• Journal of Ginseng Research
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• 제37권3호
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• pp.324-331
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• 2013

Channels formed by the co-assembly of the KCNQ1 subunit and the mink (KCNE1) subunit underline the slowly activating delayed rectifier $K^+$ channels ($I_{Ks}$) in the heart. This $K^+$ channel is one of the main pharmacological targets for the development of drugs against cardiovascular disease. Panax ginseng has been shown to exhibit beneficial cardiovascular effects. In a previous study, we showed that ginsenoside Rg3 activates human KCNQ1 $K^+$ channel currents through interactions with the K318 and V319 residues. However, little is known about the effects of ginsenoside metabolites on KCNQ1 $K^+$ alone or the KCNQ1 + KCNE1 $K^+$ ($I_{Ks}$) channels. In the present study, we examined the effect of protopanaxatriol (PPT) and compound K (CK) on KCNQ1 $K^+$ and $I_{Ks}$ channel activity expressed in Xenopus oocytes. PPT more strongly inhibited the $I_{Ks}$ channel currents than the currents of KCNQ1 $K^+$ alone in concentration- and voltage-dependent manners. The $IC_{50}$ values on $I_{Ks}$ and KCNQ1 alone currents for PPT were $5.18{\pm}0.13$ and $10.04{\pm}0.17{\mu}M$, respectively. PPT caused a leftward shift in the activation curve of $I_{Ks}$ channel activity, but minimally affected KCNQ1 alone. CK exhibited slight inhibition on $I_{Ks}$ and KCNQ1 alone $K^+$ channel currents. These results indicate that ginsenoside metabolites show limited effects on $I_{Ks}$ channel activity, depending on the structure of the ginsenoside metabolites.

• 분석과학
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• 제29권1호
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• pp.49-55
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• 2016

케톤체는 생체 에너지 생산과정이 탄수화물보다는 지방산의 의존도가 높을 때 생성되며, 과도한 분비는 당뇨병성 케토시스나 선천성 유전성 대사이상질환을 의심할 수 있는 근거가 된다. 따라서 이의 신속 정확한 분석법의 개발이 필요하다. 본 연구에서는 혈장을 제단백한 후 hydroxylamine을 가하여 60 ℃에서 30 분간 반응시켜 oximation 후 BSTFA를 가한 후 trimethylsilylation 유도체화하여 혈장 중에서 케톤체를 신속하게 정량할 수 있는 GC-MS/SIM 분석법을 개발하였다. 케톤체의 직선성의 범위는 0.001-250 μg/mL 이었고, 혈장에서의 검출한계는 0.1 pg 이었다. 직선성을 가지는 범위에서의 상관계수(R2)는 0.998-0.999이었고, 회수율은 1 μg/mL의 표준품을 첨가하였을 때 88.2-92.3 %, 10 μg/mL의 농도를 첨가하였을 때 89.5-94.8 % 였으며 RSD는 6.3-9.4 %였다. 이 분석법을 정상인과 케토시스 환자의 검체에 적용하여 벨리데이션 하였으며, 본 분석방법은 어린이나 성인의 당뇨성 케토시스나 여러 유전성대사질환 환자 중 케토시스를 보이는 환자의 혈장 중 β-hydroxybutyric acid/acetoacetic acid의 비를 계산하여 케톤체를 신속하고 효율적으로 임상검체 분석에 응용할 수 있음을 보여주었다.

• 대한환경공학회지
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• 제31권9호
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• pp.825-830
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• 2009

