Nicotiana glutinosa를 이용한 단병반분리를 통해 국내에 시판되고 있는 상용고추종자로부터 괴사국부병반의 크기가 다른 두 종류의 Tobamovirus를 분리하고 이들을 각각 Tobamovirus-6(T-6)과 Tobamovirus-19(T-19)로 명명하였다. 기주범위와 혈청학적 연관성 조사에서 T-6은 pepper mild mottle vitus(PMMoV)와, T-19는 tomato mosaic virus (ToMV)와 유사한 특성을 보였다. 또한 외피단백질 염기서열 분석에서 T-6은 PMMoV와 T-19는 ToMV와 매우 유사하였다.
A rod-shaped virus was isolated from pepper showing mild mosic during the winter growing seasons of 2001 and 2002 in Korea. Based on its biological reactions, serological relationships, reverse transcription-poly-merase chain reaction (RT-PCR) using specific primers, and nucleotide sequence analysis of coat protein (CP) gene, the isolated virus was identified as Tobacco mild green mosaic virus (TMGMV) and designated as Korean pepper isolate (TMGMV-KP). Crude sap from infected tissue was mechanically transmitted to various indicator plants, which produced characteristic symptoms of tobamovirus infection. However, no symptom was observed in Gomphorena globosa. In RT-PCR assays with specific primers toy respective detection of TMGMV, Tobacco mosaic virus (TMV), Pepper mild mottle virue (PMMoV), and Tomato mosaic virus (ToMV), a single strong band of about 500 bp in length was produced from the sample used only with TMGMV primers. The amplified DNA was cloned and the nucleotide sequence was determined. Sequence comparisons with the CP gene of other tobamoviruses indicated that TMGMV-KP shared 99.3% identity with TMGMV Japanese isolate and only 59.1, 58.6, and 58.1% identity with TMV, PMMoV and ToMV, respectively. This is the first report of TMGMV in Korea.
We conducted a survey on pepper virus diseases in 31 regions in Korea from November 2001 to December 2004. Using electron microscopy, test plant reaction, rapid immuno-filter paper assay (RIPA), reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and/or analysis of viral nucleotide sequences, we found a number of viruses from 1,056 samples that we collected. These included Cucumber mosaic virus (CMV), Pepper mottle virus (PepMoV), Pepper mild mottle virus (PMMoV), Broad bean wilt virus 2 (BBWV2), Tobacco mild green mosaic virus (TMGMV), and Tomato spotted wilt virus (TSWV). Of the samples analyzed, $343(32.5\%)$ were infected with CMV, $209(19.8\%)$ with PepMoV, $141(13.4\%)$ with PMMoV, $12(1.1\%)$ with BBWV2, $40(3.8\%)$ with TMGMV, $5(0.5\%)$ with TSWV, $153(14.5\%)$ with CMV and PepMoV, $54 (5.1\%)$ with CMV and PMMoV, $31(2.9\%)$ with PepMoV and PMMoV, $3(0.3\%)$ with CMV and BBWV2, $1(0.1\%)$ with CMV, PepMoV and BBWV2, $8(0.8\%)$ with CMV, PepMoV and PMMoV, and $30 (2.8\%)$ samples were infected with viruses which were not identified. CMV was the most predominant virus in all inspected fields and the number of the samples infected with PMMoV was relatively low as compared PepMoV infection level in pepper. TMGMV was only found in the southern part of Korea, while TSWV was isolated in Anyang and Yesan. However, we did not encounter in this survey the Alfalfa mosaic virus (AMV), Potato virus Y (PVY), Tobacco mosaic virus (TMV), and Pepper vein chlorosis virus (PVCV).
In August 2006, a severe disease incidence showing mosaic and/or necrotic symptoms on two bell pepper varieties including red-colored 'Special' and yellow-colored 'Fiesta' was observed in a greenhouse located in Gwangyang, Jeonnam province, Korea. To identify causal viruses, total RNAs were extracted from 11 fruit samples with and without symptoms. Specific oligonucleotide primers for Cucumber mosaic virus (CMV), Pepper mottle virus (PepMoV), Tomato spotted wilt virus (TSWV) and Pepper mild mottle virus (PMMoV) were designed based on the sequences available on GenBank. Database comparisons of the deduced amino acid sequences of each sequence produced 100% and 98% matches with nucleocapsid protein gene of TSWV (Acc. No. ABE11605) and coat protein gene of CMV (Acc. No. DQ018289), respectively, suggesting that the symptoms on bell pepper fruits might be caused by the infection of CMV and TSWV. To our knowledge this is the first report of necrotic as well as mosaic virus disease on bell pepper fruits by the infection of CMV and TSWV in Jeonnam province, Korea.
