Plant regeneration was accomplished from protoplast culture of rice (Oryza sativa L. cv. Taebaeg). Embryogenic callus was induced from mature seed on MS medium containing 5 mM proline, 2.5 mg/L 2,4-D, 30 g/L sucrose in the dark at 28$^{\circ}C$ and used to establish embryogenic cell suspension culture. Suspension cells were subcultured every one week in N6 medium supplemented with 5 mM proline, 200 mg/L casein hydrolysate, 2.5 mg/L 2,4-D and amino acids of AA medium. Suspension cultures were composed of cells that were densely cytoplasmic, potentially embryogenic and were at least maintained for more than 6 months in liquid medium. Protoplasts were isolated from fast-growing suspension culture cells and cultured in a slightly modified KpR medium by mixed nurse culture. Isolated protoplasts began to divide within 5~7 days and thereafter, protoplast-derived calli were sequentially transferred to callus proliferating medium that soft agar MS medium contained 2 mg/L 2,4-D and produced distinct embryogenic cells. Microcolonies were then transferred to solid medium which consisted of MS medium containing 5 mg/L kinetin, 1 mg/L NAA, 1 mg/L ABA, 30 g/L sucrose and 10 g/L sorbitol under fluorescent light. Mulitple shoots of 4~5 per callus emerged and were transferred to hormone-free MS medium for root initiation. Thereafter, The plantlets were transferred to pots of soil to mature in the culture room.
Kim, Yu-Jin;Lee, Ok-Ran;Kim, Kyung-Tack;Yang, Deok-Chun
Journal of Ginseng Research
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v.36
no.4
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pp.442-448
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2012
Somatic embryogenesis is one of good examples of the basic research for plant embryo development as well as an important technique for plant biotechnology such as medicinally important plants. Single embryos develop into normal plantlets with shoots and roots. Therefore, direct single embryogenesis derived from single cells is highly important for normal plant regeneration. Here we demonstrate that the cyclic secondary somatic embryogenesis in Panax ginseng Meyer is a permanent source of embryogenic material that can be used for genetic manipulations. Secondary somatic embryos were originated directly from the primary somatic embryos on hormone-free Murashige and Skoog medium, and proliferated further in a cyclic manner. EM medium (one third of modified MS medium [MS medium containing half amount of NH4NO3 and KNO3] with 2% to 3% sucrose) favored further development of proliferated secondary somatic embryos into plantlets with root system. The plantlets developed into plants with well-developed taproots in half-strength Schenk and Hildebrandt basal medium supplemented with 0.5% activated charcoal.
The metabolism of sterol precurosor in leaves of Salanum andigena grafted between photoinduced and noninduced plant was investigated with the use of (2-$^{14}$ C) mevalonic acid. By the technique of the preparative gas-liquid chromatography, radioactive compounds of squalene, 4,4’-dimethylsterols and 4-demethylsterol were isolated and determined quantitatively. When labeled mevalonic acid n as applied to leaves radioactivity was extensively incorporated into non-saponifiable materials of lipid fraction and aqueous fraction (ethanol-water fraction). Radioactivity of 14C derived from (2-$^{14}$ C) mevalonic acid was transmissible from photoinduced plant to non-induced plant across the graft union, as tuberization hormone was, and incorporated into the sterols of the non-induced plant. Inhibitors of sterol biosynthesis, SK & F 7997 and nicotinic acid, are effective suppressors of tuber growing, if applied to leaves during photoinduction period. The experimental results suggest that certain substance containing isoprene unit, or sterol-like compound may participate in tuber growing.
