This study has been performed to measure the prevalence and microbial flora on chicken slaughtering as well as the processing process from the months of October to November. Whole-chicken rinsing technique was used in order to analyze the incidence of microorganisms on chicken carcass at the stage before chilling (after evisceration), after chilling and after cutting. The swab technique was used on processing the processed samples, such as working plates and cutting knives. Brine and cooling water from four cooling tubs were taken from each processing processes and were used as samples. Furthermore, the matrix-assisted laser desorption/ionization mass spectrometry (MALDI MS) for whole cell fingerprinting in combination with a dedicated bioinformatic software tool was used to identify the isolated microorganisms. Of the tested samples and processes, brine ($4.50{\pm}0.64$ Log CFU/mL) and chicken carcass before chilling ($4.15{\pm}0.46$ Log CFU/mL) showed the highest population of microorganisms; the predominant microbial flora of them were Moellerella wisconsensis (54.84%), a member of the Enterobacteriaceae family, and Escherichia coli (60.36%), respectively. However, the predominant microbial flora of cut carcass was changed to Staphylococcus aureus (27.32%), which is a kind of pathogenic microorganism that can cause a food-borne illness. Therefore, the slaughtering and processing procedure of chicken are needed to be controlled more hygienically.
Salmonella species are the most important etiologic agents of food-borne acute gastroenteritis. The most common serotypes isolated from humans are Salmonella enterica serotype Typhimurium (S. Typhimurium) and S. Enteritidis. Traditional detection methods for Salmonella are based on cultures using selective media and characterization of suspicious colonies by biochemical and serological tests. These methods are generally time-consuming and not so highly sensitive. Recently, the polymerase chain reaction (PCR) has been used as a highly sensitive, specific, and rapid test for the presence of pathogenic bacteria. In this study, a multiplex PCR (m-PCR) was used to detect S. Typhimurium and S. Enteritidis. We selected m-PCR target genes, which were the spv (virulence plasmid specific for S. Enteritidis) and sefA (S. Enteritidis fimbrial antigen) genes, fliC (H1-i antigen specific for S. Typhimurium) and a randomly cloned sequence specific for the genus Salmonella. With m-PCR, random sequence was detected from all strains of Salmonella spp, spv and sefA were detected from all strains of S. Enteritidis (100%), and fliC was detected from all strains of S. Typhimurium (100%). This assay indicate that the specificity of the m-PCR make them potentially valuable tools for detection of S. Typhimurium and S. Enteritidis.
Antibacterial substances produced by Lactobacillus casei subsp. and Streptococcus faecium were examined for its antibacterial effects against some pathogenic bacteria. They were partially purified with ammonium sulfate precipitation, methanol-acetone extraction, G-50 gel filtration and examined its characteristics. When L casei subsp. and Str faecium were cultivated in MRS broth, stationary phase of L casei is until 24 hours and Str faecium is 20 hours. pH change of the cultured medium was both decreased after 12 hours and then constant at pH 4.5~4.6 after 28 hours. MRS broth culture fluids of L casei subsp. and Str faecium appeared the antibacterial effects by the spot-on-the-lawn method against ETEC, Sal pullorum and Sta aureus. Culture filtrates of L casei subsp. and Str faecium also appeared the antibacterial effects by the disc diffusion method. Culture filtrates of L casei sub. rhamnosus 7469 produced 0.032M of lactic acid and 0.01M of acetic acid. Str faecium 27273 also produced 0.027M of lactic acid and 0.01M of acetic acid. Protein concentrations of culture filtrates produced by L casei sub rhamnosus 7469 and Str faecium 27273 was $495{\mu}g/m{\ell}$ and $594{\mu}g/m{\ell}$, respectively. Antibacterial substances which are partially purified by ammonum sulfate precipitation, methanol-acetone extraction and G-50 gel filtration inhibit the growth of ETEC, Sal pullorum and Sta aureus. Characteristics of purified antibacterial substances was examined. Its molecular weight was about 31Kd, stabilized at $100^{\circ}C/20min.$ and some of proteolytic enzyme treatment.