의약물질은 다양한 경로를 통해 수질환경으로 유입된다. 수계에 의약물질은 ppt에서 ppb 단위의 낮은 농도로 종종 검출되고 있으므로 적절한 관리방안과 기술적 대안을 찾기 위해 최적화된 미량분석기술을 개발하는 것이 필요하다. LC-MS/MS 최적화에 있어서 단변수 변화분석이 선호되어 왔다. 그러나 분석기기의 독립변수들은 서로 영향을 주고받기 때문에 여러 독립변수를 동시에 변화시키는 방법을 통해 최적조건을 탐색해야 한다. 본 연구에서는 반응표면 분석법을 최근 문제가 되고 있는 항생제 설파메톡사졸의 LC-MS/MS 분석에 활용하였다. 먼저 선별실험을 통해 최적화 대상 독립변수를 조각화에너지(Fragmentation Energy)와 충돌전압(Collision Voltage)으로 선정하였다. 조각화에너지와 충돌전압을 동시변화시키고 각 조건의 반응을 다항식으로 모사하였다. 회귀분석결과 상관계수 $R^2$값은 0.9947를 나타내어 높은 정확도를 보였으며, 무작위 조건에서 반응의 예측값과 관측값 사이의 오차율이 3.41%로 작은 차이를 보였다. 따라서 RSA에 의해 도출된 모델이 조각화에너지와 충돌전압의 변화에 의한 LC-MS/MS의 반응을 성공적으로 모사하는 것으로 사료되었다. 이때 모델을 통해 확인된 최적조건은 조각화에너지 116.6과 충돌전압 10.9 eV이다. 이러한 반응표면분석법은 고체상 추출조건 및 액체크로마토그래피 조건의 최적화에 확장되어 활용될 수 있다.

• ALGAE
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• 제29권1호
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• pp.47-55
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• 2014

To develop effective and safe acne vulgaris therapies with a continuing demand for new solutions, we investigated unique efficacy of an antibacterial agent from marine brown alga Eisenia bicyclis in treating acne vulgaris. The methanolic extract of E. bicyclis exhibited potential antibacterial activity against acne-related bacteria. The ethyl acetate fraction showed the strongest antibacterial activity against the bacteria among solvent fractions. Six compounds (1-6), previously isolated from the ethyl acetate fraction of E. bicyclis, were evaluated for antibacterial activity against acne-related bacteria. Among them, compound 2 (fucofuroeckol-A [FF]) exhibited the highest antibacterial activity against acne-related bacteria with a minimum inhibitory concentration (MIC) ranging from 32 to $128{\mu}g\;mL^{-1}$. Furthermore, FF clearly reversed the high-level erythromycin and lincomycin resistance of Propionibacterium acnes. The MIC values of erythromycin against P. acnes were dramatically reduced from 2,048 to $1.0{\mu}g\;mL^{-1}$ in combination with MIC of FF ($64{\mu}g\;mL^{-1}$). The fractional inhibitory concentration indices of erythromycin and lincomycin were measured from 0.500 to 0.751 in combination with 32 or $64{\mu}g\;mL^{-1}$ of FF against all tested P. acnes strains, suggesting that FF-erythromycin and FF-lincomycin combinations exert a weak synergistic effect against P. acnes. The results of this study suggest that the compounds derived from E. bicyclis can be a potential source of natural antibacterial agents and a pharmaceutical component against acnerelated bacteria.

• Archives of Pharmacal Research
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• 제26권3호
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• pp.224-231
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• 2003

The anti-thrombotic effects of LB30057, a direct thrombin inhibitor, were evaluated with in vivo rat and dog thrombosis models. In rats, 1 mg/kg of LB30057 inhibited half of the clot formations in the inferior vena cava at 5 minutes after intravenous application. When measured at 2 hours after oral application, 100 mg/kg prevented approximately half of the clot formations in the inferior vena cava and 50 mg/kg prolonged the mean occlusion time from $15.6{\pm}1.3$ minutes to $47.2{\pm}8.3$ minutes in the carotid artery. In dogs, the formation of thrombus in the jugular vein was reduced to half at a dose range of 20-30 mg/kg at 6 hours after oral application. In addition, the LB30057 dosage required to reduce venous clot formation by approximately 80-90% in dogs was only about 10% of that required for the same reduction in rats. This is probably due to the variation in its time-dependent blood concentration profiles in each species; for example, the plasma half-life of LB71350 in dogs was longer than that in rats ($153.0{\pm}3.0$ vs. $129.7{\pm}12.7$ min at 30 mg/kg, i.v., respectively). AUG, $T_{max},{\;}G_{max}$, and BA in dogs were 59, 8.9, 9.17, and 13.3 times higher than those in rats at oral 30 mg/kg, respectively. Taken together, these results suggest that LB30057 administered orally is effective in the prevention of arterial and venous thrombosis in rats and dogs. It therefore represents a good lead compound for investigations to discover a new, orally available, therapeutic agent for treating thrombotic diseases.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제24권6호
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• pp.595-603
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• 2016

