Phytase (myo-inositol hexakisphosphate phosphohydrolase: EC 3.1.3.8) hydrolyzes phytic acid (myo-inositol hexakisphosphate) to myo-inositol and monophosphates. In order to obtain phytase producing bacteria, many samples were collected from various soils. Among thirty-five phytase-producing strains, YH100 showed the highest phytase activity. In order to identify the selected YHlOO strain, the morphological and physiological characteristics were examined according to the method of Bergey's manual by 168 rRNA sequence, cellular fatty acids profile, O+C contents and physiological test using API 20E kit. The strain YH100 identified to be a genus of Enterobacter cloacae and was named as Enterobacter cloacae YHlOO. Optimum medium for the phytase production by the Entemhacter c!o([we YHlOO was composed of 2.0%(w/v) glucose, 1.0%(w/v) peptone, 1.0%(w/v) beef extract, 0.1 %(w/v) KCI. and 0.1 %( w/v) sodium phytate.
Two isolates of C-7 and S-34, which were identified as Bacillus licheniformis and Enterobacter cloacae, were shown the highest phytase productivities among the 23 and 44 strains isolated from the fermenting corn and soybean meals, respectively. The phytase productivity with B. lichenifrmis was maximized at pH 6.0, 3$0^{\circ}C$ after 5 days of incubation and E. cloacae was maximized at pH 1.0, 35$^{\circ}C$ after 5 days of incubation. The bacterial phytase productivity with each bacterium was significantly increased or decreased by the addition of various concentrations of 6 carbon and 7 nitrogen sources including glucose, sucrose, KNO$_3$, and NH$_4$Cl.
An experiment was conducted to study the production performance of broiler breeder females (25 to 40 weeks of age) fed either reference diet or low non-phytate phosphorus (NPP) diet with or without microbial phytase (500 FYT/kg) supplementation. A weighed (160 g/b/d) quantity of feed from each diet was offered daily to 40 replicates of one bird each housed in California type cage having individual feeders. Each cage was considered as a replicate. A continuous 16-h light per day was provided using incandescent bulbs. Body weight, egg production, egg weight, feed per egg mass, egg specific gravity, egg breaking strength, shell thickness, tibia ash and serum Ca and protein concentrations were not affected by reducing the NPP level from 0.30 to 0.18% in the broiler breeder diet. Supplementation of phytase (500 FYT/kg) enzyme to the diet containing 0.18% NPP had no added advantage on any of the above production parameters. The serum inorganic P was increased significantly (p<0.05) by either enhancing the NPP content from 0.18 to 0.30% or supplementing phytase @500 FYT/kg to the diet containing low P which were found comparable. Retention of Ca and P was positive on all the diets. P retention decreased significantly (p<0.05) with either increase in NPP content or phytase supplementation in the diet. Neither NPP nor phytase supplementation influenced bone mineralization in terms of tibia ash and strength. The hatchability was not influenced by either increasing the NPP content or supplementing the enzyme phytase. Similarly, the P concentration in the egg yolk and day old chick, day old and 14th day body weight and leg score was not altered by increasing the level of NPP or supplementing phytase enzyme. The mortality was within the normal limits in all the three dietary groups. Thus, it can be concluded that 0.18% NPP (288 mg NPP intake/b/d) in the broiler breeder' diet is adequate in sustaining the optimum performance from 25 to 40 wks of age. Enhancing the NPP content or supplementation of phytase (500 FYT/kg diet) to diet containing 0.18% NPP had no added advantage on performance.
An 8 week feeding trial was conducted with 864 ISA Brown laying hens, 48 weeks old, to determine if microbial phytase $(Natuphos^{(R)})$ supplementation can reduce non-phytate phosphorus (NPP) level in laying diets. The experiment consisted of four dietary treatments: T1, control diet with 0.26% NPP (0.55% total P) wand no supplementary phytase; T2, 0.21% NPP (0.50% total P) diet with 250 U of phytase/kg of diet; T3, 0.16% NPP (0.45% total P) diet with 250 U of phytase/kg of diet; and T4, 0.11% NPP (0.40% total P) diet with 250 U of phytase/kg of diet. T3 showed the highest egg production and egg weight and the lowest feed conversion while T4 gave the lowest egg production and the highest feed conversion and mortality. Daily feed consumption ranged from 130.4 g (T4) to 132.7 g (T2). T1 and T2 were not significantly different in the production parameters. Eggshell strength, egg specific gravity, and eggshell thickness were not significantly different among treatments. However, broken egg ratio was significantly lower in T2 and T4 than in T1. Retentions of Ca, P, Mg, and Cu were greater in phytase supplemented treatments (T2, T3, and T4) than the control (T1), and those in T3 and T4 were greater than in T2. Excretions of P in phytase supplemented treatments (T2, T3, and T4) were significantly (p<0.05) smaller than in T1 but excretions of N were not significantly different among the treatments. Contents of ash in tibiae were not significantly affected by treatments, but contents of Ca, P, Mg, and Zn was increased and that of Cu decreased by phytase supplementation. It is concluded that the NPP concentration in the diet of Brown layers consuming about 130 g/d of feed can be safely lowered from 0.26% (0.55% total P) to 0.16% (0.45% total P). The excretion of P was reduced by the inclusion of 250 U phytase/kg of diet.
