Recently, strategies for controlling Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (Fol), the causal agent of Fusarium wilt of tomato, focus on using effective biocontrol agents. In this study, an analysis of the biocontrol and plant growth promoting (PGP) attributes of 11 isolates of loamy soil Bacillus spp. has been conducted. Among them, the isolates B.PNR1 and B.PNR2 inhibited the mycelial growth of Fol by inducing abnormal fungal cell wall structures and cell wall collapse. Moreover, broad-spectrum activity against four other plant pathogenic fungi, F. oxysporum f. sp. cubense race 1 (Foc), Sclerotium rolfsii, Colletotrichum musae, and C. gloeosporioides were noted for these isolates. These two Bacillus isolates produced indole acetic acid, phosphate solubilization enzymes, and amylolytic and cellulolytic enzymes. In the pot experiment, the culture filtrate from B.PNR1 showed greater inhibition of the fungal pathogens and significantly promoted the growth of tomato plants more than those of the other treatments. Isolate B.PNR1, the best biocontrol and PGP, was identified as Bacillus stercoris by its 16S rRNA gene sequence and whole genome sequencing analysis (WGS). The WGS, through genome mining, confirmed that the B.PNR1 genome contained genes/gene cluster of a nonribosomal peptide synthetase/polyketide synthase, such as fengycin, surfactin, bacillaene, subtilosin A, bacilysin, and bacillibactin, which are involved in antagonistic and PGP activities. Therefore, our finding demonstrates the effectiveness of B. stercoris strain B.PNR1 as an antagonist and for plant growth promotion, highlighting the use of this microorganism as a biocontrol agent against the Fusarium wilt pathogen and PGP abilities in tomatoes.
Cavani, Ricardo;Rubio, Marcela da Silva;Alves, Khauston Augusto Pereira;Pizauro, Lucas Jose Luduverio;Cardozo, Marita Vedovelli;Silva, Paulo Lourenco;Silva, Iran Jose Oliveira;Avila, Fernando Antonio
Food Science of Animal Resources
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v.42
no.2
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pp.313-320
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2022
Brazil is considered as a great broiler feet exporter, especially for the Chinese trade. Contact lesions at the tibiotarsal region are responsible for economic losses and there is no model for its classification, thereby this study presents a fast and practical grade system to be used in the poultry industry and proposes these lesion characterizations into three different grades. For this, correlation was made between macroscopic, histological findings and microbiological quantification (Escherichia coli, Staphylococcus spp., Streptococcus spp. and sulphite-reducing clostridia) from contact lesions in the tibiotarsal region of 112 broiler carcasses, divided in four groups (n=28), accordingly to the lesion's intensity. There were no significant differences in microbiological quantification among the groups (p>0.05) except for the grade 3 group, as grade 1 and 2 lesions were in the early stages and histopathological changes such as ulceration were not observed. In grade 3 lesion group, it was observed bacterial cocci grume and ulceration at the articular region and significantly higher microbiological count (p<0.05) for E. coli and Staphylococcus spp. In conclusion, the visual standard proposed in this work, correlated and confirmed by the histopathologic, and microbiologic characterization, allows to precise and fast ascertainment of the contact lesion grade in the tibiotarsal regions of broiler carcasses. Moreover, it should be highlighted that grades 1 and 2 alterations are not caused by an inflammatory process caused by pathogenic agents and should not be considered a public health risk.
