Enterobacter sp. B54 inhibited growth of the fungus Phytophthora capsici on potato dextrose agar (PDA). Three mutants with antifungal activities (denoted M54-47, M54-113, and M54-329) which were lost or increased, through Pl::Tn5 lac mutagenesis, were used to isolate genes responsible for fungal inhibition on PDA. Two clones were selected from the partially EcoR1-digested genomic library of the wild-type strain by probing with genomic flanking sequences of each mutant. We have isolated a 20-kb EcoR1 genomic DNA fragment from this strain that contains genes involved in hyphal growth inhibition of P. capsici on PDA. Subcloning and expression analysis of the above DNA fragment identified a 8-kb region which was necessary for antifungal activities. A 8-kb HindⅢDNA fragment covers three genomic loci inserted by Tn5 lac in each mutant. This suggested that all genes which are related to antifungal activities might be clustered in simple forms of at least 5-8 kb sizes.
본 연구는 국내 고추 주산지의 P. capsici의 균주에 대한 병원성과 균주별 역병 저항성 유전 양식을 구명하고자 수행하였다. 이병성 재료 '#308'과 역병 저항성 재료 'CM334' 및 이들의 $F_1$, $F_2$ 그리고 'Kataguma'(Sakata Korea) 고추 총 5종의 공시 재료에 이천, 음성, 부안, 임실, 영양 지역에서 수집한 P. capsici 각각의 균주와 국립농업유전자원센터에서 분양받은 PA-159(KACC No. 40482)를 포함하여 총 6종의 고추 P. capsici 균주를 사용하여 접종하였다. 접종 농도는 $1{\times}10^5spores/ml$로 관주 접종하였고 이들의 기내 특성, 이병률, $F_2$ 후대 집단의 역병저항성 분리 기대비를 분석하였다. 이병성 재료 '#308'과 저항성 'CM334', $F_1$의 비분리세대는 균주별 군내 비교에서는 각각 고추 역병의 발병도는 4.94-5.00, 1.00-1.07, 1.01-1.08을 보여 P. capsici 균주별 군내 비교에서 공시재료간 역병 저항성 차이는 명확히 구분할 수 있다. 또한 $F_2$ 분리세대의 역병 발병도의 경향은 1.79-2.31을 보여 P. capsici 군내 비교의 차이가 없고 저항성과 이병성 재료간에 유의한 차이를 보여 본 연구에서 사용된 6종의 P. capsici 균주 모두 역병 저항성 검정을 위한 균주로 활용 가능한 것으로 나타났다. 하지만 $F_2$ 분리세대의 균주별 군간 비교에서 PA-159 균주를 중심으로 이천 균주, 부안 균주, 임실 균주가 포함된 집단과 이보다 높은 병원성을 지닌 영양 균주와 음성 균주로 구분되었다. 각 균주별 $F_2$ 세대의 역병 저항성에 대한 분리 기대비를 분석하였는데, PA-159 균주는 3:1 또는 9:3:3:1의 분리비를 보여 1-2개의 유전자가 관여하는 것으로 나타났다. 반면 음성 균주와 영양 균주는 11:5, 이천 균주는 12:3:1의 분리비를 보여 유전자간 상호작용이 있는 것으로 나타났다.
고추역병균(Phytophthora capsici)에 대한 N-phenylbenzenesulfonamide 및 N-phenyl-2-thienylsulfonamide 유도체(1-37)들의 살균활성에 관한 3차원적인 정량적 구조와 활성과의 관계(3DQSARs)들을 비교 분자장 분석(CoMFA)과 비교분자 유사성 지수분석(CoMSIA) 방법으로 각각 검토하였다. CoMFA(2) 모델($r^2_{cv.}(q^2)$ = 0.692 및 $r^2_{ncv.}$= 0.965)이 CoMSIA(2) 모델($r^2_{cv.}(q^2)$ =0.796 및 $r^2_{ncv.}$= 0.958)보다 상관성과 예측성이 양호하였다. 최적의 CoMFA(2) 모델에 따른 살균활성은 분자의 입체장과 정전기장에 의존적이었다. 또한, CoMFA(2) 모델의 등고도 분석 결과로부터 살균활성의 63%가 입체적으로 큰 S-phenyl 고리의 meta-치환기($R_1$) 그리고 나머지 살균활성의 32.9%가 양하전을 띄는 N-phenyl 고리의 $R_4$-치환기와 S-phenyl 고리의 para-치환기($R_1$)에 기인하는것으로 예측되었으며 이 같은 사실에 기초하여 일련의 고활성 화합물, $R_1$ = 3-decyl 치환체 ($pred.pI_50$ = 5.88) 등이 예측되었다.
본 연구에서는 기 선발한 Enterobacter asburiae ObRS-5 균주를 1×108 cfu mL-1 농도로 고추에 관주 처리했을 때 Phytophthora capsici에 의한 고추역병을 74.6% 방제하는 효과가 있었다. E. asburiae ObRS-5 균주에 의한 고추역병 방제 메커니즘을 확인하기 위해 고추의 PR1, PR4 및 PR10 유전자를 특이적으로 증폭하는 프라이머를 이용하여 quantitative PCR을 수행하였다. 그 결과 E. asburiae ObRS-5 균주를 처리한 고추에서 대조구와 비교하여 상기 세 가지 유전자의 발현이 모두 높은 수준을 유지하였다. 또한 E. asburiae ObRS-5 균주는 고추의 생육을 억제하지 않으면서 ISR 반응을 유도하는 것으로 나타났다. 이러한 결과를 통하여 P. capsici이 침입할 때 E. asburiae ObRS-5 균주가 매개하는 ISR 메커니즘을 통해 Phytophthora 역병의 제어가 가능한 것으로 사료된다.
