• Molecules and Cells
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• 제26권1호
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• pp.81-86
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• 2008

RNA interference (RNAi) was performed on several essential genes in the pinewood nematode Bursaphelenchus xylophilus, which causes pine wilt disease. Double-stranded RNA (dsRNA) was delivered to larvae or adult worms by soaking, electroporation, or microinjection. Soaking and electroporation of L2-L3 stage worms in solutions containing dsRNA for essential genes induced over 25% lethality after 5 days, and gene-specific phenotypes were observed. This lethality agreed with significant reductions of the targeted transcripts, as assayed by reverse-transcription coupled with real time PCR. Microinjection was the most efficient route as measured by the hatching rate of F1 embryos, which was reduced by 46%. When adult worms were soaked in dsRNA, lethality was induced in the F1 larvae, revealing the persistence of knockdown phenotypes. The penetrance of the RNAi phenotypes for essential genes was relatively low but consistent, indicating that RNAi should be useful for studying the in vivo functions of B. xylophilus gene products.

• 한국균학회지
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• 제36권2호
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• pp.153-162
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• 2008

Arthrobotrys속 균은 불완전균으로 토양선충을 포획하는 살선충 곰팡이다. 본 논문에서는 선충포획성 균종인 A. oligospora, A. dactyloides, A. conoides의 균사생장, 선충 포획기작의 특성, 그리고 소나무재선충에 대한 감염능력을 이해하여 살선충 효과가 높은 균종을 알고자 하였다. 소나무재선충은 잿빛곰팡이(Botrytis cinera)에 접종해 증식시켰으며 여기에 Arthrobotrys속 3종 각각의 균사배양체 $1\;cm^2$씩 접종하고 배지, 온도, pH, 소나무재선충 접종밀도, 영양조건이 균사의 생장에 미치는 영향을 측정하였다. 그 결과 전체적으로 A. conoides의 생장이 가장 빨랐으며(13.9 mm/day, PDA) A. dactyloides가 가장 느렸다(3 mm/day, PDA). 3가지 균의 생장은 PDA배지, $25^{\circ}C$, pH 4.5의 조건에서 가장 양호하였다. A. conoides 균과 A. oligospora 균은 500마리의 재선충 접종으로 생장이 촉진됐으나, 10,000마리 접종으로는 느려졌다. A. dactyloides는 산성에서 생장하지 않았으며 재선충이 많을수록 더 느렸다. A. conoides와 A. oligospora의 선충포획기관은 균사보다 굵은 고리들의 망상 구조로서 선충 존재시만 형성되었으나, A. dactyloides의 포획기관은 단일한 원모양으로 선충이 없어도 형성되었다. A. conoides가 A. oligosora보다 포획기관 형성이 빨랐으며, 재선충 포획 후 균사가 재선충 내부로 침입하여 작고 많은 침입구(infection bulb)를 만들고 선충을 소화하였다. 그러나 A. dactyloides는 포획기관의 수가 적었고 포획도 하지 못하였다. A. conoides의 재선충 감염율은 95%였고, A. oligospora의 감염율은 80%였다. 그리고 위 두 균의 조합접종에 의한 선충감염율은 92%였다. 그러나 A. dactyloides는 오히려 재선충의 밀도를 증가시켰다. A. conoides 균은 빠른 생장률과 초기 포획으로, A. oligospora는 균밀도를 증가시켜서 재선충 감염율을 높였다. 결론적으로 A. conoides균은 균사생장률과 재선충감염율이 높으므로 소나무재선충의 생물학적 방제에 이용될 수 있을 것이라 생각한다.

• The Plant Pathology Journal
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• 제25권3호
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• pp.241-246
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• 2009

Korean pine (Pinus koraiensis Sieb. et Zucc.), a five-needle pine, has recently been suffering pine wilt disease caused by non-native pinewood nematode, Bursaphelenchus xylophilus. Three-year-old Korean pine seedlings were inoculated with 10,000 pathogenic nematodes in a greenhouse to investigate disease development, water content and the density of nematodes in stems. Needle dehydration, xylem drying and pith browning started 20 days after inoculation (DAI). There were significant differences between seedlings inoculated with nematodes and control seedlings in the relative water content of stems and leaves at 20 and 30 DAI. At 60 DAI, all remaining seedlings inoculated with nematodes had died, but control seedlings all remained alive. The average number of nematodes recovered from stems of Korean pine dramatically increased from 10 to 20 DAI, and then decreased at the end of the experiment at 60 days. This study suggests that the relative water content of stems and leaves in current-year branches could be used as a useful physiological indicator for early diagnosis of pine wilt disease.