Late blight, one of the most important disease in many agricultural crops, is caused by Phytophthora infestans. Fusarium wilt is a vascular disease of many plants caused by Fusarium oxysporum. Some bacteria isolated from rhizosphere were screened for their ability to inhibit the growth of F. oxysporum and P. infestans. Productions of siderophore, $\beta-1$,3-glucanase, hydrogen cyanide and chitinase by 4 isolated strains were examined. Among them, Bacillus sp. RFO41 most effectively inhibited the growth of F. oxysporum. The highest productions of siderophore and $\beta-l$,3-glucanase were shown in the culture of Bacillus sp. RFO41. Bacillus strain PS2 was most effective against P. infestans. PS2 showed the highest production of chitinase and hydrogen cyanide. A significant relationship was shown between the antagonistic effects of isolates against F. oxysporum and P. infestans and their production level of siderophore, $\beta-1$,3-glucanase, hydrogen cyanide, and chitinase.
This study assessed the efficacy of aqueous chlorine dioxide ($ClO_2$) and commercial chlorine sanitizer in terms of its ability to eliminate Listeria monocytogenes, Salmonella Typhimurium, and Escherichia coli O157:H7 on radish sprouts (Raphanus sativus L.). Radish sprouts were inoculated with a cocktail containing one each of three strains of three different foodborne pathogens, then treated with distilled water (control) or chemical sanitizers (100 ppm commercial chlorine, and 50, 100, 200 ppm $C1O_2$) for 1, 5, and 10 min at room temperature ($22{\pm}2^{\circ}C$). Populations of S. Typhimurium, E. coli O157:H7 and L. monocytogenes were counted at 4.64, 6.05, and 4.29 log CFU/g, respectively, after inoculation. Treatment with water did not significantly reduce the levels of any of the three foodborne pathogens. The levels of all three pathogens were reduced by treatment with chemical sanitizers; however, the observed levels of reduction of E. coli O157:H7 and L. monocytogenes were not significant as compared with the controls. The levels of the three pathogens were reduced most profoundly when treated for 10 min with 200 ppm of $C1O_2$, and the reduction levels of S. Typhimurium, E. coli O157:H7, and L. monocytogenes were 1.17, 1.63, and 0.96 log CFU/g, respectively. When chemically injured cells were investigated using SPRAB for E. coli O157 :H7 and by selective overlay methods for S. Typhimurium and L. monocytogenes, respectively, it was noted that commercial chlorine sanitizer generated more numbers of injured pathogens than did $C1O_2$. These data indicate that $C1O_2$ treatment may prove useful in reducing the numbers of pathogenic bacteria in radish sprouts.
O157:H7, Salmonella typhimurium, Listeria monocytogenes were treated with aqueous chlorine dioxide to elucidate effect of aqueous chlorine dioxide treatment on major food-borne pathogenic bacteria. Survival plot of E.coli O157:H7 at 5 ppm chlorine dioxide showed typical first-order rate. After 5 min of treatment, cell number decreased by 1.5 log cycle. Survival plot slope gave D value of 3.37 min. S. typhimurium and L. monocytogenes showed biphasic curve. Aqueous chlorine dioxide treatment on S. typhimurium and L. monocytogenes resulted in bactericidal effect for 5 min, and thereafter no effect was observed under experimental conditions of this study. These results suggest concentration of chlorine dioxide is more important than treatment time, and 5 ppm chlorine dioxide treatment is not sufficient for sanitizing fresh vegetables.
Kim, Jin-Do;Byun, Soon-Gyu;Park, Sung-Woo;Kim, Eun-Heui
Journal of fish pathology
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v.21
no.3
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pp.247-257
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2008
To understand the activity of non-specific defence factors in cultured Sebastes, the antibacterial effect of the serum, skin mucus and homogenate of various organs from cultured oblong rockfish (Sebastes oblongus) and rockfish(Sebastes schlegeli) against pathogenic bacteria, Aeromonas hydrophila, Edwardsiella tarda, Vibrio anguillarum, and Streptococcus sp. was compared with that of flounder(Paralichthys olivaceus) and seabass(Leteolabrax japonicus). And the activities of proteolytic enzyme, chitinolytic enzyme and haemolycin as non-specific defence factor were investigated on the oblong rockfish and rockfish. Samples from oblong rockfish showed the highest antibacterial activity by lysoplate assay on agar plate mixed with pathogens, followed in descending order by rockfish, seabass, and flounder. Turbidimetric assay was carried to evaluate the lysozyme activity of fish samples against lyophilized cells of Micrococcus lysodeiktikus. The serum, kidney, liver, stomach, intestine and eyeball of oblong rockfish and the mucus and gill of rockfish appeared to have the highest lysozyme activity among the fish strains investigated. All samples except skin mucus, liver, and eyeball of oblong rockfish and rockfish showed proteolytic enzyme activity. Chitinolytic enzyme activity was showed in random sampling and haemolytic activity was remarkable in oblong rockfish. Therefore, Sebastes strain was proved to have effective defense mechanisms based on the antibacterial activities, and lysozyme, proteolytic enzyme, chitinolytic enzyme, and haemolycin were considered to act as the non-specific defence factor of Sebastes.