전국 52개 지역에서 2002년, 2004년에서 2006년, 4년 간 고추 바이러스 이병물을 채집하여 바이러스 감염양상을 조사하였다. 감염된 바이러스 종류는 Cucumber mosaic virus(CMV), Pepper mottle virus(PepMoV), Pepper mild mottle virus(PMMoV), Broad bean wilt virus 2(BBWV2), Tobacco mild green mosaic virus(TMGMV), Tomato spotted wilt virus(TSWV) 6종이었다. CMV, PepMoV PMMoV와 BBWV2의 발생률은 각각 29.4%, 13.6%, 14.3%, 25.6%이었다. TMGMV와 TSWV의 발생률은 1.0%로 매우 낮았다. 2002년과 2004년의 CMV 발생률은 53.3%와 34.2%로 가장 높았으나 2005년과 2006년에는 18.2%와 11.9%로 감소하였다. BBWV2의 발생률은 2002년에 1.3%, 2004년에 1.8%로 낮았으나, 2005년에 41.3%, 2006년에 58.2%로 크게 증가하였다. CMV+BBWV2의 발생률은 2002년에 0.0%, 2004년에 2.1%이었으나 2005년과 2006년에 각각 33.3%와 83.2% 증가하여 BBWV2의 단독감염과 함께 복합감염에서도 급격히 증가하였고 CMV+BBWV2+PepMoV의 삼중 복합감염률은 평균 6.4%이었다. CMV는 고추 잎에 심한 모자이크병징, BBWV2는 원형반점 병징을 일으키며, CMV와 BBWV2의 복합감염 경우에는 퇴록병징을 일으켰다. TSWV는 고추 잎과 과일에 전형적인 다중 원형반점을 일으켰다.
Kim, Dae-Hyun;Cho, Jeom-Deog;Kim, Jae-Hyun;Kim, Jenog-Soo;Cho, Eui-Kyoo
The Plant Pathology Journal
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제21권3호
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pp.252-257
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2005
In single infection of Tobacco mosaic virus-U1 (TMVU1) or Pepper mild mottle virus (PMMoV), mosaic symptoms were produced on the chili pepper cultivars of 'Cheongyang' and 'Wangshilgun'. However, in cultivars of 'Manitta' and 'Bugang', no symptoms were occurred. In single infection of Pepper mottle virus (PepMoV), symptoms of mottle and malformation were produced on the tested cultivars of 'Manitta', 'Bugang', 'Cheongyang', and 'Wangshilgun'. In the cultivars of 'Cheongyang' and 'Wangshilgun', synergistic symptoms of stunt and lethal death were induced by mixed infections in the two combinations of TMV-U1 + PepMoV and PMMoV+PepMoV. However, in cultivars of 'Manitta' and 'Bugang', synergistic symptoms were not noted, but mottling which was milder than that of single infection was produced. Cells infected singly with TMV-U1 and PMMoV in the cultivars of 'Cheongyang' and 'Wangshilgun', respectively, had the typical ultra-structures of tobamovirus as the stacked-band structure and multiple spiral aggregate (SA). In the cells and tissues infected with PepMoV on the cultivars of 'Cheongyang', 'Wangshilgun', 'Manitta' and 'Bugang', the potyvirus inclusions of pinwheels, scrolls, lamminated aggregates and amorphous inclusion were observed. In the cells infected mixedly with combinations of TMVU1+PepMoV and PMMoV+PepMoV, the virus particles and inclusions of the two different viruses were found simultaneously in the same cytoplasm. The amounts of virus particles in mixed infections were more abundant than in single infection. The angled-layer aggregates (ALA) were observed only in the cells infected with both TMV-U1 and PepMoV.
