In the previous paper (Kim et al., Glycoconjugate Journal 16, 247-252, 1999), heteropolysaccharides from Korean medicinal plant, Phellodendri cortex (Hwangbek) showed a poten B-Iymphocyte-stimulating activity in a system using polyclonal antibody forming cells in C57BL/6XC3H mice at dosages of 2-10 mg. In a series of biolgical active polysaccharides from natural medicinal plants, the polysaccharide fractions were isolated and purified from Phellodendron chinese SCHNEID, and antitumor activities were examined at dosages of 2, 5 and 10 mg/100 g. F-7 and F-8 showed the highest tumor inhibitory activities (inhibition ratio 96.4 and 98.2% in 2 mg/100 g), and in dose of 5 mg/100 g, the inhibitory ratios were 95.3 and 97.5%, respectively. Furthermore, 10 mg/100 g of intraperitoneal (i.p.) injection gave 97.3 and 98.7% of inhibition. In oral administration, the inhibitory activities were not markedly observed, indicating that the polysaccharides are directly acting to immune system. When the effects on TS and TK activities were determined, TS activities in the F-2 and F-7-treated mice were markedly suppressed to 73.7% and 79.5% of that in the control (p<0.01), while there was little difference in TK activity with a slight decrease in F-2 only. However, in i.p. injection, TS activities in the F-2, F-5, F-7 and F-8-treated mice were markedly suppressed to 83% to 85% of that in the control (p<0.01). Furthermore, there was also significant differences in TK activities in F-2, F-5, F-7 and F-8-treated mice (p<0.05). Therefore, polysaccharide fraction F-8 was further purified to active fractions of F-9 and F-11 by gel permeation chromatography using TSK Gel HW50S. The purified polysaccharides of F-9 and F-11 were composed of GlcNAc (47.3%), Gal (24.7%) and Man (28.0%). These results clearly indicated that the i.p. injection is much effective to suppress tumor growth than oral administration.
황백(Cortex Phellodendri: CP)은 황벽나무(Phellodendron amurense)의 건조된 수피로부터 얻어진다. 이 수피는 한국의 전통 한약제로서 설사, 황달, 무릎과 발의 통증, 요도관 및 피부 감염증에 폭넓게 사용되어 왔다. 이들 기능성 성분의 분리 및 정제는 박층 크로마토크래피, 컬럼 액체 크로마토크래피 및 HPLC와 같은 여러 분석법들이 동양의 약초연구에 이용되어 왔다. 본 연구는 CP로부터 berberine을 분리하기 위해 향류분배 크로마토크래피법(CPC)으로 효과적으로 수행하였다. 두 용매의 CPC 최적조성은 n-butanol: acetic acid: water(4:1:5 v/v/v)이었다. 이동상의 유속은 1,000 rpm 회전력에서 상승법으로 분당 3 mL 속도로 전개시켰다. CPC에서 분리된 분획분은 prep-HPLC로 정제하였다. $^1H$-NMR 스펙트럼은 4.10과 4.20 ppm에서 $3H(-OCH_3)$, 6.10 ppm에서 2H의 ($-OCH_2O-$) proton signal의 공명이 관찰되었다. 2개의 방향족 proton은 이중결합 패턴을 보였다. H-11과 H-12 doublet은 각각 7.98과 8.11에서 나타났다. $^{13}C$-NMR 스펙트럼에서는 C2와 C3의 methylenedioxy group($-OCH_2O-$), C9과 C10에 methoxy group($-OCH_3$)이 4개의 치환된 형태로 보였다. 분리 정제된 berberine의 화학구조는 $^1H$, $^{13}C$-NMR, ESI-MS 데이터 분석으로 확인하였다.