Microalgae are photosynthetic cyanobacteria and eukaryotic microorganisms, mainly living in the water. In agriculture, numerous studies have been conducted to utilize microalgae as a biostimulant resource. Scenedesmus has been known to be one such microalga that can promote plant growth by secretion of auxin or cytokinin hormone analogs. However, no research has been performed on the effect of microalgae treatment on plant microbiota communities. This study was conducted to investigate the mode of action of microalgae as biostimulants in a plant microbiota perspective by using Scenedesmus sp. CHK0059 (also known as species Chlorella fusca), which has been well documented as a biostimulant for strawberries. The strawberry cultivar Keumsil was bred with Seolhyang and Maehyang as the parent cultivars. Using these three cultivars, microbiota communities were evaluated for changes in structural composition according to the CHK0059 treatment. CHK0059-treated Seolhyang, and CHK0059-untreated Maehyang were similar in microbial diversity in the endosphere. From a microbiota community perspective, the diversity change showed that CHK0059 was affected by the characteristics of the host. Conversely, when CHK0059 treatment was applied, populations of Streptomyces and Actinospica were observed in the crown endosphere.
It has been reported that various kinds of chinese herbs have an activity of promote growth rate in both animals and human. To investigate the growth promoting effect of the selected plants, fish and pigs were used as experimental animals. In fish, Eleutherococcus senticosus extract and Artemisia capillasis extract were found to be most effective. And these plant extracts were given to pigs. The result showed that plant extracts-fed pigs were significantly increased their body weight gain at 7.06% of average daily gain, as compared to control. The verify this results, secreted growth hormone (GH)levels and insulin-like growth factor-1 (ICF-1) levels into blood were measured. This result indicated that GH and IGF-1 levels in the blood in plant extracts-fed pigs were higher that those of control. To confirm growth promotion effect on human, we manufactured the mixture of these plant extracts, and coated this mixture onto rice, named as $Kiwoomi^{TM}$. When we administered $Kiwoomi^{TM}$ to elementary students, it was found to be effective in growth promotion. This result showed that $Kiwoomi^{TM}$-treated elementary students significantly increased their growth rate (about 2.14 times), as compared to untreated children. Taken together, it is suggested that this functional rice ($Kiwoomi^{TM}$) might be helpful for growing children without any side effects.
Kim, Soo-Yun;Ahn, Yul-Kyun;Huh, Yun-Chan;Lee, Hye-Eun;Kim, Do-Sun
Journal of Plant Biotechnology
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v.41
no.3
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pp.140-145
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2014
This study were carried out for selection of proper transformation variety and development of efficient regeneration and transformation methods. The number of shoot in commercial varieties of gourd plant were 0 ~ 7.3. and fusarium wilt resistant pure lines were 2.0 ~ 6.5 per dish containing on MS medium supplemented with 3 mg/L BA. The shoot regeneration frequency of fusarium wilt resistant pure lines were wide variation on the deviation. The expression of GFP was high 67% and 100% at the co-cultivation with Agrobacterium. The effective shoot regeneration plant hormone were combination BA and 2,4-D. The number and elongation condition of shoot was good after 4 weeks change with MS medium supplemented with 1 mg/L BA. Effective callus production plant hormone were combination of 3 mg/L BA and 0.1 mg/L 2.4-D.
Kim, Hye Jin;Lee, Jong Nam;Choi, Mi Ja;Suh, Jong Taek
Journal of Plant Biotechnology
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v.46
no.2
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pp.106-113
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2019
The objective of this study was to carry out treatment of various plant hormones in order to determine morphological and genetic variation degree of tissue-cultured strawberry. The cultivar used in this experiment was 'Goha' and 'Seolhyang', the plant hormones used for experiment were benzyladenine (BA), N-(2-Chloro-4 pyridyl)-N'-phenylurea (CPPU) and thidiazuron (TDZ), and the concentrations were 0.5, 1.0, 2.0, $4.0mg{\cdot}L^{-1}$ with each hormone. The BA treatment of the proliferation efficiency of tissue-cultured strawberry 'Goha' and 'Seolhyang' was the highest. When processing BA, CPPU and TDZ, morphological variation and genetic variation happened in strawberry 'Goha' and 'Seolhyang', especially, the variations appeared highly in CPPU treatment. The genetic variation in 'Goha' appeared at the concentration more than BA $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ as 1.1%, appeared at the concentration of CPPU $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ as 15.3%, and at the concentration of TDZ $2.0mg{\cdot}L^{-1}$ as 1.2%. The genetic variation in 'Seolhyang' appeared at the concentration of BA $4.0mg{\cdot}L^{-1}$ as 2.3%, and at the concentration of CPPU $0.5mg{\cdot}L^{-1}$ as 14.3%. Therefore, CPPU should not be treated during strawberry tissue culture, and BA and TDZ should be treated at low concentration.
