• 미생물학회지
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• 제38권1호
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• pp.38-44
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• 2002

국내 분리 침습성 균주중선별된 S. pneumoniae KNIH1156 (type 19F)으로부터 페렴구균의 병원성 인자이며 항원학적으로 다양한 표면단백항원인 pneumococcal surface protein A (PspA)를 분리${\cdot}$정제하였다. 폐렴구균을 CDM-ET배지에서 배양하게 되면 배지내로 PspA가 방출된다는 점과 PspA가 인간의 lactoferrin에 특이적으로 결합한다는 사실을 이용하여 CDM-ET 배지에서 S. pneumoniae KNIH1156 을 배양한 후 배양액을 농축하여 lactoferrinaffinity chromatography에 통과시켜 PspA를 분리, 정제하였다. 정제 후 anti-PspA antiserum으로 PspA를 확인하여 순수분리, 정제되었음을 확인하였으며 또한 인간의 lactoferrin과의 결합능력을 유지하고 있음을 확인하였다. 순수하게 분리하여 정제된 PspA의 면역원성을 확인하기 위하여 ICR mice에 욕강주사하였을 때 $LD_{50}$ 가 $1{\times}10^{7.5}$ CFU/ml께서 $1{\times}10^{10}$ CFU/ml로 약 500배 중가함을 관찰하였다. 따라서 본 실험에서S. pneumoniae KNIH1156 으로부터 분리${\cdot}$ 정제한 PspA가 면역원성과 방어능을 가지고 있음을 확인할 수 있었다.

• 약학회지
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• 제48권6호
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• pp.345-351
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• 2004

ln the present work to determine effect of a Streptococcus pneumoniae conjugate vaccine, S.pneumoniae capsule attached to the surface protein (JY-Pol) was ex amined. This JY-Pol contained approximately 92% and 6% carbohydrate and protein, respectively. Gel electrophoresis revealed the presence of the surface protein in the JY-Pol. By the double immunodiffusion and isotyping ELISA analyses, administration of JY-Pol that was adsorbed to alum adjuvant (JY-Pol/Alum) into mice induced IgM, IgG, and IgA specific for the S.pneumoniae capsule. The ATCC capsular polysaccharide adsorbed to alum (ATCC-Pol/Alum) provoked only IgM in mice. In survival tests, mice that were immunized with the JY-Pol/Alum before intravenous challenge with live S.pneumoniae survived entire period of 46 day-observation, whereas all mice that received ATCC-Pol/Alum or only diluent instead of the vaccination died within 5 and 12 days, respectively. Results from footpad-edema test showed that JY-Pol/Alum formula provoked the cellular immunity as determined by swelling of the mouse footpad. These data indicate that the naturally conjugated JY- Pol enhances resistance of mice against disseminated pneumococcal disease due to S.pneumoniae by both humoral and cellular immune responses.

• Clinical and Experimental Pediatrics
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• 제48권11호
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• pp.1206-1211
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• 2005

목 적 : 현재 연구 개발되고 있는 PspA에 근거한 폐구균 단백 백신은 기존의 백신과 달리 여러 종류의 혈청형에 대해 동시에 광범위한 방어 면역을 유도할 가능성이 있다. 동물 실험에서 PspA는 폐구균 보균과 호흡기 감염 뿐 아니라 패혈증에 대해서도 방어 면역을 형성함이 보고되었다. 본 연구는 한국 소아와 어른에게서 분리된 폐구균에서 PspA 백신에 포함된 PspA family인 family 1과 family 2의 분포를 알기 위해 시행되었다. 방 법 : 총 89주의 폐구균을 대상으로 항혈청을 이용하여 슬라이드 응집 방법으로 폐구균 피막의 혈청형을 분류하였다. 또한 PCR을 이용하여 family 1과 family 2의 시발체를 사용하여 분리된 폐구균의 PspA family를 정하였다. 결 과 : 총 89주의 폐구균 분리주에서 17 종류의 폐구균 혈청형이 분류되었다. PspA 종류는 79주(88.8%)에서 결정되었는데 20주(22.5%)가 family 1, 59주(66.3%)가 family 2이었다. 아홉주(10.1%)에서 family 1과 2에 모두 양성 반응을 보였으므로 family 1과 2 단백을 포함하는 PspA 백신의 가능한 방어 범위는 98.9%이었다. 각 PspA family들은 균이 분리된 사람의 나이, 분리된 곳, 혹은 페니실린에 대한 감수성 등과 의미 있는 관련성이 없었으나 피막 혈청형에 따라서는 의미 있는 차이를 보였다. 결 론 : 본 연구에서 분리된 폐구균 분리주의 98.9%가 PspA family 1과 2에 속하였으므로 이를 포함한 백신은 폐구균에 대해 혈청형과 관련 없이 좀 더 광범위한 효과를 보일 것으로 추정된다. 향후 좀더 다양하고 많은 폐구균 분리주를 대상으로 PspA family의 연구가 이루어진다면 PspA 백신의 개발과 적용에 많은 도움이 될 것으로 생각된다.