황백피와 두릅나무(AP)의 혼합 추출물이 당뇨에 미치는 영향을 알아보기 위한 실험으로 streptozotocin으로 당뇨가 유도된 생쥐에게 혼합 추출물을 5일간과 10일간 복강투여하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 50, 150, 250mg/kg B.W. AP추출물 투여군(DI1, DI2, DI3)의 몸무게는 당뇨 대조군(DIC)에 비해 유의적 (p<0.05)인 증가를 보였으며 , 간과 췌장의 무게는 DIC군에서 증가하였으나 AP추출물의 투여로 감소되었다. 특히, 10일 복강투여군에서 장기무게의 감소정도는 5일 복강투여 군에 비해 현저하였다. 혈장 포도당수준의 변화는 AP 추출물의 투여로 유의적 (p<0.05)으로 감소하였으며 감소정도는 AP추출물의 양에 비례하는 수준이었다. 혈장 cholesterol(total, LDL, VLDL)과 TG수준은 AP추출물의 투여로 감소되었으나(p<0.05), 생쥐에는 choles-teryl ester transfer protein이 없어 HDL cholesterol의 수준은 AP추출물의 투여 후에도 변화를 보이지 않았다. TBARS 함량은 당뇨 대조군이 정상군에 비해 증가하였으나 AP추출물의 투여 후 유의적 (p<0.05)으로 감소하였다. 이러한 감소정도는 10일 복강투여군에서 현저하게 나타났으며 특히 췌장조직에서 효율적인 감소 효과를 보였다. GPx의 활성도는 DIC군에서 유의적 (p< 0.05)으로 증가하였으며 AP추출물의 투여로 감소되었다. GR의 활성도는 유의적이지 않으나 GPx와 같은 양상을 보였다. 이상의 결과에서 황백피와 두릅나무추출물은 streptozotocin으로 당뇨를 유도한 생쥐에서 몸무게의 증가, 혈당 및 혈중 지질수준의 개선, 항산화 효과를 지니고 있음이 추정되었으며, 차후 이들AP추출물의 subfraction을 통한 계속적인 연구로 혈당강하 효과의 확인 및 효과 성분의 분리에까지 연구범위를 넓힐 수 있기를 기대한다.
대한약학회 2003년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.1
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pp.270.1-270.1
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2003
Enzyme-linked immunoassay system using monoclonal antibody (MAb) has become an important methodology for the quantitative and qualitative analysis of drugs and phytochemical compounds having small molecular weight. In this study, monoclonal antibodies against berberine, one of main constituent of Phellodendron amurense, Coptis japonica and Corydalis turtschaninovii, were produced. (omitted)
수목종자(樹木種子)의 포장발아율(圃場發芽率)을 높이는 종자전처리방법(種子前處理方法)을 찾기 위하여, 황벽나무를 비롯한 5수종의 종자(種子)에 대해 종자전처리(種子前處理)에 따른 포장발아율(圃場發芽率)을 조사(調査) 비교(比較)하여 얻은 주요결과(主要結果)는 다음과 같다. 1. 탱자 및 물푸레나무의 포장발아율(圃場發芽率)은 종자전처리간(種子前處理間)에 1% 유의수준(有意水準)에서, 황벽나무는 5% 유의수준(有意水準)에서 각각 통계적(統計的) 유의성(有意性)이 인정(認定)되었으며, 이들 수종(樹種)은 노천이장처리(露天理藏處理)(166 일간(日間)에서 포장발아율(圃場發芽率)이 가장 높았다. 2. 모과나무의 포장발아율(圃場發芽率)은 종자전처리간(種子前處理間)에 1% 유의수준(有意水準)에서 통계적(統計的) 유의성(有意性)이 인정(認定)되었으며, 냉습적처리(冷濕積處理)(110 일간(日間))에서 가장 높았다. 3. 꾸지뽕의 포장발아율(圃場發芽率)은 종자전처리간(種子前處理間)에 5% 유의수준(有意水準)에서 통계적(統計的) 유의성(有意性)이 인정(認定)되지 않았다.