• 생명과학회지
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• 제25권12호
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• pp.1445-1449
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• 2015

소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)은 소나무재선충병을 유발하여 한국의 소나무 숲에 심각한 영향을 미치고 있다. 소나무재선충에 감염된 소나무는 일반적으로 훈증 또는 파쇄처리되지만 소나무재선충병 피해지역의 방제효과를 검증할 수 있는 효과적인 방법은 아직 없다. 본 연구에서는 소나무재선충병 방제효과 검증에 적합한 솔수염하늘소 집합페로몬의 농도를 알아보기 위해 2-(Undecyloxy)ethanol, 알파-피넨, 에탄올을 이용하여 경상북도 포항시의 소나무재선충병 피해지역에서 필드테스트를 시행하였다. 총 27마리의 솔수염하늘소가 유인되었으며 고농도(700 mg)의 집합페로몬을 사용한 트랩이 가장 효과적이었다. 집합페로몬 2-(Undecyloxy)ethanol은 솔수염 하늘소 개체수 조사와 소나무재선충병 방제효과 검증에 사용할 수 있을 것으로 사료된다.

• 농약과학회지
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• 제20권1호
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• pp.56-65
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• 2016

소나무재선충은 소나무류에 기생하여 치명적 피해를 입히는 선충으로 우리나라의 주요 산림해충의 하나이다. 살아있는 나무에서 소나무재선충을 대상으로 하는 방제법은 나무주사 방법이 가장 실효적인 방법의 하나이다. 본 연구는 소나무재선충의 나무주사 용도로 활용할 수 있는 물질을 탐색하기 위하여 46종의 키르기즈스탄과 88종의 베트남 식물체 및 21종의 식물유래 활성물질(${\alpha}$-terpinene, ${\alpha}$-pinene, ${\beta}$-thujaplicin, cinnamaldehyde, eugenol, emodin, geraniol, limonone, methyl palmitate, matrine, myrcene, methyl gallate, nicotine, quassin, resveratrol, rotenone, thymol, thujaplicin, terthiophene, tuberstemonine, ${\gamma}$-terpinene) 들을 이용하여 소나무재선충에 대한 살선충 활성을 검정하였다. 식물체 추출물들 중에서는 베트남에서 구입한 한련초(Eclipta prostrata) 추출물의 소나무재선충에 대한 살선충 활성이 높았으며 식물체 유래 활성물질들 중에는 terthiophene의 살선충 활성이 가장 높았다. Terthiophene의 곰솔 수간 살포는 22일차까지는 소나무재선충의 증식억제 효과가 있었으나 이후에는 효과가 없었다. 한련초 추출물과 terthiophene의 나무주사 효과와 다른 식물기생성선충에 대한 보완적인 연구가 수행된다면 살선충제로의 활용성도 기대된다.

• 한국균학회지
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• 제44권4호
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• pp.240-246
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• 2016

2015년 찐고구마, 저장 마늘, 소나무재선충병에 감염된 목재칩, 버섯재배 배지용 농업부산물 등의 식물재료로부터 진균을 조사하던 중 5종의 진균을 분리하고 동정하였다. 본 논문에서는 동정된 Geomyces pannorum, Neopestalotiopsis javaensis, Ophiognomonia setacea, Penicillium allii, Penicillium chermesinum 등 5종 진균을 국내 미기록 진균으로 보고하고자 한다. 이들 미기록 균류에 대한 배양 배지에서의 집락 형성 특성과 광학현미경 관찰을 의한 미세구조 특성, 그리고 internal transcribed spacer (ITS) rDNA region 또는 calmodulin 유전자 염기서열에 기반한 분자계통학적 관계에 대해 기술하였다.

• 한국응용곤충학회지
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• 제42권4호
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• pp.315-321
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• 2003

1999년부터 2002년까지 경남 진주의 소나무재선충에 의한 피해임지 내에서 고사목을 대상으로 솔수염하늘소 유충침입공과 성충탈출공 및 번데기방의 크기와 갱도길이 등을 측정하고, 소나무 내 분포를 분석하였다. 소나무 내 솔수염하늘소의 유충 침입공수는 1$m^2$당 수관부가 56.2 개인데 비해 수간부는 27.7개로서 수관부가 훨씬 많았다. 직경이 8-l0 cm인 공시목에 침입공의 27.5%와 우화공의 22.4%가 분포하였고 이보다 굵거나 가는 공시목에는 적었다. 침입공의 형태는 타원형으로 입구의 표면적은 평균 65.8$\textrm{mm}^2$ 이었다. 성충탈출공은 원형으로서 직경은 평균 7.0mm 이었다. 공시목의 표면에서 번데기방까지의 깊이는 평균 24.8 mm이었고 번데기 방의 부피는 200-2,000 ㎣이었다 성충의 탈출공은 수관부가 수간부보다 많았으며, 공시목의 직경이 8-10cm에서 22.4%로 가장 많이 분포하였다. 유충 침입공과 성충 탈출공까지의 목질부 표면에서 직선거리는 평균 3.3 cm이었으며, 침입공에서 탈출공까지의 갱도 길이는 평균 46.2 nm이었다.

