nanogap interdigitated electrodes (NIDEs) can serve as an alternative platform for the biomolecular detection [1]. In this work, the NIDEs were adopted in a simple and sensitive detection of Pneumococcal surface protein A (PspA). The NIDEs were fabricated by the combination of photo and chemical lithography. Photolithographically-defined initial gap of about 200 nm was narrowed down to a few tens of nanometers by surface-initiated growth of the initial electrodes (chemical lithography) [2]. Bare silicon oxide surface between the electrodes was chemically modified to immobilize capturing antibodies and, after exposure to the samples, the device was immersed in a solution containing the probe-antibody-conjugated Au nanoparticles (Au NPs). The conductance change accompanied with the Au NP immobilization was interpreted as the existence of PspA. Detection limit of the measurements and further improvement of the detection efficiency were discussed with the results from I-V analysis, scanning electron microscopy, and atomic force microscopy.

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