Velmurugan Palanivel;Sung-Chul Hong;Veera Ravi Arumugam;Sivakumar Subpiramaniyam;Pyong-In Yi;Seong-Ho Jang;Jeong-Min Suh;Eun-Sang Jung;Je-Sung Park
Advances in nano research
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v.14
no.4
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pp.391-397
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2023
This manuscript describes the one-step eco-friendly green fabrication of silver nanoparticles (AgNPs) through the in-situ bio-reduction of an aqueous solution of silver nitrate using Syzygium aromaticum leaf extract. UV-vis spectroscopy shows a characteristic SPR peak around 442 nm. FTIR spectroscopy showed that the AgNPs were capped with bioactive phyto-molecules. TEM images revealed oval and spherical particles with a mean diameter of ~12.6 nm. XRD analysis revealed crystalline and face-cantered cubic AgNPs. The phytosynthesized AgNPs showed broad-spectrum anti-microbial activity against two foodborne pathogenic bacteria, Listeria monocytogenes and Staphylococcus aureus. The AgNPs showed a prominent ability to inhibit biofilms formed by L. monocytogenes and S. aureus in laboratory conditions through a crystal violet assay. The results suggest that the AgNPs could be a novel nanotool to develop effective antimicrobial and anti-biofilm agents in food preservation.
Jeum Kyu Hong;Young Hee Lee;Yeon Sook Jo;Su Min Kim;Seoung Bin Lee;Juyeoung Um;Kyoung-Ok Choi;Mee Kyung Sang;Chung-Ryul Jung;Chang-Jin Park;Sung Hwan Choi
Research in Plant Disease
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v.30
no.2
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pp.114-123
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2024
In July 2022, stem rot symptom was found in a peony plant grown in a pot under a greenhouse at Jinju, Gyeongnam Province, South Korea. Two fungal species were isolated from the infected peony stems and cultured on 1/2-strength potato dextrose agar for identification. The morphological characteristics of the fungal isolates were examined, and nucleotide sequences of the internal transcribed spacer region, β-tubulin and translation elongation factor 1-α were analysed. The pathogenicity of the two isolates was confirmed in detached peony leaves, according to Koch's postulates. To our knowledge, this is the report of Neopestalotiopsis clavispora and Sclerotinia sclerotiorum as the causal agents of peony stem rots. Antifungal activity of chemical fungicide propineb and rhizobacterium Bacillus siamensis H30-3 was shown against the two plant pathogenic fungi N. clavispora and S. sclerotiorum.Unidentified diffusible and volatile compounds from B. siamensis H30-3 could suppress in vitro mycelial growths of N. clavispora JJ 8-2-1 and S. sclerotiorum JJ 8-2-2.
Objective: This study aimed to develop and evaluate the effectiveness of a water-soluble microencapsulation method for probiotic strains using gum Arabic (GA) and skim milk (SKM) over a three-month storage period following processing. Methods: Four strains of Pediococcus acidilactici (BYF26, BYF20, BF9, and BF14) that were typical lactic acid bacteria (LAB) isolated from the chicken gut were mixed with different ratios of GA and SKM as coating agents before spray drying at an inlet temperature 140℃. After processing, the survivability and probiotic qualities of the strains were assessed from two weeks to three months of storage at varied temperatures, and de-encapsulation was performed to confirm the soluble properties. Finally, the antibacterial activity of the probiotics was assessed under simulated gastrointestinal conditions. Results: As shown by scanning electron microscopy, spray-drying produced a spherical, white-yellow powder. The encapsulation efficacy (percent) was greatest for a coating containing a combination of 30% gum Arabic: 30% skim milk (w/v) (GA:SKM30) compared to lower concentrations of the two ingredients (p<0.05). Coating with GA:SKM30 (w/v) significantly enhanced (p<0.05) BYF26 survival under simulated gastrointestinal conditions (pH 2.5 to 3) and maintained higher survival rates compared to non-encapsulated cells under an artificial intestinal juices condition of pH 6. De-encapsulation tests indicated that the encapsulated powder dissolved in water while keeping viable cell counts within the effective range of 106 for 6 hours. In addition, following three months storage at 4℃, microencapsulation of BYF26 in GA:SKM30 maintained both the number of viable cells (p<0.05) and the preparation's antibacterial efficacy against pathogenic bacteria, specifically strains of Salmonella. Conclusion: Our prototype water-soluble probiotic microencapsulation GA:SKM30 effectively maintains LAB characteristics and survival rates, demonstrating its potential for use in preserving probiotic strains that can be used in chickens and potentially in other livestock.