• 약학회지
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• 제48권6호
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• pp.369-373
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• 2004

We previously reported that Streptococcus pneumoniae capsule attached to the surface protein (JY-Pol) was protective to systemic pneumococcal infection. The JY -Pol antigen induced IgM, IgG, and IgA in mice and provoked cell-mediated immunity. In this current study, we investigated the effect of anti JY-Pol antiserun and monoclonal antibody C2 (Mab C2) specific for the JY-Pol antigen against the pneumococcal disease. Mice that were given the antiserum survived longer than mice that received antiserum pre-absorbed with S.pneumoniae cells or DPBS as a negative control. Heat-treated anti JY-Pol antiserum resulted in survival rates similar to intact fresh JY-Pol antiserum. Mab C2 isolated from JY-Pol-immunized mice also enhanced resistance of naive mice against the pneumococcal diseaser. This protection by Mab C2 appeared to be mediated by opsonization as determined in a RAW 264.7 monocyte/macrophage cell line. Epitope analysis showed that Mab C2 epitope consisted of glucuronic acid and glucose that blocked the interaction of JY-Pol to the C2. Taken together, these data indicate that the antiserum induced by the JY-Pol, a naturally pneumococcal conjugate formula, mediated the protection by passive transfer, which was confirmed by protective effect of Mab C2.

• 한국진공학회:학술대회논문집
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• 한국진공학회 2013년도 제45회 하계 정기학술대회 초록집
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• pp.268.2-268.2
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• 2013

Nanogap interdigitated electrodes (NIDEs) can serve as an alternative platform for the biomolecular detection [1]. In this work, the NIDEs were adopted in a simple and sensitive detection of Pneumococcal surface protein A (PspA). The NIDEs were fabricated by the combination of photo and chemical lithography. Photolithographically-defined initial gap of about 200 nm was narrowed down to a few tens of nanometers by surface-initiated growth of the initial electrodes (chemical lithography) [2]. Bare silicon oxide surface between the electrodes was chemically modified to immobilize capturing antibodies and, after exposure to the samples, the device was immersed in a solution containing the probe-antibody-conjugated Au nanoparticles (Au NPs). The conductance change accompanied with the Au NP immobilization was interpreted as the existence of PspA. Detection limit of the measurements and further improvement of the detection efficiency were discussed with the results from I-V analysis, scanning electron microscopy, and atomic force microscopy.

• 한국동물학회:학술대회논문집
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• 한국동물학회 2000년도 한국생물과학협회 학술발표대회
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• pp.225.1-225
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• 2000

No Abstract, See Full Text

• IMMUNE NETWORK
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• 제15권1호
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• pp.9-15
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• 2015

Streptococcus pneumoniae (the pneumococcus) causes a major upper respiratory tract infection often leading to severe illness and death in the elderly. Thus, it is important to induce safe and effective mucosal immunity against this pathogen in order to prevent pnuemocaccal infection. However, this is a very difficult task to elicit protective mucosal IgA antibody responses in older individuals. A combind nasal adjuvant consisting of a plasmid encoding the Flt3 ligand cDNA (pFL) and CpG oligonucleotide (CpG ODN) successfully enhanced S. pneumoniae-specific mucosal immunity in aged mice. In particular, a pneumococcal surface protein A-based nasal vaccine given with pFL and CpG ODN induced complete protection from S. pneumoniae infection. These results show that nasal delivery of a combined DNA adjuvant offers an attractive potential for protection against the pneumococcus in the elderly.

• 한국동물학회:학술대회논문집
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• 한국동물학회 1999년도 한국생물과학협회 학술발표대회
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• pp.207.2-207
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• 1999

No Abstract, See Full Text

• 미생물학회지
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• 제39권1호
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• pp.62-65
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• 2003

폐렴구균의 혈청형 판별법인 multibead assay에서 사용하는 미세구슬 표면에 코팅한 다당류의 안정성을 높이기 위한 방안을 연구하였다. 폐렴구균 피막 다당류 6B에 bovine serum albumin (BSA)을 결합시킨 다당류-단백질 복합체로 코팅했을 경우와 기존의 방법인 다당류만으로 코팅했을 경우의 코팅 효율과 미세구슬표면에서의 6B 안정성을 비교하였다. 다당류 6B-BSA 복합체를 사용했을 경우에 코팅 효율은 약 200 배 증가하였으며, 미세구슬 표면에서의 6B 안정성도 증가하여, 한번 코팅 후 미세구슬을 사용할 수 있는 기간이 3 일에서 30 일 이상으로 연장될 수 있음을 확인하였다.