Three strains among 8 isolates from the fermented chungkookjang were shown the strong phytase productivities. The phytase activities in manufacturing chungkookjang with thrse bacteria were maximized after incubating at 35-$40^{\circ}C$, pH 7.0 for 5 day. The contents of same amino acids and riboflavin were increased in chungkookjang manufactured with these phytase-producing bacteria and the rate of phytic acid degradation was much higher in chungkookjang manufactured with a single or mixed cultures of these bacteria than in traditional chungkookjang.
A bacterial strain producing high level of an extracellular phytase was isolated from cooked rice and identified as a strain of Bacillus sp. and designated as Bacillus sp. KHU-10. Optimum culture conditions were investigated for the maximum productivity of phytase by Bacillus sp. KHU-10. 1.0% Maltose and 1.0% peptone with 0.5% beef extract were the best carbon source and nitrogen source, respectively. The addition of $CaCl_2$, stimulated the enzyme productivity with concentration between 0.01% and 0.2%, in the medium. Although sodium phosphate increased the cell mass, the enzyme activity decreased. Calcium phytate and wheat bran containing phytate did not enhance the enzyme production. Under the optimum medium, the production of the phytase reached the highest level of 0.2 unit/ml after 4 days of incubation.
Biotechnological phytase preparations are commercially available and are currently used in animal feeding. However, thermostability constraints, low yields, and the high cost of the enzyme have limited its use. This study represents a new perspective for the food enzyme market. The research screened thermostable yeast strains for their ability to produce phytase. The screening was carried out with a gradual increase in temperature ($30-48^{\circ}C$). Sixteen strains (1 strain identified as Saccharomyces cerevisiae) maintained the ability to produce phytase at $48^{\circ}C$ and their phytase activity was confirmed using 2 phytase assay methodologies. The yeast strains tested in this study seem to be potential efficient producers of phytase, indicating a possible new source of thermostable phytase of commercial interest, particularly that from S. cerevisiae.
Objective: This study was performed to investigate the effects of supplementing sesame seed meal (SSM) with phytase and lysine on performance, egg quality, blood biochemical and antioxidant status of laying hens. Methods: A total of 960, 56-wk-old laying hens were divided into 12 dietary groups with eight replicates per group (10 birds per replicate). A completely randomized design with factorial arrangement 2×3×2 consisted of two levels of lysine supplement (0% and 10% over requirement), three SSM levels (0%, 10%, and 20%) with or without phytase (0 and 300 g/ton). The feeding trial lasted 10 weeks. Results: Birds fed diets with 10% SSM had higher feed intake than groups fed 0% and 20% SSM. The addition of phytase to experimental feeds, improved feed conversion ratio, increased egg weight and mass (p<0.01). Egg quality criteria was not affected by supplementing phytase; however, supplementing 300 g/ton phytase to hens diet, led to a significant (p<0.05) increase in egg shell strength. Egg yolk cholesterol and serum low-density lipoprotein cholesterol, atherogenic index and total cholesterol were decreased (p<0.01) by diet containing 20% SSM. The high-density lipoprotein cholesterol was increased (p<0.05) in serum of hens fed 20% SSM than the other groups. It was also observed that total antioxidant capacity and total superoxide dismutase content of hens fed 20% SSM was significantly higher than control group (p<0.05). Conclusion: As from results, dietary supplementation of SSM and phytase had no negative effects on laying hens performance or egg quality while improving the egg oxidative stability.
The distribution of acid phosphatase activity was investigated with 141 microorganisms from the type culture collection of Chong Kun Dang laboratory and the 41 strains isolated from natural sources. The phytase activity was detected mainly with fungal strains. A fungus isolated from soil and identified as Aspergillus niger had shown the highest phytase activity. The environmental conditions for the enzyme formation by the isolate and some properties of the enzyme were also studied. The results obtained were as follows: (1) The highest phytase production was observed when the fungus was cultivated at 28$^{\circ}C$ for 5 days in the corn starch based medium using the cells incubated at 34$^{\circ}C$ for 3 days as a seed. (2) The optimal initial pH of the culture medium was found to around 2 for the formation of phytase. (3) Sucrose was proved to be one of the most effective carbon sources tested for the enzyme production. (4) As an inorganic nitrogen source, potassium nitrate was found to give a good result in the production of phytase. (5) Synthesis of phytase was significantly increased by the supplement with 0.2 % corn steep liquor to the basal medium as an organic nitrogen source. (6) At the concentration of 40-80 mg inorganic phosphate per liter of the culture medium, the enzyme formation revealed the highest level. But as the phosphate was increased above this optimum concentration the phytase activity was drastically decreased although the cell density showed to be still increasing
The effect of germination on phytase activity in wheat NEAU123, triticale5305 and rye2 was studied in the present study. Germination significantly increased phytase activity by 2.04 times for wheat NEAU123 (3 d), 1.82 times for triticale 5305 (1 d) and 2.45 times for rye2 (1 d), respectively. It was safe for phytase in fresh malts kilned for 2 h at $40^{\circ}C$. Phytase in cereal seeds had strong heat stability. There was no loss of phytase activity in cereal seeds heated at $70^{\circ}C$ for 1 h, a little loss (${\leq}$5.46%) at $80^{\circ}C$ or $90^{\circ}C$. Even heated at $100^{\circ}C$, the phytase activity in wheat NEAU123, triticale5305 and rye2 remained 89.47%, 86.44% and 104.64%, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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