Acid proteinase has been discovered in Aspergillus niger (acid protease A) and Cryphonectria parasitica (acid proteinase EapC) and it plays major roles in cheese formation from milk. In this study, a partial gene encoding acid proteinase in Penicillium oxalicum HCLF-34 was cloned by using PCR with degenerate primers corresponding to highly conserved regions of the acid proteinase. The partial acid proteinase gene in P. oxalicum HCLF-34 contains an open reading frame of 438 base pairs and encodes an acid proteinase protein of 146 amino aicds. The predicted amino acid sequences showed 71 % homology with acid protease A and 67% homology with EapC.
The inactivation of spores of Penicillium oxalicum by supercritical carbon dioxide ($SC-CO_2$) was optimized by response surface methodology. The optimal inactivation conditions of 16.8 MPa, $49^{\circ}C$, and 20 min were determined using ridge analysis, at which the predicted and experimental $log_{10}$ reductions were obtained as 5.74 and 6.12, respectively. The synergistic effect of a cosolvent (ethanol), which was used to modify $SC-CO_2$, on the inactivation of the fungal spores was investigated. At less severe conditions of 10 MPa and $40^{\circ}C$, P. oxalicum spores of $10^7$ CFU/ml were completely inactivated within 45 min by $SC-CO_2$ modified with ethanol.
Algal lytic enzyme, an extracellular enzyme, was purified from the culture filtrate of Penicillium oxalicum(HCLF-34) by ultrafiltration, gel filtration chromatography, and anion exchange chromatography. The enzyme has a molecular mass of approximately 22 kDa, an it is a monomer by renaturation SDS-PAGE. The amino acid sequences of the enzyme was revealed to be NH2-Glu-Ser-Tyr-Ser-Ser-Asn-Ala-Ala-Gly-Ala-Val-Leu-Ile---, had about 84% identity with the mature light chain of aspergillopepsin II precursor and 81% identity with the mature protein of the acid proteinase EapC precursor.
A blue mold on tomato fruit caused by Penicillium oxalicum occurred sporadically in a greenhouse at Gyeongsangnam-do Agricultural Research and Extension Services. Infection usually occurred through wounds or cracks on the fruits. Symptoms began with water soaking lesions, then became watery and softened eventually. Colony of the causal fungus was white at the early growing stage, turned green on Czapek yeast extract agar and malt extract agar. Conidia were ellipsoidal in shape and $2-6{\times}2-4{\mu}m$ in size. Stipes were septate, smooth, thin walled, and $90-280{\times}3-4{\mu}m$ in size. Penicilli were mostly biverticillate. Ramuli were 1-3 groups, smooth, and $10-16{\times}2-3{\mu}m$ in size. Rami were 1-2 groups and $6-30{\times}2-4{\mu}m$ in size. Metulae were 2-3(5) verticils, smooth, and $12-20{\times}3-4{\mu}m$ in size. Phialides were 5-7 verticilate, ampulliform to cylindroidal, smooth, and $8-12{\times}2-3{\mu}m$ in size. Optimum temperature for growth was about $25^{\circ}C$. Pathogenicity of the fungus was proved on tomato fruit according to Koch's postulation. On the basis of mycological and pathological characteristics, the fungus was identified as P. oxalicum Currie & Thom. This is the first report of the blue mold on tomato fruit caused by P. oxalicum in Korea.
Penicillium oxalicum strain CBPS-3F-Tsa, an efficient phosphate solubilizing fungus, was evaluated for its production of organic acid in vitro and effect of inoculation on the growth promotion of Maize under greenhouse conditions. The fungus solubilized 129.1, 118.8, and 54.1 mg P/1 of tricalcium phosphate [$Ca_{3}(PO_{4})_{2}$], aluminum phosphate ($A1PO_{4}$),and ferric phosphate ($FePO_{4}$), respectively, after 72 h of incubation. Malic acid, gluconic acid, and oxalic acid were detected in the flasks supplemented with various phosphate sources [240, 146, 145 mM/1 $A1PO_{4},\;FePO_{4},\;and\;Ca_{3}(PO_{4})_{2}$, respectively] together with a large amount of malic acid followed by the other two. The effects of inoculation of P. oxalicum CBPS-3F-Tsa on maize plants were studied under pot culture conditions. P. oxalicum CBPS-3F-Tsa was inoculated to maize plants alone or together with inorganic phosphates in the form of fused phosphates (FP) and rock phosphates (RP). Inoculation of P. oxalicum CBPS-3F-Tsa increased the plant growth and N and P accumulation in plants, compared with control plants, and also had positive effects when applied with RP. The results of this study show that the fungus P. oxalicum strain CBPS-3F-Tsa could solubilize different insoluble phosphates by producing organic acids, particularly malic acid, and also improved the efficiency of RP applied to maize plants.
A total of 81 isolates of Penicillium were isolated from postharvest seeds of barely, Job's-tears, maize, sorghum and rice from 1997 to 2003. Based on the morphological characteristics, they were identified as P. chrysogenum, P. citrinum, P. cyclopium, P. oxalicum, P. polonicum, P. purpurogenum and P. viridicatum. P. chrysogenum was detected from Job's-tears, rice and sorghum seeds, P. citrinum from maize seeds, P. cyclopium from sorghum seeds, P. oxalicum from barely, maize, sorghum and rice seeds, P. purpurgenum from maize, rice, sorghum seeds, P. viridicatum from Job's-tears, maize and rice seeds, P. polonicum from Job's-tears, maize, rice and sorghum seeds. Among these species, P. cyclopium, P. polonicum and P. purpurogenum were first reported in Korea. Especially, about 50% of the Penicillium isolates detected from the seeds were P. polonicum. Identification of the Penicillium species using morphological characteristics was difficult especially for the species belonging to the subgenus Penicillium such as P. polonicum.
