Some virulence proteins of Helicobacter pylori, such as vacuolating cytotoxic protein A (VacA) and cytotoxin-associated gene protein A (CagA) have been reported to be causative agents of various gastric diseases including chronic gastritis, gastric ulcer or gastric adenocarcinoma. The expression level of these virulence proteins can be regulated when H. pylori is exposed to the antibacterial agent, cyanidin 3-O-glucoside (C3G) as previously reported. In this study, we analyzed the quantitative change of various virulence proteins including CagA and VacA by C3G treatment. We used 2-dimensional electrophoresis (2-DE) to analyze the quantitative change of representative ten proteome components of H. pylori 60190 ($VacA^+/CagA^+$; standard strain of Eastern type). After 2-DE analysis, spot intensities were analyzed using ImageMaster$^{TM}$ 2-DE Platinum software then each spot was identified using matrix assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS) or peptide sequencing using Finnigan LCQ ion trap mass spectrometer (LC-MS/MS). Next, we selected major virulence proteins of H. pylori among quantitatively meaningful ten spots and confirmed the 2-DE results by Western blot analysis. These results suggest that cyanidin 3-O-glucoside can modulate a variety of H. pylori pathogenic determinants.
Twenty two different disease on strawberry have been reported in Korea. Their occurrence patterns were depended on the varieties cultivated. Fusarium wilt occurred seriously on var. Hokowase, a variety used for the fields or semi-forcing culture. In recent years, however, anthracnose occurred remarkably as the acreage of forcing culture increases. Consequently, anthracnose reduced the stand rate and yield of the strawberry. Average occurrence rate of anthracnose was 36.9% on major strawberry cropping areas. Nyoho and Akihime, which are popular varieties for the forcing culture, are considered to be susceptible, but Holiwase and Suhong are resistant against this disease. Colletotrichum gloeosporioides and Glomerella cingulata have been reported as casual agents for this disease in Korea. C. gloeosporoides was recently reported, but C. fragariae, known to be a strong pathogen in foreign countries, has bot been found yet in Korea. These two fungal pathogens showed significant differences in some characteristics such as major infection parts of plant and responses to temperatures as well as benomyl resistance. In addition, C. gloeosporioides is more pathogenic than G. cingulata. Because vinly sheltering is effective for control of anthracnose to protect water disposal of the pathogen during the seedling stages, it is strongly recommend to use this method in conjunction with integrated control programs.
In order to find less toxic antiviral agents from basidiomycetes, EA, the water soluble substance, was prepared from the carpophores of Elfvingia applanata (Pers.) Karst. EA was examined for antiviral activity against five strains of pathogenic viruses such as encephalomyocarditis virus (EMCV), vesicular stomatitis virus (VSV) Indiana and New Jersey strains, influenza A virus (Flu A), and varicella zoster virus (VZV) in vitro. Antiviral activity was evaluated by plaque reduction assay. Among five strains of viruses tested, EA exhibited the most potent antiviral activity against VSV Indiana strain with 50% effective concentration $(EC_{50})$ of 0.104 mg/ml in Vero cells, and its selectivity index (SI) was 36.5. EA was also examined for the virucidal activity, antiviral activity in preincubation on VSV Indiana strain in order to examine possible mode of antiviral activity. Preincubation of Vero cells with EA did not confer protection against VSV, however, prolonged exposure of cells to EA inhibited the replication of virus dose-dependently. In virucidal activity, the titer of infectious virus did not decrease significantly.
Mechanol extracts of three cold-tolerant eucalyptus trees-Eucalyptus darlympleana, E. gunnii and E. unigera were screened for antimicrobial activity against twenty two phyto-pathogenic fungi and six food-borne bacterial pathogens. E. unigera showed the antagonistic activity against all the tested pathogens. Among the tested fungal pathogens, Pythium species were highly sensitive to the leaf extracts. Especially, P. vanterpoolii, a causal agent of leaf blight in creeping bentgrass (Agrostis palustris), was completely inhibited by the extracts. The eucalyptus extracts were also effective in inhibiting the fungal growth of Botrytis cinerea and Phomopsis sp. isolated from the lesions of kiwifruit soft rot during post-harvest storage. Escherichia coli O-157 was less sensitive to the inhibition than the other bacterial pathogens tested. It was likely that Gram positive bacteria-Bacillus subtilis and Streptococcus mutans were more sensitive to the eucalyptus extracts than Gram negative bacteria-Escherichia coli, Salmonella enteritidis and Pseudomonas aeruginosa. Our findings suggest that the cold-tolerant eucalyptus species have antimicrobial properties that can serve the development of novel fungitoxic agents or food preservatives.
인삼의 안정적인 생산 및 합리적인 병해방제에 기여하기 위하여 연구를 실시한 결과 갈잎 퇴비에서 분리된 Streptomyces lauretii B8180과 Bacillus subtilis B8856, Burkholderia cepacia B7944 세 균주의 인삼병원균 5종에 대한 항균력이 인정되었으며, 특히 실내실험을 통하여 높은 역병 방제효과가 인정되었다. 그러나 이 실험에서와 같이 식물의 지상부에 길항균을 살포하는 방법을 통하여 역병 방제효과를 높일 수 있을 것으로 생각된다. 이 길항균들은 갈잎 퇴비에서 분리되었기 때문에, 갈잎 퇴비에서 증식시켜 인삼재배 예정지에 투입하면, 억제형 토양 (suppressive soil) 조성을 통한 주요병해 방제가능성도 클 것으로 생각된다.