Bacterial soft rot by Erwinia carotovora subsp. carotovora is one of the diseases causing the biggest problem in Chinese cabbage. Chemical screening was conducted to select effective agents for controlling bacterial soft rot. Control effect of antibiotics, plant activator, and Biokeeper (avirulent Erwinia) to soft rot were tested by in vitro assay, nursery test, and field experiment. The in vitro assay was done by paper disc method and potato slice method. The nursery test was performed by using mineral oil inoculation method with consistent disease induction. The in vitro assay showed that streptomycin, oxolinic acid, bronopol, and copper hydroxide significantly suppressed the growth of pathogenic bacterium and the decomposition of potato slice. However, plant activators including acibenzolar-S-methyl did not show the suppressive effect on the growth of pathogenic bacterium and the decomposition of potato slice. When applied by the nursery test condition using mineral oil inoculation method with Chinese cabbage 'Kangruckyeurum', Biokeeper, oxolinic acid, antibiotics streptomycin, validamycin, and copper compound provided 83.5%, 95.2%, 91.2%, 57.5% and 79.9% in control efficacy, respectively. However, the control effect of acibenzolar-S-methyl showed to be low to cause phytotoxicity. Also acibenzolar-S-methyl showed a significant control effect in the field experiment with Chinese cabbage 'Sanchon' in 2000, but the field experiment with Chinese cabbage 'Kangruckyeurum' in 2001 revealed it had phytotoxicity to Chinese cabbage. Such a difference was considered to be caused by differences in phytotoxic reaction of Chinese cabbage cultivars to the chemical. Streptomycin+copper, copper hydroxide and Biokeeper showed 79.7%, 71.9% and 60.9% in control efficacy, respectively, in the field experiment with Chinese cabbage 'Sanchon' in 2002.
The kinds and quantity of antimicrobial agents used for cattle (animal industry) may be considerable, suggesting the possibility that pathogenic bacteria which cannot be extirpated by the existing antimicrobial agents could appear. Ten cattle, pig and chicken farms, respectively, were randomly selected from 5 provinces in Korea and the samples were collected from excrement, manure, underground water, farmers' hands and the neishboring environment. h total of 299 samples were examined and 197 of Escherichia coli, 13 of Campylobacter jejun/coli, 223 of Enterococcus faecium/faecalis and 42 of Staphylococcus aureus isolates were collected. All isolates were screened for antimicrobial resistance: 69.4% of E. coli (137/197 strains), 78.6% of S. aureus (33/42 strains), and 82.1% of E. faecium/faecalis (183/223 strains) were resistant to one antimicrobial agent and all of C. jejuni/coli Isolates showed the resistance to one antimicrobial agent. Meanwhile, the multiple resistance ratio for more than 4 lines of antimicrobial agent was 19.2% of E. coli (38/197 strains), 11.9% of S. aureus (5/42 strains), 15.4% of C. jejuni/coli (2/13 strains) and 6.2% of E. faecium/faecalis (14/223 strains). The antimicrobial resistance ratio of bacteria isolated from the cattle farm showed lower than that of bacteria isolated from the pig or chicken farm, which might be related to the quantify of antimicrobial agents consumed. And one strain of vancomycin resistant E..faecium (VREF) were isolated from the excrement of chicken and stream, respectively. Generally, the ratio of VREF collected in animal farm environments is lower than that of VREF collected in medical environment.
