For the purpose of the methodological development to convert the food wastes into resources, we have attempted to culture the mushroom hypha, Pleurotus ostreatus. The food-wastes were mixed with distilled water, and the mixture was autoclaved to produce fluid, which was centrifugated and used as the growth media. Concentrations of the food wastes extracts were prepared with 10, 20, 30, 40, and 50%(W/V), and the initial pH were set variously with 4, 5, 6, and 7. These were cultured for 9 days at the temperature of $25^{\circ}C$ and the rotation rate of 120 rpm. The result is that the fluid form of the mushroom hypha have been grown best at the concentration of 30% and the optimal pH was 5 and 6.
To assess the effects of a proton beam on oyster mushrooms (Pleurotus ostreatus), the genetic diversity and phylogenetic relationships among strains induced by a proton beam were investigated based on a clustering analysis. According to an AFLP DNA polymorphism analysis, the induced strains were divided into four groups that coincided with the dose. When applying proton-beam radiation, the dissimilarity among the induced strains increased when increasing the dose. When using more than 400 Gy, the genetic dissimilarity of the irradiated strains was 46-58%. Thus, evaluating the induced strains using the AFLP technique was effective in revealing the mutation effect of the proton beam.
Double-stranded RNA (dsRNA) viruses and single-stranded RNA(ssRNA) viruses were detected in a strain of Pleurotus mushroom cultivated in a farm. Those fungal virsus were purified in the pH 6.0 or pH 7.2 using CsCI or Cs$_{2}$SO$_{4}$ buoyant density centrifugation. Each viral particles were not completely separated at any trials. However, mushroom bacili-form virus contains a single major nucleic acid with 0.7 Kb ssRNA, which might code for 20 Kd viral capsid protein. The dsRNAs are encapsidatred into spherical-form viruses, whereas ssRNA viral genomes are encapsidated into two different sizes of bacili-form particles. A healthy-looking mushroom also contained some spherical-form viruses with dsRNAs. Laboratory strains of Pleurotus ostreatus and a cultivated strain of P. sajor-caju did not show any viral particles. Mushrooms with specific disease symptoms. however, contained at least four different sizes of spherical-form viruses. Thus, we concluded that a bacilli-form virus case a severe disease symptoms of adnormal on mushroom development.
Electrophoretic isozyme patterns from mycelia, primordia, cap and stem of Pleurotus spp. collected in Korea were compared. Primordia, cap and stem of fruitbody showed very similar isozyme patterns but mycelial isozyme patterns were different from those of fruitbody. Isozyme patterns of malate dehydrogenase, acid phosphatase in Pleurotus ostreatus collected from different regions in Korea were similar but those of esterase, peroxidase, leucine amino peptidase and superoxide dismutase were different. Interspecific comparison of esterase isozyme patterns among Pleurotus ostreatus P. cornucopiae and, P. florida was very different and may be valuable subsidiary tool to conventional taxonomic techniques for identifying species of Pleurotus. A dendrogram by similarities of isozyme band pattern was presented.
Interspecific somatic hybrids were obtained by protoplast fusion between Pleurotus ostreatus and Pleurotus sajor-caju. The fusion products between incompatible strains did not form clamp connections. Fruiting body of the clampless fusants was induced by light-dark cycle on saw-dust-rice bran substrate in glass bottles. Out of them, seven somatic hybrids produced fruiting bodies of intermediate morphology of the two species. Light and low temperature were the initiating factors for the development of clamped hyphae from the clampless mycelial colonies. All of these basidiocarps had clamp connections. Eight fusants from the six crosses were analysed with the segregation of genetic characters by random spore isolates. In the three combinations, unexpected alleles were shown. Somatic hybrid between P188 (P. ostreatus 2-1 + P. sajor-caju 2-53) and P. florida 2-3 by triple cross produced fruiting bodies similar to those of fusant between P. ostreatus and P. florida. All the genetic charaters from the three strains were shown to segregate and recombine.
