An efficient plant regeneration protocol is developed for a standard-type chrysanthemum. When petal segments derived from flower buds (4 or 8cm in diameter) were used as the culture material, the highest shoot regeneration frequency (96%) was obtained on a Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 0.5 mg/L IAA, 2 mg/L BA, 3% sucrose, and a 0.8% agar. Pre-culturing the explants under dark conditions for 14 days produced better results for the shoot regeneration frequency than the explants cultured under a continuous 16 h photoperiod ($40{\mu}molm^{-2}s^{-1}$). The shoot regeneration frequency ranged from 19.0% for the Shinmato cultivar to 89.1% for the Baeksun cultivar. Activated charcoal (0.2%) enhanced the root formation of the regenerated shoots in a hormone-free MS medium. The rooted plantlets were acclimatized and successfully established in a greenhouse.
An auxin-producing bacterium (AMT-54) was isolated from ginseng cultivating soil of Geumsan area. The isolate AMT-54 was confirmed to produce indole-3-acetic acid (IAA) which is one of auxin hormone by TLC analysis. When the concentration of IAA was assessed by performing HPLC quantitative analysis, the maximal 457ppm of IAA was detected from the culture filtrate after culturing in R2A broth containing 0.1% tryptophan for 24h at $35^{\circ}C$. The molecular weight of the main peak obtained by LC-mass analysis was correspondent well to 175, that of IAA. The strain AMT-54 was identified as a novel species belongs to Klebsiella mobilis by a chemotaxanomic and phylogenetic analysis. To investigate the growth promoting effect of crop, when the culture broth of K. mobilis AMT-54 was infected onto seed pot of mung bean, the adventitious root induction and root growth of mung bean were 3.3times higher than control.
Ra Jeong Chan;Kim Jeong Ho;Lee Jong Eun;Park Hyeong Geun;Kim Sung Hun;Kang Kyung Sun
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.17
no.3
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pp.815-818
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2003
Various kinds of chinese herbs have been known as to promote growth rate of animals. We investigated the growth promoting effect of the selected plants by using fish and rats as experimental animals. In a preliminary test by using fish, Eleutherococcus senticosus and Artemisia capillasis were found to be effective. Based on this result, we manufactured the mixture of plant extracts and applied this mixture to rice, named as Kiwoomi/sup TM/. When we administered Kiwoomi/sup TM/ to rats, it was found to be effective in growth promotion. Kiwoomi/sup TM/ - administered group showed 49.3% (0.75g/kg B.W.) and 52.3% (1.59/kg.B.W.) growth promotion, respectively. On the other hand, Control group showed 46.2% growth promotion. This growth promotion was supported by increase of GH and IGF-1 level in the Kiwoomi/sup TM/- administered group. From these results, we suggest that this functional rice could be helpful for growing children.
Changes of peroxidase activity, polyamine content and ethylene production during somatic embryogenesis in suspension-cultured carrot (Daucus carota L.) cells were investigated. As compared with nonembyrogenic cells and their medium, embryogenic cells and their medium were characterized by higher levels of peroxidase at all times of culture period. Peroxidase in embryogenic cells showed higher oxidation activity of IAA than in nonembryogenic cells at the torpedo stage, but the IAA oxidation activity of peroxidase released into embryogenic medium was lower than that of peroxidase released into nonembryogenic medium. Peroxidase patterns of embryogenic and nonembryogenic cells showed three cathodic bands, and one anodic band, while peroxidase patterns released into embryogenic and nonembryogenic media did not show any anodic bands and the isoelectric points of cathodic peroxidase were pH 7.7, 7.5 and 6.6. Compared with nonembryogenic cells, polyamine content in embryogenic cells was increased by 15% at the torpedo stage, but polyamine ratio was constant, and ethylene production was extremely low at all times of culture period. Therefore, it is suggested that the peroxidase in embryogenic cells is correlated with embryogenesis by regulating hormone ratios through IAA oxidation, while the peroxidase isozyme patterns may be used as a biochemical marker of embryogenesis. The increase of polyamine content and the decrease of ethylene production suggest an interaction between polyamine and ethlyene during embryogenesis.
Codonopsis lanceolata (Campanulaceae) has been used in traditional medicines, as its roots contain several kinds of triterpenoid saponin with high medicinal values. In this work, we induced transgenic hairy roots of C. lanceolata and analyzed triterpenoid saponins from the hairy roots and hairy root-derived transgenic plants. Hairy roots were obtained from leaf explants by the transformation of Agrobacterium rhizogenes R1000. Transgenic hairy root lines were confirmed by the transcriptional activities of rolA, B, C, and D genes by RT-PCR. Transgenic root lines actively proliferated on hormone-free medium but not in nontransformed roots. Hairy roots contained richer triterpenoids (lancemaside A, foetidissimoside A, and aster saponin Hb) than nontransformed roots. Transgenic plants were regenerated from the hairy roots via somatic embryogenesis. They showed phenotypic alterations such as shortened shoots and an increased number of axillary buds and adventitious roots. The transgenic plants also contained higher triterpenoid levels than wild-type plants. These results suggest that hairy roots and transgenic plants of C. lanceolata could be used as medicinal materials for the production of triterpene saponins.