Kim, Dae. Hyun.;Kim, Jeong. Soo.;Kim, Jae. Hyun.;Eui. Kyoo. Cho
한국식물병리학회:학술대회논문집
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한국식물병리학회 2003년도 정기총회 및 추계학술발표회
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pp.137.2-138
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2003
The commercial cultivars of red pepper were screened against Tobacco mosaic virus (TMV), Pepper mild mottle virus (PMMoV) and Pepper mottle virus (PepMoV) by seedling test. Tn single infection of TMV or PMMoV, mosaic symptom was produced on the cultivars of 'Cheongyang'and 'Wangshilgun'. However, in cultivars of 'Manilla'and 'Bugang', symptoms were not occurred. In single infection of PepMoV, symptoms of mottle and malformation were produced on the tested cultivars of 'Manilla', 'Bugang', 'Cheongyang'and 'Wangshilgun' In the cultivars of 'Cheongyang'and 'Wangshilgun', synergistic symptoms of stunt and lethal death were induced by mixed infections in the two combinations of TMV+PepMoV and PMMoV+PepMoV. However, in cultivars of 'Manilla'and 'Bugang', synergistic symptom was not occurred as mottle which was milder than that of single infection. Cells were single infected with TMV and PMMoV the cultivars of 'Cheongyang'and 'Wangshilgun', respectively, had typical ultrastructures of tobamovirus as the stacked-band structure and multiple spiral aggregate (SA). Ultrastructures of cell and tissues infected with PepMoV on the cultivars of 'Cheongyang', 'Wangshilgun', 'Manilla'and 'Bugang', the potyvirus inclusions of pinwhills, scrolls, lamminated aggregates and amorphous inclusion were observed. Infected cells with a combination of TMV+PepMoV and PMMoV+PepMoV, the virus particles and inclusions of the two different viruses were found only mixed infection in the same cytoplasm and the amounts of viruses in mixed infections were abundant than in single infection. The angled-layer aggregates (ALA) was observed in the cells infected mixedly with TMV and PepMoV
우리나라 파프리카에 발생하는 주요 바이러스는 오이모자이크바이러스(Cucumber mosaic virus, CMV), 고추모틀바이러스(Pepper mottle virus, PepMoV), 잠두위조바이러스2(Broad bean wilt virus2, BBWV2), 고추약한모틀바이러스(Pepper mild mottle virus, PMMoV), 토마토반점위조바이러스(Tomato spotted wilt virus, TSWV) 및 사탕무황화바이러스(Beet western yellows virus, BWYV) 등 6종이다. 생산량 감소 및 고품질 규격품 생산의 가장 큰 제한요인이 되고 있는 바이러스병의 피해를 최소화하기 하기 위하여 바이러스별 병징 및 발생원인에 따른 예방법을 알아본다.
Efforts to control viral diseases in crop production include several types of physical or chemical treatments; antiviral extracts of a number of plants have also been examined to inhibit plant viral infection. However, treatments utilizing naturally selected microorganisms with activity against plant viruses are poorly documented. Here we report isolation of a soil inhabiting bacterium, Pseudomonas oleovorans strain KBPF-004 (developmental code KNF2016) which showed antiviral activity against mechanical transmission of tobamoviruses. Antiviral activity was also evaluated in seed transmission of two tobamoviruses, Pepper mild mottle virus (PMMoV) and Cucumber green mottle mosaic virus (CGMMV), by treatment of seed collected from infected pepper and watermelon, respectively. Pepper and watermelon seeds were treated with culture supernatant of P. oleovorans strain KBPF-004 or control strain ATCC 8062 before planting. Seeds germinated after treatment with water or ATCC 8062 yielded about 60% CGMMV or PMMoV positive plants, whereas < 20% of KBPF-004-treated seeds were virus-infected, a significantly reduced seed transmission rate. Furthermore, supernatant of P. oleovorans strain KBPF-004 remodeled aggregation of PMMoV 126 kDa protein and subcellular localization of movement protein in Nicotiana benthamiana, diminishing aggregation of the 126 kDa protein and essentially abolishing association of the movement protein with the microtubule network. In leaves agroinfiltrated with constructs expressing the coat protein (CP) of either PMMoV or CGMMV, less full-size CP was detected in the presence of supernatant of P. oleovorans strain KBPF-004. These changes may contribute to the antiviral effects of P. oleovorans strain KBPF-004.
남해지역의 원원종 종서 생산 포장에서 '추백' 품종에 나타난 엽맥투명 및 매우 약한 모자이크 증상을 나타내는 감자 잎에서 담배 모자이크 바이러스(TMV)를 분리하였다. 이 바이러스((TMV-St))는 생물학적, 혈청학적 유연관계 및 외피단백질의 염기서열 등을 통해 기존에 보고된 다른 tobamovires와 비교하였다. TMV-St는 5개의 지표식물 반응에서 토마토, 고추, 가지 등과 같은 가지과 작물에 경제적 피해를 주고 있는 TMV-U1, Pepper mild mottle virus(PMMoV) 및 Tomato mosaic virus(ToMV)와는 다른 기주 반응을 보였다. 특히 즙액접종에 의한 기주의 반응은 C.murale 접종엽과 상엽 모두에서 퇴록반점을 보였으며, C. murale, G. globosa, N.rustica 그리고 N. tabacum ce. Samsun nn 등 4가지 지표식물로 이들 바이러스 계통을 구분할 수 있었다. 혈청학적 검정에서 TMV-St는 TMV-U1, PMMoV 그리고 ToMV와의 반응에서 도두 뚜렷한 침강선을 형성하였다. TMV-St의 외피단백질은 477개의 염기서열로 되어 있으며, 이는 TMV-U1의 염기서열과 매우 유사하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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