천연물 가운데서 항암물질을 얻을 목적으로 동양에서 오랫동안 암이나 암에 비슷한 질병의 치료에 씌여온 한약재를 물이나 유기용매로서 추출하여 검색하였다. Fischer배지에 자라는 L1210 세포에 추출물을 첨가한 다음 48시간 후에 세포수를 헤아려 생장을 50% 억제할 수 있는 추출물의 농도를 나타내는 ED$_{50}$값을 측정하였다. 물로서 추출한 38종의 한약재 가운데서 6종이 낮은 ED$_{50}$값을 나타냈다. 이들을 다시 유기용매로서 추출하므로써 ED$_{50}$값이 더욱 떨어져 NCI의 품질관리범위 치역내에 들어갔다. 항암제원으로 유망시되는 한약재로서 Cinnamomum cassia, Citrus trifoliata, Coptis japonica, Panax ginseng, Phellodendron amurense, Scutellaria baikalensis를 들 수가 있다.
We examine whether Phellodendron amurense (PA) and its major alkaloid compound, berberine (BER), improved memory defects caused by administering scopolamine in rats. Effects of PA and BER on the acetylcholinergic system and pro-inflammatory cytokines in the hippocampus were also investigated. Male rats were administered daily doses for 14 days of PA (100 and 200 mg/kg, i.p.) and BER (20 mg/kg, i.p.) 30 min before scopolamine injection (2 mg/kg, i.p.). Daily administration of PA and BER improved memory impairment as measured by the passive avoidance test and reduced the escape latency for finding the platform in the Morris water maze test. Administration of PA and BER significantly alleviated memory-associated decreases in cholinergic immunoreactivity and restored brain-derived neurotrophic factor and cAMP-response element-binding protein mRNA expression in the hippocampus. PA and BER also decreased significantly the expression of proinflammatory cytokines such as interleukin-$1{\beta}$, tumor necrosis factor-${\alpha}$ and cyclooxygenase-2 mRNA in the hippocampus. These results demonstrated that PA and BER had significant neuroprotective effects against neuronal impairment and memory dysfunction caused by scopolamine in rats. These results suggest that PA and BER may be useful as therapeutic agents for improving cognitive functioning by stimulating cholinergic enzyme activity and alleviating inflammatory responses.
황백 껍질은 황벽나무(Phellodendron amurense)의 건조된 수피로부터 얻어진다. 이 수피는 한국의 전통 한약제로서, 설사, 황달, 무릎과 발의 통증, 요도관 및 피부 감염증에 폭넓게 사용되어 왔다. 본 연구는 황벽나무의 메탄올 추출액으로부터 항균성 화합물 분리를 위해 CPC 방법으로 효과적으로 수행하였다. 두 용매의 CPC 최적조성은 n-butanol:acetic acid:water(4:1:5 v/v/v)이었다. 이동상의 유속은 1,000 rpm 회전력에서 상승법으로 분당 3 $m{\ell}$ 속도로 전개시켰다. CPC에서 분리된 분획분은 prep-HPLC로 정제하였다. 분리된 palmatine은 $^1H$, $^{13}C$-NMR, ESI-MS 데이터 분석으로 확인하였다.
We evaluated the hepatoprotective activity of crude hot-water extracts of the traditional Korean medicinal herb, Phellodendri Cortex (PC; Bark of Phellodendron amurense RUPR.), in an experimental model of hepatic damage induced by carbon tetrachloride ($CCl_4$). The serum marker of liver damage, sGOT, sGPT and sALP, were significantly decreased in the liver of the PC treated rats, compared with that of $CCl_4$ treated group. The histological observation of liver section of rats, showed the same protective effect of PC treatment. And the protective activity of PC was more significant in the post-treated group than pre-treated group. The significant decrease of malodialdehyde and increase of glutathion, catalase activity were observed in the liver homogenate of PC treated rats. Based on these findings, it is suggested that PC has potent hepatoprotective effects and the mechanism of the protection may be related to antioxidation pathways.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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