쌀을 이용한 새로운 probiotic food를 개발하기 위한 기초연구로 본 연구를 수행하였다. 먼저 호화시킨 현미 현탁액에 $\alpha$-amylase, $\alpha$-amylase와 glucoamylase를 처리한 후 동결 건조하여 가수분해도가 상이한 현미 분해물을 제조하였다. 김치에서 분리한 유산균인 Ln. mesenteroides KC51 균주를 4%(w/w) 현미 분해물 현탁액에 진탕배양하면서 현미의 가수분해도가 산의 생성, 균의 생육과 phytate의 분해에 미치는 영향을 조사하였다. 동시에 효소를 처리하지 않은 현미 분말 현탁액을 대조군으로 비교하였다. 배양액의 pH는 현미의 가수분해도가 증가함에 따라 감소하였으며 $\alpha$-amylase와 glucoamylase로 분해한 경우 접종 후 15시간에 pH 3.41로 급속히 감소하였다. 이때 배양액에 젖산과 초산이 각각 0.327%와 0.200% 함유되어 있었다. 적정산도의 변화도 pH의 변화와 유사하게 가수분해도에 비례하여 증가하였다. 모든 현미의 분해물에서 Ln. mesenteroides KC51 균주는 접종 후 6시간에 $4.0\sim7.2{\times}10^8$ CFU/g 수준까지 증가한 후 생육에 큰 변화는 없었으나 대조군에서는 접종 9시간 후 생균수가 다소 감소하였다. 항영양인자인 phytate의 함량은 현미가수분해도가 증가할수록 감소하여 $\alpha$-amylase와 glucoamylase로 분해하여 가수분해도가 가장 높은(48.2%) 경우 phytate의 약 50%가 분해되었으며 $\alpha$-amylase로 처리하여 가수분해도가 낮은(22.5%) 경우에서는 거의 분해되지 않았다. Ln. mesenteroides KC51 균주 배양액의 저장성은 $4^{\circ}C$에서 14일간 저장 후 pH와 적정산도, 생균수는 거의 유사하였다.
Background: The aim of this study was to compare a novel mannose receptor-binding agent(Technetium-99m human serum albumin, $^{99m}Tc$-MSA) with $^{99m}Tc$-phytate for sentinel node mapping in patients with esophageal cancer. Material and Method: Twenty patients with clinical stage T1N0m0 or T2N0M0 esophageal cancer that were candidates for esophagectomy were enrolled. Endoscopic injection of $^{99m}Tc$-MSA or $^{99m}Tc$-phytate was administered at the peri-tumor region before surgery in 10 patients. The radioactive lymph nodes were identified with a handheld gamma probe after lymph node dissection. Results: The patient's age and the sex ratio of both groups were similar. The clinical stage, tumor location, and operative technique did not differ. The total number of dissected lymph nodes did not differ ($28.5{\pm}9.12$ in MSA group, $32.2{\pm}11.24$ in phytate group, p=0.430). The sentinel node was identified in all cases in both groups. The number of sentinel nodes per patient was $2.7{\pm}1.57$ in the MSA group, which was significantly greater than the $1.7{\pm}0.88$ in the phytate group (p=0.036). Five out of 20 patients whose sentinel nodes could be identified had metastases; however, neither group had any false-negative results for sentinel node identification. Conclusion: Sentinel nodes were detected more frequently with MSA than with phytate.
Sundaramoorthy, Jagadeesh;Seo, Yean Joo;Park, Gyu Tae;Lee, Jeong-Dong;Park, Soon-Ki;Seo, Hak Soo;Song, Jong Tae
Journal of Applied Biological Chemistry
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제59권3호
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pp.261-264
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2016
In soybean (Glycine max (L.) Merr.) seeds, phosphorus (P) is primarily stored in the form of phytate, which is generally indigestible by monogastric animals such as human, pig, poultry, and fish. Thus, this study was conducted to isolate soybean mutants with high available P. Inorganic P content was assessed in a total of 1,266 ethyl methanesulfonate (EMS) $M_4$ lines from the Pungsannamul cultivar. Among the tested lines, four EMS lines (PE379, PE432, PE2205, and PE2503) showed higher mean inorganic P ($1.21-1.56gkg^{-1}$) than did the Pungsannamul cultivar ($0.90gkg^{-1}$). Additionally, six EMS lines (PE718, PE828, PE1466, PE1552, PE3378, and PE3386) showed lower mean inorganic P ($0.38-0.60gkg^{-1}$). The high inorganic P mutants isolated in this study will be further investigated for phytate and total P levels. Moreover, the high and low inorganic P lines will be utilized in a future study of the biochemical pathway of phytate.