(E)-3-Phenyl-1-(2-pyrrolyl)-2-propenone (PPP) is a pyrrole derivative of chalcone, in which the B-ring of chalcone linked to ${\beta}$-carbon is replaced by pyrrole group. While pyrrole has been studied for possible Src inhibition activity, chalcone, especially the substituents on the B-ring, has shown pharmaceutical, anti-inflammatory, and anti-oxidant properties via inhibition of NF-${\kappa}B$ activity. Our study is aimed to investigate whether this novel synthetic compound retains or enhances the pharmaceutically beneficial activities from the both structures. For this purpose, inflammatory responses of lipopolysaccharide (LPS)-treated RAW264.7 cells were analyzed. Nitric oxide (NO) production, inducible NO synthase (iNOS) and tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$) mRNA expression, and the intracellular inflammatory signaling cascade were measured. Interestingly, PPP strongly inhibited NO release in a dose-dependent manner. To further investigate this anti-inflammatory activity, we identified molecular pathways by immunoblot analyses of nuclear fractions and whole cell lysates prepared from LPS-stimulated RAW264.7 cells with or without PPP pretreatment. The nuclear levels of p50, c-Jun, and c-Fos were significantly inhibited when cells were exposed to PPP. Moreover, according to the luciferase reporter gene assay after cotransfection with either TRIF or MyD88 in HEK293 cells, NF-${\kappa}B$-mediated luciferase activity dose-dependently diminished. Additionally, it was confirmed that PPP dampens the upstream signaling cascade of NF-${\kappa}B$ and AP-1 activation. Thus, PPP inhibited Syk, Src, and TAK1 activities induced by LPS or induced by overexpression of these genes. Therefore, our results suggest that PPP displays anti-inflammatory activity via inhibition of Syk, Src, and TAK1 activity, which may be developed as a novel anti-inflammatory drug.

• 생명과학회지
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• 제30권10호
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• pp.919-929
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• 2020

방향족 화합물은 화학, 식품, 고분자, 화장품, 의약 산업 등에 이용되는 중요한 물질로, 현재까지 대부분 화학 합성법 또는 식물 추출법으로 만들어진다. 그러나, 화석 연료의 고갈, 지구 온난화, 환경규제의 강화, 식물자원의 과다한 채취 등의 많은 위협요인에 직면하면서 재생 가능한 생물자원을 이용한 미생물을 이용한 생물공학적 방법으로 방향족 화합물을 생산하는 것은 매우 유망한 대안이다. 대사공학이 합성생물학과 접목되면서, L-트립토판 생합성 경로 유래의 인공 생합성 경로가 재 구축되어 5-히드록시트립토판, 세로토닌, 멜라토닌, 7-염화-L-트립토판, 7-브로모-L-트립토판, 인디고, 인디루빈, 인돌-3-초산, 바이오라세인, 데옥시바이오라세인과 같은 다양한 고부가 화합물을 생산할 수 있게 되었다. 본 총설은 이러한 방향족 화합물의 특성, 용도, 생합성 경로를 요약하였다. 또한 방향족 화합물을 미생물을 이용하여 생산하기 위한 최신의 대사공학 전략과 생산 농도를 올리는데 제기되는 문제들을 극복하기 위한 해결방안 등을 정리하여 보고한다. 시스템 대사 공학에 기반한 균주 개발과 재생 가능한 생물자원을 사용한 배지 및 생물공정의 최적화가 이루어지면 방향족 화합물의 미생물 생산을 위한 상업적으로 실행 가능한 기술 개발을 가능하게 할 것으로 예상된다.

• 한국작물학회지
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• 제55권1호
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• pp.65-69
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• 2010

검정콩 종피에 함유된 안토시아닌의 항산화 및 항염증 효과를 분석하였다. 메탄올로 추출된 검정콩의 안토시아닌 조추출물은 0.01%에서 0.5% 범위에서 농도 의존적으로 SOD활성을 증가시켰으며 0.5%에서 superoxide radical을 100% 소거시키는 결과를 관찰할 수 있었다. 또한 RAW 264.7 세포를 배양한 후, 세포 배양액에 LPS와 농도별 안토시아닌 추출물을 가한 결과, 안토시아닌 추출물을 0.001%, 0.01%, 0.02% 농도로 각각 처리했을 때 LPS에 의해 증가된 NO의 생산이 농도 의존적으로 감소하는 결과를 보였다. 따라서 검정콩 안토시아닌 추출물의 항산화능 및 항염증효과를 가늠할 수 있었다. 그러나 안토시아닌 조추출물은 DDT 시험에 의해서는 S. aureus, E. coli, C. albicans, A. niger에 대해서 10%의 농도에서도 항균력을 보이지 않았다.