The biocontrol agent Serratia plymuthica A21-4 readily colonized on the root of pepper plant and the bacterium moves to newly emerging roots continuously. The colonization of A21-4 on the pepper root was influenced by the presence ofPhytophthora capsici in the soil. When P. capsici was introduced in advance, the population density of A21-4 on the root of pepper plant was sustained more than $10^6$ cfu/g root until 3 weeks after transplanting. On the other hand, in the absence of P. capsici, the population density of A21-4 was reduced continuously and less than $10^5$ cfu/g root at 21 days after transplanting. S. plymuthica A21-4 inhibited successfully the P. capsici population in pepper root and rhizosphere soil. In the rhizosphere soil, the population density of P. capsici was not increased more than original inoculum density when A21-4 was treated, but it increased rapidly in non-treated control. Similarly, the population density of P. capsici sharply increased in the non-treated control, however the population of P. capsici in A21-4 treated plant was not increased in pepper roots. The incidence of Phytophthora blight on pepper treated with A21-4 was 12.6%, while that of non-treated pepper was 74.5% in GSNU experimental farm experiment. And in farmer's vinyl house experiment, the incidence of the disease treated with the fungicide was 27.3%, but treatment of A21-4 resulted in only 4.7% of the disease incidence, showing above 80% disease control efficacy.
Kim, Min-Jeong;Shim, Chang-Ki;Kim, Yong-Ki;Jee, Hyeong-Jin;Hong, Sung-Jun;Park, Jong-Ho;Han, Eun-Jung
The Plant Pathology Journal
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제29권1호
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pp.87-92
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2013
This study was conducted to determine the Phytophthora rot resistance of 514 accessions of watermelon germplasm, Citrullus lanatus var lanatus. About 46% of the 514 accessions tested were collections from Uzbekistan, Turkey, China, U.S.A., and Ukraine. Phytophthora capsici was inoculated to 45-day-old watermelon seedlings by drenching with 5 ml of sporangial suspension ($10^6$ sporangia/ml). At 7 days after inoculation, 21 accessions showed no disease symptoms while 291 accessions of susceptible watermelon germplasm showed more than 60.1% disease severity. A total of 510 accessions of watermelon germplasm showed significant disease symptoms and were rated as susceptible to highly susceptible 35 days after inoculation. The highly susceptible watermelon germplasm exhibited white fungal hyphae on the lesion or damping off with water-soaked and browning symptoms. One accession (IT032840) showed moderate resistance and two accessions (IT185446 and IT187904) were resistant to P. capsici. Results suggest that these two resistant germplasm can be used as a rootstock and as a source of resistance in breeding resistant watermelon varieties against Phytophthora.
A disease causing fruit rot and leaf and vine blight on watermelon was found in Euseong in July, 1991 and in Bonghwa, Kyungpook province in August, 1993. Abundant zoosporangia characteristics of Phytophthora capsici were formed on the surface of the infected fruits. The zoosporangia were ovoid to ellipsoid, tapering to the base and with conspicuous papilla. The fungus isolated from the infected fruits was pathogenic on seedlings of watermelon, pumpkin, and pepper. The morphological characteristics and host range agreed with those of P. capsici. The watermelon disease caused by P. capsici was reported long time ago in Japan and America but rot yet in Korea. Thus, the disease on watermelon caused by P. capsici is reported as a new record in Korea.
Objectives: This experiment was carried out to elucidate the effect of discharged water on the disinfection of $Phytophthora$$capsici$ and evaluate the water characteristics. Methods: The dielectric barrier discharges (DBD) plasma reactor system used in this study consisted of a plasma component [discharge, ground electrode and quartz dielectric tube], high voltage source, and air supply. The effects of water characteristics such as pH, ORP and conductivity and the disinfection effect of discharged water were investigated. Results: Experimental results showed that in the process of discharge, the pH decreased, whereas ORP and electric conductivity increased. When the discharge time was 30 min, $Phytophthora$$capsici$ of 2.94 log was disinfected within 300 seconds. Disinfection performance of stored discharged water was maintained for three days; however the disinfection effect vanished after five days. When $Phytophthora$$capsici$ was injected into the discharged water, the disinfection effect decreased after two days. Conclusions: It is considered that the main disinfection parameters of the discharged water were chemically active species such as $H_2O_2$ and $O_3$ and high ORP.
고추역병균(Phytophthora capsici)의 성장을 in vitro에서 저해하는 길항균 Bl4를 한국토양으로부터 분리 동정하여 Enterobacter속임을 밝혔고 Pl::Tn5 lac에 의해 transposon돌연변이를 유기하여 길항력 강화주와 약화주들의 염색체내에 Tn5 lac이 각기 상이한 위치에 무작위로 삽입되었음을 southern hybridization에 의해 확인하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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