• Entomological Research
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• 제48권5호
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• pp.448-452
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• 2018

The aggregation pheromone of Monochamus (Coleoptera: Cerambycidae) beetles, 2-(undecyloxy) ethanol (hereafter referred to as monochamol), has gained considerable attention because of its usefulness in monitoring and population control of pine sawyer beetles. The hydroxyether structural motif is conserved in pheromones of the subfamily Lamiinae of the Cerambycidae. In this study, we investigated the effects of C10- and C12-chain length alkyl analogs of monochamol, 2-(decyloxy) ethanol and 2-(dodecyloxy) ethanol, on attracting M. saltuairus in Andong, Gyeongsangbuk-do, Korea. The C10 and C12 analogs attracted M. saltuarius when used in combination with ${\alpha}$-pinene and ethanol, but the responses of these alkyl chain analogs were lower than those of monochamol. Furthermore, the addition of either C10 or C12 analog to the use of monochamol with ${\alpha}$-pinene and ethanol had no effect on attraction of M. saltuarius, indicating high sensitivity of M. saltuarius to monochanol. Taken together, the results of this study suggest that chemical communication within a Monochamus species depends not only on monochamol, but also on other semiochemicals.

• 한국산림과학회지
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• 제99권3호
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• pp.337-343
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• 2010

소나무재선충을 접종한 소나무묘목에서 잎의 수분포텐셜 변화를 식물수분시스템으로 측정하였다. 소나무재선충 접종 후 35일째 12시경에 소나무의 잎 수분포텐셜은 소나무소나무재선충 접종묘에서 -1.04 MPa, 비접종묘에서 -0.94 MPa로 소나무재선충 접종묘가 비접종묘보다 더 낮았다. 접종 후 56일째에는 해뜨기 직전 잎 수분포텐셜은 소나무재선충 접종묘가 -0.71 MPa, 비접종묘가 -0.26 MPa로 소나무재선충 접종묘가 더 낮았다. 접종 후 63일째에는 소나무소나무재선충 접종묘의 1년생 잎이 옅은 황색으로 되었다. 이때 접종묘의 근원부 단면에서는 수지가 나오지 않았다. 소나무재선충의 밀도는 접종 후 28일째에 최대가 되었다가 68일째에 급감하였다. 접종묘의 체관부와 수조직은 갈변되었으며 수지 유출은 접종 후 계속 감소하였다. 결론적으로 소나무재선충은 접종 1개월부터 소나무묘목에 수분 스트레스를 일으켰다.

• 한국균학회소식:학술대회논문집
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• 한국균학회 2014년도 춘계학술대회 및 임시총회
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• pp.41-41
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• 2014

Pinewood nematode (PWN, Bursaphelenchus xylophilus) is a serious pathogenic worm that quickly dry pine trees to death. Recently, PWN has been devastating huge amounts of conifer trees in Korea. As a first step to explore the association and ecological roles of fungi in PWN life cycle in Korea, in this study we first isolated and indentified fungi from PWN-infested Korean pine and Japanese black pine wood sampled in Jinju, Sacheon, Pocheon, Chuncheon, Gwangju, and Hoengseong in Korea. A total of 144 fungal isolates were obtained from Japanese black pine wood and 264 fungal isolates from Korean pine wood. Their morphology and nucleotide sequences of the ITS rDNA and ♌-tubulin gene were examined for species identification. Ophiostoma ips, Botrytis anthophila, Penicillium sp., Hypocrea lixii, Trichoderma atroviride, O. galeiforme, Fusarium proliferatum were identified from Japanese black pine wood. Leptographium koreanum, L. pini-densiflorae, Ophiostoma ips, Penicillium raistrick, Trichoderma sp. were isolated from Korean pine wood. O. ips and L. koreanum were the major species on the two different PWN-infected pine tree. The cultivation of PWN on fungal mat of the identified species did some enhance PWN reproduction. The ambrosia beetle, Platypus koryoensis, is a serious pest of oak trees in Korea. In this study we investigated filamentous fungi present in the body of the beetle. Fourteen genera of filamentous fungi belonging to Ascomycota and Basidiomycota were isolated. All the obtained genera were isolated in the mitosporic state. The identified fungi were classified in 11 distinct orders including the Ascomycota (Eurotiales, Hypocreales, Microascales, Ophiostomatales, Pleosporales, and Sordiales) and Basidiomycota (Agaricales, Corticiales, Polyporales, and Russulales Xylariales). Within Ascomycota, 13 species were found. Meanwhile five species were found within Basidiomycota. The results showed the presence of diverse fungi in P. koryoensis. Among the isolated fungi, some were able to produce wood degrading enzymes. Further fungal isolation was performed with P. koryoensis infested Quercus mongolica trees sampled at Kumdan mountain in Hanam-Si, Gyeonggi province from June of 2009 to June of 2010. Penicillin spp. and Trichoderma spp. were the major species of mold fungi group. Pichia guilliermondii was the major species of mold yeast group. Raffaelea quercus-mongolicae was also isolated, but its isolation frequency was not high. Other species identified were Ambrosiella xylebori, Fusarium solani, Cryphonectria nitschke, Chaetomium globosum, and Gliocladium viride, Candida kashinagacola, C. maritima, C. vanderkliftii, Saccharomycopsis crataegensis.