A high dietary oxalate intake may lead to calcium oxalate (CaOx) kidney stones in the gastrointestinal tract. Most soy foods contain high concentrations of oxalate and/or phytate. This study analyzed the changes in oxalate (Ox), phytate ($InsP_6$), and calcium (Ca) during soymilk processing from the seeds of Korean recommended soybean cultivars (cvs). The contents of Ox, $InsP_6$, and Ca in 21 cvs ranged from 14, 108, and 148 to 231, 279, and 246 mg/100 g of dry seed, respectively. Seven cultivars were selected from the 21 cvs by the distributions of Ox, $InsP_6$, and Ca. Then, each contents of soymilk prepared from the 7 cvs were determined. All contents were lower in soymilk than in seeds, but the Ox to $InsP_6$ ratios changed from varying ratios (0.1-0.8) to normal ratios (0.8-1.0) in all cvs except 'Paldalkong'. Consequently, during soymilk processing, the Ox content was decreased and the $InsP_6$ content was remained higher than the Ox content although the Ox was likely to be less reductive than the $InsP_6$. These results may provide better information for minimizing the risk of formation of Ox kidney stones due to consumption of soy products.
Interleukin-2 (IL-2)는 많은 immunoenhancing lymphokine의 한 종류로서 lymphokine activiated killer (LAK) cell의 생성을 자극시켜 흑종의 종양세포를 죽인다고 알려져 있다. 최근 간종양에서 비장동맥 또는 간동맥으로 투여한 IL-2가 비장의 임파계를 자극하여 LAK cell을 생성하여 어느정도효과가 있음이 밝혀지면서, 여러가지의 투여 방법이 시도되고 있다. 그러나 각종의 투여 방법에서 실제로 투여한 IL-2의 인체내 분포에 관한 연구는 없다. 저자들은 비정맥과 간문맥에 이상이 없는 증례의 비동맥에 IL-2와 $^{99m}Tc-phytate$ 혼합물을 투여하고, IL-2의 생체에서의 비장과 간에 어떻게 분포하는지 알아보기 위하여 $^{99m}Tc$의 radioactivity를 계측하여 보았다. 6예의 간세포암과 3예의 위암으로부터의 전이성간암에서 동맥조영술적방법을 이용하여 초선택적 비장동맥에 투여한 IL-2와 $^{99m}Tc-phytate$ 혼합물이 비장 27%, 간73%의 분포를 보여 비장을 거쳐온 $^{99m}Tc$의 방사능이 간에 많이 침착함을 확인하였고 간과 비장이외의 부위 즉 골수, 복수 또는 폐장이나 늑막에는 전혀 방사능 분포가 없음을 알 수 있었다. 따라서 비정맥이나 간문백에 이상이 없는 증례에서 IL-2의 비장동맥 투여는 목적하는 바 IL-2의 생체내 분포를 이룩할 수 있을 것으로 사료된다.
Dos Santos, Tiago Tedeschi;Srinongkote, S.;Bedford, M.R.;Walk, C.L.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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제26권2호
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pp.227-232
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2013
Phytate is not only an unavailable source of phosphorus (P) for broilers but it also acts as an anti-nutrient, reducing protein and mineral absorption, increasing endogenous losses and reducing broiler performance. The objective of this study was to investigate the anti-nutritional effects of phytate by including high levels of phytase in diets not severely limited in available P. A total of 768 male Arbor Acres broilers were distributed in six treatments of eight replicate pens of 16 birds each consisting of a positive control diet (PC), positive control with 500 FTU/kg phytase, negative control (NC) diet with lower available P and calcium (Ca) levels and the same NC diet with 500, 1,000 or 1,500 FTU/kg phytase. Body weight gain (BWG), feed intake (FI), feed conversion ratio (FCR) and mortality were determined at 21 and 35 d of age while foot ash was determined in four birds per pen at 21 d of age. FI, FCR and foot ash where not affected by the lower mineral diets at 21 d of age nor by the enzyme inclusion but broilers fed lower Ca and available P diets had lower BWG. At 35 d of age no difference was observed between broilers fed the positive or NC diets but broilers fed 500, 1,000 and 1,500 FTU/kg on top of the NC diet had better FCR than broilers fed the positive control diet. When compared to birds fed a diet adequate in P, birds fed the same diet included with 500, 1,000 and 1,500 FTU/kg of phytase in marginally deficient available P and Ca diets had an improvement of performance. These results support the concept that hydrolysing phytate and reducing the anti-nutritional effects of phytate improves bird performance on marginally deficient diets that were not covering the P requirement of birds.
