Oh, Myung Jin;Na, Hye Ryun;Choi, Hong-Keun;Liu, Jang Ryol;Kim, Suk Weon
Plant Biotechnology Reports
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v.2
no.1
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pp.87-92
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2008
An improved protocol for high frequency plant regeneration via somatic embryogenesis from zygotic embryo-derived cell suspension cultures of watershield (Brasenia schreberi) was developed. Zygotic embryos formed pale-yellow globular structures and white friable callus at a frequency of 80% when cultured on halfstrength MS medium supplemented with $0.3mg\;l^{-1}$ 2,4-D. However, the frequency of formation of pale-yellow globular structures and white friable callus decreased slightly with increasing concentrations of 2,4-D up to $3mg\;l^{-1}$, where the frequency reached ~50% of the control. Cell suspension cultures from zygotic embryoderived white friable callus were established using half-strength MS medium supplemented with $0.3mg\;l^{-1}$ 2,4-D. Upon plating of cell aggregates on half-strength MS basal medium, approximately 8.3% gave rise to somatic embryos and developed into plantlets. However, the frequency of plantlet development from cell aggregates was sharply increased (by up to 55%) when activated charcoal and zeatin were applied. Regenerated plantlets were successfully transplanted to potting soil and grown to normal plants in a growth chamber. The distinctive feature of this study is the establishment of a high frequency plant regeneration system via somatic embryogenesis from zygotic embryo-derived cell suspension cultures of water-shield, which has not been previously reported. The protocol for plant regeneration of watershield through somatic embryogenesis could be useful for the mass propagation and transformation of selected elite lines.
Mesenchymal stem cells (MSCs) are often known to have a therapeutic potential in the cell-mediated repair for fatal or incurable diseases. In this study, canine umbilical cord MSCs (cUC-MSCs) were isolated from umbilical cord matrix (n = 3) and subjected to proliferative culture for 5 consecutive passages. The cells at each passage were characterized for multipotent MSC properties such as proliferation kinetics, expression patterns of MSC surface markers and self-renewal associated markers, and chondrogenic differentiation. In results, the proliferation of the cells as determined by the cumulative population doubling level was observed at its peak on passage 3 and stopped after passage 5, whereas cell doubling time dramatically increased after passage 4. Expression of MSC surface markers (CD44, CD54, CD61, CD80, CD90 and Flk-1), molecule (HMGA2) and pluripotent markers (sox2, nanog) associated with self-renewal was negatively correlated with the number of passages. However, MSC surface marker (CD105) and pluripotent marker (Oct3/4) decreased with increasing the number of subpassage. cUC-MSCs at passage 1 to 5 underwent chondrogenesis under specific culture conditions, but percentage of chondrogenic differentiation decreased with increasing the number of subpassage. Collectively, the present study suggested that sequential subpassage could affect multipotent properties of cUC-MSCs and needs to be addressed before clinical applications.
Calli were induced by culturing the leaf segment of Actinidia deliciosa ${\times}$ A. arguta clone 118 on MS medium supplemented with 0.5 mg/L 2,4-D, 0.1 mg/L NAA and 0.05 mg/L BA for 8 weeks in light condition. The induced calli were inoculated in liquid MS medium containing 0.5 mg/L 2,4-D, 0.1 mg/L NAA, 0.05 mg/L BA and 3% sucrose to establish cell suspension culture. The cells at the exponential stage and the stationary stage could be observed between 5-11 days and after that 12 days in culture, respectively. The fresh weight of callus induced from the suspended cells did not vary much among the media containing eight different combinations of plant growth regulators tested. The highest frequency of shoot induction (88.3%) was observed in MS medium containing 2.0 mg/L zeatin. Either BA or zeatin mixed with thidiazuron (TDZ) seemed to be effective in shoot induction. The induced shoots were transferred to MS medium containing 0.2 mg/L zeatin for further shoot growth. And then the shoots were transferred to Standardi (ST) medium containing 1.0 mg/L indolebutyric acid (IBA) for rooting. Plantlets could be obtained through cell suspension culture of Actinidia deliciosa ${\times}$ A. arguta clone 118.
International Journal of Advanced Culture Technology
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v.8
no.1
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pp.182-187
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2020
Silver nanoparticles (AgNPs) have been manufactured in recent years and widely used in various fields. Reactive oxygen species (ROS), which occur in AgNPs, destroy cell membranes. It is widely accepted that ROS generated in this manner inhibit microorganisms growth and causes toxic effects, However, it does not affect cell membranes directly but positively affects growth in plants with cell walls. The nanoball used in this experiment is a new material that generates ROS stably and is used in aqueous solution. Results of this study indicate a 30% increase in yield of Ginseng mixed with culture soil. The analysis of soil condition after cultivation showed that the possibility of repetitive cultivation in soil mixed with Nanoball was high. This suggests that Nanoball is an antimicrobial active material due to the microbial / extermination effect of pathogenic microorganisms. Therefore, there may be potential applications in agricultural cultivation sites as a repetitive cultivation technology that reuses soil.