• 원예과학기술지
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• 제28권4호
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• pp.685-690
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• 2010

노니($Morinda$ $citrifolia$) 부정근의 주요 성분인 rubiadin은 간 보호 효과가 있어 제약산업에서 높은 가치가 있다. 노니 부정근의 주요 유효성분인 rubiadin의 효율적인 추출조건을 규명하고자 용매 종류, 물과 메탄올의 비율(물, 20%, 40%, 60%, 80%, 100%), 추출시간 및 추출방법을 달리하여 추출하였다. 노니 부정근에서의 rubiadin의 함량분석은 HPLC 이용 분석조건을 확립하였으며, C-18 컬럼을 사용하여 280nm에서 메탄올과 물로 농도구배를 주어 분석하였다. 용매별 추출효율은 메탄올(0.08%) > 에탄올(0.05%) > 아세토니트릴(0.03%) > 아세톤(0.02%) 및 메틸렌클로라이드(0.02%) 순으로 증가하였다. 메탄올에 물의 혼합 비율을 달리하여 초음파 추출기로 1시간 동안 추출한 결과 60% 메탄올(0.21%) > 80% 메탄올(0.13%) > 100% 메탄올(0.07%) 및 40% 메탄올(0.07%) 순으로 효과적이었으며, 환류냉각 추출기로 2시간 동안 추출한 결과 60% 메탄올(0.21%) > 40% 메탄올(0.17%) > 80% 메탄올(0.14%) 용매처리구 순으로 효율이 좋았다. 추출방법 및 추출시간에 따른 rubiadin의 추출 효율을 비교하기 위해 환류냉각추출 및 초음파추출, 진탕추출법으로 추출하였다. 추출방법 및 추출시간에 따른 rubiadin의 추출효율은 초음파추출 및 진탕추출에서 각각 8 및 24시간 동안 추출했을 때 효율적이었다.

• 대한임상검사과학회지
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• 제50권2호
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• pp.205-210
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• 2018

단삼의 성분인 salvianolic acid B는 다양한 생리활성이 알려져 있다. 특히 항산화 효과는 간세포, 신경세포를 포함한 다양한 세포유형에서 보호효과가 있다고 보고되었다. 하지만 ferulic acid와 같이 항산화제로 여겨지는 몇몇 페놀성 물질은 특정 전이 금속이 있으면 산화작용을 하며 이것이 항암 효능을 설명하기도 한다. 본 실험에서 salvianolic acid B가 $Cu^{2+}$ 환경에서 산화작용을 하는지 알아보았다. salvianolic acid B와 $Cu^{2+}$를 동시 처리하면 supercoilded 형태의 DNA가 open circular 혹은 linear 형태로 바뀌었으나 salvianolic acid B 혹은 $Cu^{2+}$를 단독 처리 했을 때는 그렇지 않았다. $Cu^+$에만 특정적인 킬레이터 neocuproine을 이용하여 salvianolic acid B가 $Cu^{2+}$를 $Cu^+$로 환원시킴을 알았으며 $H_2O_2$를 물과 산소로 분해하는 catalase를 처리하면 DNA 분해가 일어나지 않았다. 활성산소종 중 하나인 $H_2O_2$는 생체분자 특히 DNA를 공격하여 정상기능을 수행하지 못하게 한다. 정리하면 salvianolic acid B에 의한 $Cu^{2+}$의 환원은 $H_2O_2$를 생성하며 $H_2O_2$는 DNA 분해를 일으킨다. 이런 결과는 salvianolic aicd B의 항암효과가 salvianolic acid의 $H_2O_2$ 생성 때문일 수 있다는 작은 단서를 줄 수 있으며 이는 좀 더 실험이 이뤄져야 한다.