본 연구는 반추가축에 있어서 단백질 Bypass처리가 광물질의 체내이용에 미치는 영향을 조사하기 위하여 실시하였다. 반추위 Cannula를 장착한 면양 3두에 나이론백 실험방법을 이용하여 사양시험을 실시하였다. 시험사료로는 대두박과 채종박을 사용하였으며, 본 시험사료에 가열($133^{\circ}C$, $143^{\circ}C$) 처리와 포름알데이드(0.3%, 0.5%)처리를 하고 나이론 백을 사용하여 반추위내에서 배양한 후 Phytate와 P, Ca, Mg, Cu, Fe, Cu에 대해 각 항목의 반추위내의 소실율을 구하였다. 시험결과에 의하면 대두박과 채종박에 대한 단백질 Bypass처리는 Phytate를 포함한 모든 광물질에서 단백질 Bypass 처리의 강도가 높아짐에 따라 반추위내의 각 광물질의 소실율이 유의하게 감소하였다(P<0.05). 그리고 각 광물질간의 비교에서 Cu, Zn, Ca의 소실율이 타광물질에 비하여 낮은 경향을 보여 특히 본 광물질의 이용성 감소가 예상된다. 이상의 결과로 반추가축에 있어서 이용률이 매우 높은 것으로 알려진 Phytate는 단백질 Bypass처리를 함으로써 Phytate와 결합되어 사료내에 존재하는 광물질의 반추위내의 분해 율을 감소시켜 반추가축에 있어서의 광물질 부족 및 분으로의 배설 증가로 인한 토양의 오염증가가 예상된다.
본 연구는 참깨 단백질을 새로운 식품 단백질자원으로 이용하기 위한 목적으로 여러 pH조건에 따라 제조된 참깨 농축단백질의 성분을 비교.검토하였다. pH 2.0, 7.0, 9.0, 11.0에서 각각 추출된 농축단백질의 단백질 함량은 60.57, 67.72, 79.50, 83.44%로 추출 pH가 증가함에 따라 높은 단백정 함량을 나타내었다. 단백질의 추출은 phytate 항량을 상당량 제거시켰으며, 특히 phytate의 용해도가 낮은 pH 11 .0에서 추출된 농축단백질의 phytate 함량은 0.22%로 94.8%의 가장 높은 제거율을 나타내었다. 그러나 pH 2.0에서 추출한 농축단백질의 phytate 함량은 탈지 참깨분말과 비슷한 수준을 나타내었다. 모든 시료에서 가장 않은 양이 검출된 무기질은 칼슘이었다. 농축단백질의 무기질 함양을 보면 Ca, Mg, Zn, Fe의 함량은 pH 2.0에서 추출한 농축단백질에서 가장 높은 반면 Cu는 pH 11.0에서 추출한 농축 단백질에 가장 많이 함유되어 있었다. Na 함량은 모든 농축단백질에서 비슷한 수준을 보였고, Cd과 Pb은 검출되지 않았다. 참깨 농축단백질의 색도는 탈지 참깨 분말에 비해 약간 짙은 경향을 보였으며, 중성 (pH 7.0) 에서 추출한 농축단백질의 색도가 가장 밝게 나타났으며, 추출 pH가 낮은 단백질 일수록 밝은 색을 나타내었다.
토양으로부터 phytate 분해능이 뛰어난 phytate를 생산하는 균주를 분리 동정한 결과 Escherichia coli로 동정되었고, E. coli WC7으로 명명하였다. 이 균주가 생산하는 phytase를 ammonium sulfate 침전, Phenyl-Sepharose, DEAE-Sepharose, CM-Sepharose, Resoure S, Mono S 컬럼 크로마토그래피를 이용한 분리정제를 수행하여 정제도 1,250 배, 수율 30%로 정제하였고 640 Unit/mg의 비활성을 얻었다. 또한 정제된 phytase는 SDS-PAGE에서 분자량 45kDa인 단일 subunit로 이루어진 단일효소임을 확인하였다. E. coli WC7 phytase의 최적 pH는 5.0, 최적 온도는 $60^{\circ}C$였으며, pH 2.0-12까지 안정하였다. 열안정성에서는 $60^{\circ}C$이상에서 급격한 활성의 감소를 보여 초기 활성의 20% 활성만을 나타내었다. Phytase의 N-말단 아미노산 서열은 Ser-Glu-Pro-Clu-Leu-Lys-Leu-Glu-Ser-Val-Val이었으며 이는 E. coli 유래의 pH 2.5 acid phosphatase와 아주 큰 유사성을 보였다. S. coli WC7 phytase의 유전자를 확보하기 위해 E. coli acid phosphatase의 DNA sequence를 바탕으로 한 primer들을 이용하여 PCR 클로닝을 수행하였으며 증폭된 PCR fragment를 pUC19 벡터에 클로닝 하고 DNA 염기서열을 결정하였다. 그 결과 1.2 kbp의 WC7 phytase 유전자의 ORF를 확인하였으며 432개의 아미노산으로 이루어진 분자량 44,716 Da의 단백질을 확인 할 수 있었다. 대부분의 acid phosphatase 효소들의 active site라고 추정되는 active site motif인 RHGXRXP가 N-terminal 쪽에 존재하고 있었다. pUEP를 이용하여 E. coli XL1-Blue에서 phytase를 발현시켰을 때 효소의 생산량이 17.5 U/ml로서 원균주의 23배 활성을 가졌으며,효소의 비활성 및 pH 안정성 측면에서 높은 산업적 이용가능성을 볼 때 사료첨가제 효소로의 개발을 기대할 수 있을 것이라 판단된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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