The chemical investigation on the cell suspension culture of Morinda elliptica L. yielded eight anthraquinones, two of which, anthragallol-1,2-dimethyl ether (3) and purpurin-1-methyl ether (4), have not been isolated from the original plant. Other compounds isolated include nordamnacanthal (1), alizarin-1-methyl ether (2), rubiadin (5), soranjidiol (6), $lucidin-{\omega}-methyl$ ether (7), and morindone (8). The structures of anthraquinones were established based on spectral studies.
Culture conditions for high frequency plant regeneration via somatic embryogenesis from embryogenic cell suspension cultures of Hovenia dulcis are described. Germinated somatic embryos were selected for induction of secondary embryogenesis. Friable embryogenic cells were induced directly from somatic embryos when transfer to 1/3 MS solid or liquid medium lacking plant growth regulators. The temperature strongly effected on induction of secondary embryognesis than other conditions in culture. All somatic embryos produced friable embryogenic cell clumps within 10 days when germinated somatic embryos cultured in 1/3 MS medium at $30^{\circ}C$ in suspension culture. No somatic embryos formed from embryogenic cell suspension cultures at $18^{\circ}C$. Numerous somatic embryos were induced and subsequently developed uniformly into germination stage from suspended cell clumps after 4 weeks of culture on $18^{\circ}C$. Plantlets conversion were observed on $18^{\circ}C$ when germinated somatic embryos were transferred to 1/3 MS solid medium without plant growth regulators or supplemented with 0.1-0.5 mg/l benzyladenine.
The kinetics of Ti-transformed Salvia miltiorrhiza cell cultures was studied in 250-$m\ell$ shake flasks by using B5 medium with addition of 30 gfL of sucrose. In the cell cultures, the maximum cell mass obtained was 11.5 g DW/L on day 15. The highest amount of phenolic compounds - rosmarinic acid (RA) and lithospermic acid B (LAB) reached 871.3 mg/L (day 15) and 121.3 mg/L (day 13), respectively. The total tanshinone production, i.e., intracellular plus extracellular cryptotanshinone, tanshinone 1, and tanshinone IIA, was 5.3 mg/L on day 13. For the cultivations in 2.4-L stirred bioreactors, the residual sugar level and medium conductivity were a little higher in a small turbine impeller reactor ($T_s$) than those in a large turbine impeller reactor ($T_L$), while a higher cell density was obtained in the $T_L$. For the production of tanshinones and phenolics, better results were obtained in the $T_L$ than in the $T_s$. In the $T_L$, similar or even a little higher production titers of tanshinones and phenolic compounds were achieved compared to those in the flasks. The results suggest that the shake flask results could be successfully scaled up to the $T_L$ reactor. Such a large impeller reactor like $T_L$ may be better than a small impeller one for the large-scale production of the valuable metabolites by the suspension cultures of Ti transformed S.miltiorrhiza cells. This is considered due to the beneficial culture environment in the $T_L$, such as low shear rates as estimated theoretically.
The phytoremediation of trinitrotoluene, nitroglycerine, pentaerytritoltetranitrate in plant tissue cultures of Solanum aviculare, Rheum palmatum and Populus simonii were studied. All above mentioned explosives were degradated to to less toxic products and finally mineralized or bound to the cell wall.
Transgenic Nicotiana tabacum cells were cultivated for the production of murine granulocyte macrophage-colony stimulating factor (mGM-CSF) in both a stirred tank bioreactor and an airlift bioreactor with draft tube. Cell growth and mGM-CSF production in the airlift bioreactor were found to be better than those achieved in the stirred tank bioreactor. In the airlift bioreactor, 9.0g/L of cells and 2.2ng/mL of mGM-CSF were obtained (11.0g/L and 2.4ng/mL, respectively in shake flasks). Although the lag period was prolonged and mGM-CSF production was lowered by 33% in the stirred thank bioreactor as compared to the control culture, the maximum cell density was increased up to 12.0g/L due to better mixing by agitation at the higher cell density.
Leaf mesophy11 protoplast cultures from six Nicotiana species, N. debneyi, N. rustica, N. amplexicaulis, N. glauca, N. glutinosa, and N. sylvestris were carried out. When we reduced the NH4NO3 and Fe.EDTA concentration to 1/3(7 mM) and 1/10(10$\mu$M) from the Murashige and Skoog medium respectively, cell division of the protoplasts was efficiently induced in four Nicotiana species, N. debneyi, N. rustica, N. amplexicaulis and N. glauca. However, other two species, N. glutinosa and N. sylvestris were failed in inducing cell division at the same culture condition. The protoclone calluses derived from four Nicotiana species were consequently regenerated on a MS basal medium supplemented with the appropriate auxin and cytokinin.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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