Major object of this study was to investigate the causative organism of th e diseased cultured fingerling of sea bass, L japonicus. The experimental results are summarized as follows ; Staphylococcus epidermidis, isolated from the liver, kidney, spleen and brain, was considered to be the causative organism. External symptoms of this disease were congestion and hemorrhages in eyes. Anatomical symptoms were hemorrhage of brain, congestion of liver, and slight swelling of kidney and spleen. Growth of the isolates was good on BHIA, HIA and Staphylococcus No. 110. The growth occurred at a range(optimum) of $10\sim45^{\circ}C(35\sim40^{\circ}C)$, 0~9% (1~3%) of NaCl concentration and pH 4~10(8). DNase and coagulase production of all isolated strains were nagative, but was positive in hemolysis. Urease was positive reaction, and novobiocin resistance was nagative. Acid was produced anaerobically from glucose and maltose. Acid was produced aerobically from glucose, galactose, sucrose, maltose and dextrine. But gas was not produced from any carbohydrates. When the isolated strain was injected intramuscularly on fingerling of sea bass, L japonicus, it had virulence at $1.7{\times}10^{10}$ viable cells/$m\ell$ for all fish examined but no virulence at $1.7{\times}10^4$ viable cells/$m\ell$. Bacitracin, Erythromycin and Nofloxacin were observed as bacteriostatic agents to the strain, but Colistin, Gentamicin and Nalidixic acid were not. There were remarkable congestion of the brain, regressive necrosis of the liver, and showed necrosis of the epithelial cells of renal tubules in kidney tissues.
Antibacterial and antioxidant activities of plant sources have attracted a wide range of interest across the world over the last decade. This is due to the growing concern for safe and alternative sources of antibacterial and antioxidant agents. In this study, we focused on the antibacterial and antioxidant activities and the chemical composition of a methanol extract from Viburnum sargentii seeds. The chemical composition was determined by gas chromatography-mass spectroscopy (GC-MS), and the antibacterial activity was screened by a disc diffusion assay. The minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) were determined using the microbroth dilution and spread plate method, respectively. The V. sargentii extract showed growth inhibition activity on all tested Gram-positive (Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus, and Staphylococcus saprophyticus) and Gram-negative (Escherichia coli, Pseudomonas putida, and Proteus vulgaris) pathogenic bacteria. The MIC and MBC ranged from 0.156~1.25 mg/ml for Gram-positive and 0.625~5.0 mg/ml for Gram-negative tested bacteria. The GC-MS results revealed the presence of several phytochemicals such as ${\beta}-sitosterol$ and vitamin E, which are known for their pharmacological applications. The antioxidant activities of V. sargentii extract were investigated by three different methods: the 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl free radical scavenging assay, the reducing power assay, and the total antioxidant capacity assay. The results showed a concentration-dependent antioxidant potential for all three used methods. In sum, our findings suggest that the methanol extract of V. sargentii seeds has the potential to inhibit the growth of pathogenic bacteria and provide antioxidant compounds, making it therefore worthy of further investigation.
The aim of this study was to develop a simple, environmentally friendly synthesis of silver nanoparticles (SNPs) without the use of chemical reducing agents by exploiting the extracellular synthesis of SNPs in a culture supernatant of Bacillus thuringiensis CH3. Addition of 5 mM $AgNO_3$ to the culture supernatant at a ratio of 1:1 caused a change in the maximum absorbance at 418 nm corresponding to the surface plasmon resonance of the SNPs. Synthesis of SNPs occurred within 8 hr and reached a maximum at 40-48 hr. The structural characteristics of the synthesized SNPs were investigated by various instrumental analysis. FESEM observations showed the formation of well-dispersed spherical SNPs, and the presence of silver was confirmed by EDS analysis. The X-ray diffraction spectrum indicated that the SNPs had a face-centered cubic crystal lattice. The average SNP size, calculated using DLS, was about 51.3 nm and ranged from 19 to 110 nm. The synthesized SNPs exhibited a broad spectrum of antimicrobial activity against a variety of pathogenic Gram-positive and Gram-negative bacteria and yeasts. The highest antimicrobial activity was observed against C. albicans, a human pathogenic yeast. The FESEM observations determined that the antimicrobial activity of the SNPs was due to destruction of the cell surface, cytoplasmic leakage, and finally cell lysis. This study suggests that B. thuringiensis CH3 is a potential candidate for efficient synthesis of SNPs, and that these SNPs have potential uses in a variety of pharmaceutical applications.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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