This study compared the effects of chlorine dioxide and a commercial chlorine sanitizer for inhibiting foodborne pathogens, including Salmonella enterica serovar Typhimurium, Listeria monocytogenes, and Escherichia coli O157 : H7, on lettuce leaves. The lettuce samples were inoculated with each cocktail of the three strains, and were then treated with chemical sanitizers [distilled water, 100 ppm commercial chlorine and 50 ppm, 100 ppm, 200 ppm chlorine dioxide ($ClO_2$)] for 1 min, 5 min, and 10 min at room temperature($22{\pm}2^{\circ}C$). Following inoculation of the leaves, initial populations of E. coli O157:H7, L. monocytogenes, and S. Typhimurium were approximately 5.54, 4.47, and 5.12 log CFU/g, respectively these levels were not significantly reduced by the treatment with water,whereas the 100 ppm commercial chlorine sanitizer treatment and $ClO_2$ (at all tested concentrations) were effective at reducing levels of all three pathogens. The treatment of 200 ppm $ClO_2$ for 10 min was most effective at inhibiting the three pathogens, and reduction levels of E. coli O157 : H7, L. monocytogenes, and S. Typhimurium were 2.28, 1.95, 1.76 log, respectively. The inhibitory effect of $ClO_2$ increased with increasing treatment concentration of $ClO_2$, but there was no significant difference by the treatment times. When chemically injured cells of E. coli O157 : H7 and L. monocytogenes and S. Typhimurium were examined by SPRAB and selective overlay methods, respectively, it was observed that the commercial chlorine sanitizer generated greater numbers of injured L. monocytogenes than the $ClO_2$ treatment. From the overall results, $ClO_2$ was more effective at inhibiting pathogenic bacteria compared to the commercial chlorine sanitizer therefore, it has potential to be utilized as an alternative sanitizer to increase the microbial safety of fresh produce.
Antibiotic substances were produced by Bacillus subtilis YB-70, a potential biocontrol agent found to suppress root-rot of eggplant (Solanum melonggena L) caused by Fusarium solani, in a dextrose glutamate medium and isolated by isoelectric precipitation. Partial purification was performed by column chromatography on silica gel with two solvent systems: chloroform-methanol and methanol-chloroform-water as eluting solvents, This active fraction YBS-1 s contained antifungal activity were soluble in ethanol, methanol, and water, but were not soluble in other solvents including acetone, butanol, ethyl ether, dimethylformamide, propanol, and etc. High performance liquid chromatography and thin layer chromatographic separation of YBS-1s showed that they have been composed of three biological active bands that were named YBS-1A, -1B, and -1C. The substances were stable to heat and resistant to protease. YBS-1s were active against a wide range of plant pathogenic fungi but did not inhibit the growth of bacteria and yeasts. They were not only fungicidal but also fungistatic against chlamydospores of F. solani. The $ED_{50}$ values for the chlamydospore germination and the germ-tube growth of F. solani were $O.725\mu\textrm{m}/ml\;and\;O.562\mu\textrm{m}/ml$, respectively. Microscopic observations proved the substances restricted the growth of phytopathogenic fungus F. solani by spore burst followed by dissolving of its germ-tube, and caused abnormal hyphal swelling after application to chlamydospores or growing hyphae. Cultural filtrate of B; subtilis YB-70 also suppressed the development of root-rot of eggplant in pot tests.
In this study, Artemisia mongolica fischer extract was examined for its possible differential inhibitory activity against pathogenic bacteria including Staphylococcus aureus and Lactobacillus spp. isolated from women's vagina. First, seven lactobacillus spp. were selected based on their in vitro high anti-staphylococcal activity. Various samples extracted using different concentrations of organic solvents (acetone, ethanol, methanol) were examined for optimal anti-staphylococal activity. When the Artemisia extract obtained using $100\%$ solvents was added to the cell suspension at $17\%$ (vol/vol), Lactobacillus sp. KLB 224 maintained its viability for 48 hr, whereas S. aureus was completely inactivated showing differential antimicrobial activity of the extract. Using scanning electron microscopy the effect of the extract on the cell morphology was observed: S. aureus showed markedly distorted cell morphology while Lactobacillus sp. KLB 224 appeared to remain intact.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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