Prolyl endopeptidase (PEP, EC 3.4.21.26, also referred to as prolyl oligopeptidase) degrades proline containing, biologically active neuropeptides such as vasopressin, substance P and thyrotropin-releasing hormone by cleaving peptide bonds on carboxyl side of prolyl residue within neuropeptides of less than 30 amino acids. Evaluation of PEP levels in postmortem brains of Alzheimer's disease patients revealed significant increases in PEP activity. Therefore, a specific PEP inhibitor can be a good candidate of drug against memory loss. Upon our examination for PEP inhibitory activity from micronutrients, ascorbic acid (vitamin C) showed small but significant PEP inhibition (13% PEP inhibition at $8{\mu}g{\cdot}ml^{-1}$). Palmitic acid showed almost no PEP inhibition. However, 6-O-palmitoyl ascorbic acid ($\underline{1}$) showed 70% PEP inhibition at $8{\mu}g{\cdot}ml^{-1}$ indicating that hydrophobic portion of the compound $\underline{1}$ may facilitate the inhibitory effect. $IC_{50}$ value of compound $\underline{1}$ was $12.6{\pm}0.2{\mu}M$. The primary and secondary Lineweaver Burk and Dixon plots for compound $\underline{1}$ indicated that it is a non-competitive inhibitor with inhibition constant (Ki) value of $23.7{\mu}M$.
Plant MYB transcription factors regulate secondary metabolism, cellular morphogenesis, and plant hormone signaling pathway. MYB proteins in plants consist of two repeats of 50 amino acid residues, which are referred to as R2R3 and they interact with WD40 or basic helix loop helix (bHLH) proteins. Yeast two hybrid assay was determined whether rice MYB protein interacts with either OsTTG1, which contains a WD40 domain, or with OsGL3, which contains a bHLH domain. Among 30 OsMYB proteins, three interacted with OsTTG1 and five interacted with OsGL3. A series of MYB mutants were created to determine the MYB domain important for the interaction with OsTTG1 or OsGL3. By using the yeast two hybrid assay, we found that the R3 motif of OsMYB10 and the R2 motif of OsMYB16 were required for interaction with OsTTG1 and OsGL3 proteins, respectively.
Brassinosteroids (BRs) are a special class of plant steroid hormones that are essential for normal growth and development. Part of confusion is whether BRs are unique to plants, because they have overlapping physiological roles with other better-studied hormones and with physiological responses caused by light. In systems designed to assay for cytokinins, the effects of BRs vary. We measured hypocotyl length for testing the ability of brassinolide (BL) to rescue double mutant between det2 and the photoreceptor null mutant phytochrome B (phyB). PHYB involved in controlling hypocotyl elongation in increased concentration of BL whereas phyBdet2 double mutant just partially rescue to phyB in white and red light indicated the involvement of BRs in PHYB regulated cell elongation. BRs regulated hypocotyl growth was delayed by BAP, a cytokinin treatment but inhibitory effects of BAPs on hypocotyl growth was slightly recovered by BL. The result indicated that the mode of action of BR and cytokinin is independent or sequential in the downstream light-regulated response control on hypocotyl elongation and also light modulated the action of BR and cytokinin in some extent.
Plant cells have a remarkable ability to induce pluripotent cell masses and regenerate whole plant organs under the appropriate culture conditions. Although the in vitro regeneration system is widely applied to manipulate agronomic traits, an understanding of the molecular mechanisms underlying callus formation is starting to emerge. Here, we performed genome-wide transcriptome profiling of wild-type leaves and leaf explant-derived calli for comparison and identified 10,405 differentially expressed genes (> two-fold change). In addition to the well-defined signaling pathways involved in callus formation, we uncovered additional biological processes that may contribute to robust cellular dedifferentiation. Particular emphasis is placed on molecular components involved in leaf development, circadian clock, stress and hormone signaling, carbohydrate metabolism, and chromatin organization. Genetic and pharmacological analyses further supported that homeostasis of clock activity and stress signaling is crucial for proper callus induction. In addition, gibberellic acid (GA) and brassinosteroid (BR) signaling also participates in intricate cellular reprogramming. Collectively, our findings indicate that multiple signaling pathways are intertwined to allow reversible transition of cellular differentiation and dedifferentiation.
Melatonin, which is a hormone secreted from pineal gland of brain and known to prevent oxidative damages of various tissues, was analyzed in 26 domestic edible plants. For the preparation of melatonin fraction, 50% ethanol extract prepared from lyophilized plant powder was filtered and applied on TLC plate. Melatonin position on TLC developed with acetone was identified by fluorescence light and extracted with methanol. This methanolic fraction was injected into HPLC comprising ODS-A column, fluorescence detector, and mobile phase consisting of a mixture (30 : 70, v/v) of 70% ammonium acetate and methanol at a flow rate of 1.0 mL/min. Melatonin was identified at the retention time of 17 min. Results revealed that celery, leek, broccoli, and cauliflower had higher melatonin contents than others.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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