Several reversion colonies were obtained after induced transfer of the isolated nuclei from P. sapidus into protoplast of P. ostreatus$({Arg}^-)$. These colonies showed three distinct cultural characteristics, type 1 produced spontaneous segregants of both parental types, type 2 showed segregants of non parental types, and type 3 gave rise to homogeneous colonies. Isozyme patterns of esterase, malate dehydrogenase and superoxide dismutase showed substantial differences between parents and nuclei transferred strains. This observation supported that the isolated nuclei of P. sapidus were transferred into protoplast of P. ostreatus and expressed in recipient cell.
We developed and characterized 36 polymorphic microsatellite markers for the oyster mushroom (Pleurotus ostreatus). In total, 169 alleles were identified with an average of 4.7 alleles per locus. Values for observed ($H_o$) and expected ($H_E$) heterozygosities ranged from 0.027 to 0.946 and from 0.027 to 0.810, respectively. Nineteen loci deviated from Hardy-Weinberg equilibrium. Significant (P<0.05) excess heterozygosity was observed at nine loci. Linkage disequilibrium (LD) was significant (P<0.05) between pairs of locus alleles. Cluster analysis revealed that five species of genus Pleurotus made a distinct group, and the individual cultivars were grouped into major five groups from G-1 to G-5. The diverse cultivars of P. ostreatus were discriminated and the other four species revealed a different section in the UPGMA tree. These microsatellite markers proved to be very useful tools for genetic studies, including assessment of the diversity and population structure of P. ostreatus.
Seo, Kyoung-In;Jang, Kab-Yeul;Yoo, Young-Bok;Park, Soon-Young;Kim, Kwang-Ho;Kong, Won-Sik
The Korean Journal of Mycology
/
v.39
no.1
/
pp.31-38
/
2011
In this study, 81 commercial strains of Pleurotus species cultivated in South Korea were analyzed with randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) technique. Sequence characterized amplified region (SCAR) markers were developed by designing from one RAPD polymorhic band specific to Suhan strain. The SCAR primer pair 'S-OPA13-1' amplified a 590-bp fragment in the varieties originated from Suhan strain. The Blast search of S-OPA13-1 showed high homology to the POMFBO1 P. ostreatus cDNA clone MFB02-A05 and Laccaria bicolor S238N-H82. The results showed that this SCAR marker can clearly distinguish Suhan strains from Pleurotus spp.
Kim, Eun-Kyoung;Youn, Hye-Sook;Koo, Yong-Bom;Roe, Jung-Hye
Journal of Microbiology
/
v.35
no.4
/
pp.264-270
/
1997
The structure of plasmid mlp1, a linear 10.2kb mitochondrial plasmid of Pleurotus ostreatus NFF A2 was determined by restriction enzyme mapping and partial sequencing. The plasmid encodes at least two proteins; a putative RNA polymerase showing homology to yeast mitochondrial RNA polymerase and to viral-encoded RNA polymerases, and a putative DNA polymerase showing significant homology to the family B thpe DNA polymerases. It also contains terminal inverted repeat sequences at both ends which are longer than 274 bp. A 1.6 kb EcoRI restriction fragment of m1p1 containing the putative RNA polymerase gene did not hybridize to the nuclear or motochondrial genomes from P. ostreatus, suggesting that it may encode plasmidspecific RNA polymerase. The gene fragment also did not hybridize with the RNA polymerase gene (RPO41) from Saccaromyces cerevisiae. The relationship between genes in m1p1 and those in another linear plasmid pC1K1 of Claviceps purpurea was examined by DNA hybridization. The result indicates that the genes for DNA and RNA polymerases are not closely related with those in C. purpurea.
Screening experiments were carried out in order to select bacteria causing brown blotch disease on the mushroom, Pleurotus ostreatus. Four bacteria causing brown blotch disease were isolated from Pleurotus ostreatus and soils around the mushroom farm. Three strains showing antagonism against brown blotch causing bacteria, A-11, A-20 and A-29 were also isolated through methods pitting test, cross checking and biochemical test, and identified as Pseudomonas fluorescence for A-11 and A-20, and Pseudomonas sp. for A-29, respectively. Colonial morphology test also showed that A-11 and A-29 were appeared as transparent gel with green color, whereas the colony of A-20 showed opaque gel with light green color.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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