A total of 26 and 55 isolates of fungi were isolated from corn and wheat samples collected from different markets in Korea, respectively. The number of Penicillium isolates from corn and wheat was 9 and 33, respectively. The Penicillium species isolated from corn were P. chrysogenum (3 isolates) and P. oxalicum (6 isolates), and from wheat were P. aurantiogriseum (16 isolates), P. citrinum (1 isolate), P. commun (4 isolates), P. griseofulvum (1 isolate), P. verrucosum (7 isolates), and P. viridicatum (4 isolates). Production of major mycotoxins in the yeast extract sucrose medium cultures of Penicillium isolates was analysed. Penicillium cultures were extracted with chloroform and purified by thin-layer chromatograhy (TLC), and high performance liquid chromatography (HPLC). Among 9 isolates of Penicillium from corn, 2 isolates of P. chrysogenum produced patulin, 1 isolate of the fungus produced patulin and citrinin, 2 isolates of P. oxalicum produced penicillic acid, 4 isolates produced pencillic acid and griseofulvin. Of the 33 isolates of Penicillium from wheat, 6 isolates of P. aurantiogriseum produced patulin, 8 isolates produced penicillic acid, 1 isolate produced patulin and penicillic acid, 1 isolate of P. citrinum produced citrinin and patulin, 2 isolates of P. commun produced brefeldin A and patulin, 1 isolate of P. griseofulvum produced brefeldin A, griseofulvin and patulin. Five isolates of P. verrucosum produced patulin, 1 isolate of the fungus produced penicillic acid, and 3 isolates of P. viridicatium produced penicillic acid.
An endoxylanase gene (PoxynA) that belongs to the glycoside hydrolase (GH) family 11 was cloned from a xylanolytic strain, Penicillium oxalicum B3-11(2). PoxynA was overexpressed in Trichoderma reesei QM9414 by using a constitutive strong promoter of the encoding pyruvate decarboxylase (pdc). The high extracellular xylanase activities in the fermentation liquid of the transformants were maintained 29~35-fold higher compared with the wild strain. The recombinant POXYNA was purified to homogeneity, and its characters were analyzed. Its optimal temperature and pH value were $50^{\circ}C$ and 5.0, respectively. The enzyme was stable at a pH range of 2.0 to 7.0. Using beechwood as the substrate, POXYNA had a high specific activity of $1,856{\pm}53.5$ IU/mg. In the presence of metal ions, such as $Cu^{2+}$, and $Mg^{2+}$, the activity of the enzyme increased. However, strong inhibition of the enzyme activity was observed in the presence of $Mn^{2+}$ and $Fe^{2+}$. The recombinant POXYNA hydrolyzed birchwood xylan, beechwood xylan, and oat spelt xylan to produce short-chain xylooligosaccharides, xylopentaose, xylotriose, and xylobiose as the main products. This is the first report on the expression properties of a recombinant endoxylanase gene from Penicillium oxalicum. The properties of this endoxylanase make it promising for applications in the food and feed industries.
Efficient cellulolytic enzyme production is important for the development of lignocellulose-degrading enzyme mixtures. However, purification of cellulases from their native hosts is time- and labor-consuming. In this study, a constitutive expression system was developed in Penicillium oxalicum for the secreted production of proteins. Using a constitutive polyubiquitin gene promoter and cultivating with glucose as the sole carbon source, nine cellulolytic enzymes of different origins with relatively high purity were produced within 48 h. When supplemented to a commercial cellulase preparation, cellobiohydrolase I from P. funiculosum and cellobiohydrolase II from Talaromyces verruculosus showed remarkable enhancing effects on the hydrolysis of steam-exploded corn stover. Additionally, a synergistic effect was observed for these two cellobiohydrolases during the hydrolysis. Taken together, the constitutive expression system provides a convenient tool for the production of cellulolytic enzymes, which is expected to be useful in the development of highly efficient lignocellulose-degrading enzyme mixtures.
Ran Liu;Xuehua Han;Jing Gao;Min Luo;Dale Guo;Guangzhi Wang
Mycobiology
/
v.51
no.3
/
pp.148-156
/
2023
Penicillium oxalicum strain can be isolated from the Bletilla striata (Thunb.) Reichb. f. tubers. Its solid-state fermentation products are concentrated by percolation extraction. Separation and purification have been conducted to the ethyl acetate extracts by preparative HPLC. Based on the use of spectrometry, we have determined 17 known compounds, 12,13-dihydroxy-fumitremorgin C (1), pseurotin A (2), tyrosol (3), cyclo-(L-Pro-L-Val) (4), cis-4-hydroxy-8-O-methylmellein (5), uracil (6), cyclo-(L-Pro-L-Ala) (7), 1,2,3,4-tetrahydro-4-hydroxy-4-quinolin carboxylic acid (8), cyclo-(Gly-L-Pro) (9), 2'-deoxyuridine (10), 1-(b-D-ribofuranosyl)thymine (11), cyclo-(L-Val-Gly) (12), 2'-deoxythymidine (13), cyclo-(Gly-D-Phe) (14), cyclo-L-(4-hydroxyprolinyl)-D-leucine (15), cyclo-(L)-4-hydroxy-Pro-(L)-Phe (16), uridine (17). Here, we report compounds 1-3, 5, 7-8, 11-12, 14-17 are first found and isolated from this endophyte.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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