Background A patient's overall condition sometimes does not allow for the complete removal of a dead eschar or injured slough in cases involving a pressure-injury skin lesion. This frequently occurs in clinical practice, particularly in bedridden and older patients receiving home care or intensive care. Even after debridement, it is also difficult to manage open exudative wounds in these patients. Nevertheless, when a mature or immature eschar is treated without proper debridement, liquefaction necrosis underneath the eschar or slough tends to reveal a large, open wound with infectious exudates. We hypothesized that if the presence of any bacteria under the eschar can be evaluated and the progression of the presumed infection of the subeschar can be halted or delayed without creating an open wound, the final wound can be small, shallow, and uninfected. Methods Using a punch instrument, we performed 34 viable subeschar tissue cultures with a secure junction between the eschar and the normal skin. Results The bacterial study had 29 positive results. Based on these results and the patient's status, appropriate antibiotics could be selected and administered. The use of suitable antibiotics led to relatively shallow and small exposed wounds. Conclusions This procedure could be used to detect potentially pathogenic bacteria hidden under black or yellow eschars. Since subeschar infections are often accompanied by multidrug-resistant bacteria, the early detection of hidden infections and the use of appropriate antibiotics are expected to be helpful to patients.
A virus was purified from Korean cactus (Chamaeaereus silverstrii f. Variegata Hort) showing necrotic spots and its biophysicochemical properties were examined. The typical necrotic spots were observed on healthy looking cactus inoculated with the purified virus and the various symptoms from necrotic spots to systemic were observed on 17 species of test plats used, which suggests that the purified virus has the normal infectivity and wide host range. Ultraviolet absorption scanning analysis revealed that the viral preparation had the typical curve with shoulder at 290 nm and its ratio of absorbances at 260 nm to 280 nm and extinction coefficient was 1.156 and 2.86, respectively. The virus represented one distinct and homogeneous band and molecular weight of viral coat protein was determined to 17, 000 Dalton by SDS-PAGE. The virus revealed rod-shaped virion (325$\times$20 nm) by electron microscopy. Based on these results, it has been thought that the virus purified in this study is the pathogenic agents causing necrotic spot symptom on Korean cacuts and one of the member of tobamovirus family.
A total of 16 Staphylococcus epidermidis isolates collected from 14 dogs admitted to the Veterinary Medicial Teaching Hospital in Seoul National University over eleven months were examined for in vitro antibiotic susceptibility pattern with minimum inhibitory concentration (MIC) and slime production, a virulence-associated phenotype, and were genetically characterized by pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). The frequency of resistance to antimicrobial agents tested was not high, with a susceptibility ranging from 56.3% to 100%. Three strains exhibited multiple drug resistance against amikacin (MIC, $32-64{\mu}g/ml$), ampicillin ($32{\mu}g/ml$), fosfomycin ($32-128{\mu}g/ml$) and gentamicin ($16{\mu}g/ml$). Vancomycin, ciprofloxacin and rifampin were effective antibiotics against the isolates. All isolates were slime producers ; strains isolated from dogs which died of bacteremia were more likely to produce slime than those isolated from dogs which survived. Chromosomal DNA fingerprinting of the isolates yielded 16 different genomic types with few common bands, indicating a variety of clones of S epidermidis were prevalent in the hospital. This study revealed that PFGE is an useful method for the genotype characterization of S epidermidis strains and this organism could probably be pathogenic in some dogs with severe disorders. Further works on a larger number of epidemiologically defined strains are required to assess these results.
Biosensors consist of biochemical recognition agents like antibodies immobilized on the surfaces of transducers that change the recognition into a measurable electronic signal. Here we report a piezoelectric immunosensor made to detect Vibrio vulnificus. A 9MHz AT-cut piezoelectric wafer attached with two gold electrodes of 5mm diameter was used as the transducer of the QCM biosensor with a reproducibility of ${\pm}0.1Hz$ in frequency response. We have tried different approaches to immobilize antibody on the sensor chip. Concerning the orientation of antibody for the best antigen binding capacity, the antibody was immobilized by specific binding to protein G or by cross-linking through hydrazine. In addition, protein G was cross-linked on glutaraldehyde activated immine layer (PEI) or EDC/NHS activated sulfide monolayer (MPA). PEI was found to be more effective to immobilize protein G following glutaraldehyde activation than MPA. However, hydrazine chip showed a better capability to immobilize more IgG than protein G chip and a higher sensitivity. The sensor system was able to detect V. vulnificus in dose dependent manner and was able to detect bacterial cells within 5 minutes by monitoring frequency shifts in real time. The detection limit can be improved by preincubation to enrich the bacterial cell number.
Ralstonia solanacearum species complex (RSSC) causes bacterial wilt, and it is one of the most important soil-borne plant pathogenic bacteria. RSSC has a large host range of more than 50 botanical families, which represent more than 200 plant species, including tomato. It is difficult to control bacterial wilt due to following reasons: the bacterial wilt pathogen can grow inside the plant tissue, and it can also survive in soil for a long period; moreover, it has a wide host range and biological diversity. In most previous studies, scientists have focused on developing biological control agents, such as antagonistic microorganisms and botanical materials. However, biocontrol attempts are not successful. Plant-derived metabolites and extracts have been promising candidates to environmentally friendly control bacterial wilt diseases. Therefore, we review the plant extracts, essential oils, and secondary metabolites that show potent in vivo antibacterial activities (in potted plants or in field) against tomato bacterial wilt, which is caused by RSSC.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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