To establish the system of in uitro plant regeneration, the leaf segments of Sedum sarmentosum were cultured on MS media supplemented with different levels of 2,4-D, NAA and BA. The callus induction and growth showed a good response on MS medium supplemented with 3.0mg/L 2,4-D and 1.0mg/L BA, but a few callus induced on medium containing NAA and BA. In plant regeneration, combination of BA and NAA promoted shoot organogenesis from callus, and the highest frequency was obtained on MS medium supplemented with 0.2mg/L NAA and 3.0mg/L BA. When calli were transferred to the plant regeneration medium containing 0.2mg/L NAA and 3.0mg/L BA, healthy shoots without hyperhydricity were continuously induced (17.2 plantlets per callus) after 50 days of culture. When regenerated plantlets were transferred onto hormone-free MS medium, rooting was easily achieved from all of them.
In this study, samples were collected from the leaves and stems of healthy wild Pistachio trees (Pistacia atlantica L.) from various locations of Baneh and Marivan regions, Iran. In total, 61 endophytic bacteria were isolated and grouped according to phenotypic properties. Ten selected isolates from each group were further identified by partial sequencing of the 16S rRNA gene. Based on the results, isolates were identified as bacteria belonging to Pseudomonas, Stenotrophomonas, Bacillus, Pantoea and Serratia genus. The ability of these isolates was evaluated to phytohormone production such as auxin and gibberellin, siderophore production, phosphate solubilization, atmospheric nitrogen fixation, protease and hydrogen cyanide production. All strains were able to produce the plant growth hormone auxin and gibberellin in different amounts. The majority of strains were able to solubilize phosphate. The results of atmospheric nitrogen fixation ability, protease and siderophore production were varied among strains. Only Ba66 could produce a low amount of hydrogen cyanide. The results of biocontrol assay showed that Pb78 and Sp15 strains had the highest and lowest inhibition effects on bacterial plant pathogens, Pseudomonas syringae pv. syringae Pss20 and Pseudomonas tolaasii Pt18 under in vitro condition. Pb3, Pb24 and Pb71 strains significantly promote root formation on carrot slices. To our knowledge this is the first report of the isolation of endophytic bacterial strains belonging to Pantoea, Bacillus, Pseudomonas, Serratia and Stenotrophomonas genus from wild pistachio trees with plant growth promoting potential and biocontrol activity.
Light is one of the most important environmental factors that influence plant growth and development. It does not function independently but exerts its role through coordinated interactions with intrinsic developmental programs, such as hormonal regulation. One typical example is hypocotyl growth in which light signals are modulated through growth hormones. However, the underlying molecular mechanisms are largely unknown. We demonstrated that brassinosteroids play an important role in the light signal transduction in etiolated hypocotyl growth. A light-responsive Ras-like G-protein, Pra2 from pea, physically and functionally interacts with a cytochrome P450 that specifically catalyzes C-2 hydroxylation in brassinosteroid biosynthesis. The cytochrome P450 expression, along with Pra2, is induced in the dark and predominantly localized in the rapidly elongating zone of etiolated pea epicotyls. Transgenic plants with a reduced level of Pra2 exhibit a dark-specific dwarfism, which is completely rescued by brassinosteroid application. On the contrary, overexpression of the cytochrome P450 results in enhanced hypocotyl growth even in the light, which phenocopies the etiolated hypocotyl growth. It is therefore envisioned that Pra2 is a molecular switch that mediates the crosstalk between light and brassinosteroids in the etiolation process.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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