Despite the relatively high production of fingerlings of the olive flounder Paralichthys olivaceus, its larval rearing in terms of first feeding has not been fully analyzed. We evaluated the variations of amino acids and fatty acids of starved larvae over 96 hr after hatching. We also investigated depletion of the yolk and oil globule of starved larvae and those fed the rotifer Brachionus plicatilis. In addition, the optimum size of the rotifers according to the mouth size of the larvae, and the point of no return with delay of the first feeding, were also examined. The amino acids in the egg decreased abruptly during embryo development. At 48 to 72 hr after hatching, the amino acids of starved larvae decreased by $30-40\%$ from the level in newly hatched larvae. The concentrations of fatty acids in newly hatched larvae were lower than those of floating eggs and dropped sharply at 48 hr after hatching, when the yolk disappeared. The starved larvae depleted their yolksacs and oil globules earlier than the fed larvae did. At 84 hr after hatching, rotifers were detected for the first time in the guts of the larvae, which were about 3 mm in total length. The point of no return appeared to be close to the fourth day from the first feeding. For a high survival rate of P. olivaceus larvae, the first feeding should occur before the third day after hatching.
Effects on nonylphenol (NP) treatment on early development of fertilized eggs and survival of larvae in olive flounder, Paralichthys olivaceus were investigated. Fertilized eggs and hatched larvae were exposed to aqueous solutions of NP at nominal concentrations of 50, 100, 150 and 200 $\mu\textrm{g}$/L. In the control I and II (methanol-carrier control) groups, the hatchability of fertilized eggs were 90.7$\pm$7.02 and 90.0$\pm$5.29% (P <0.05), respectively. However, treatments of NP concentrations at 50, 100, 150 and 200 ug/L were reduced to 78.7$\pm$4.16, 46.0$\pm$9.17, 48.0$\pm$3.46 and 33.3$\pm$11.02% (P<0.05), respectively. The time to hatching of fertilized eggs was delayed in high-dose NP treatment groups rather than control groups. Fertilized eggs of NP immersed group could not hatch normally, and also vertebra of the larvae observed as abnormal shape. Cumulative mortality of hatched larvae after 26hr NP treatment was 38.3, 78.3, 88.3 and 100% in NP 50, 100, 150 and 200 ug/L treatment groups, respectively. Whereas, control I and II were 11.7, 16.7% (P<0.05). Hatched larvae showed most death at the embryonic development stage with abnormalities. These results suggest that NP treatment in fertilized eggs and larvae was inhibited as normally development for fertilized egg and growing of larvae.
Effects of Formalin treatment on embryogenesis and larvae growing in fertilized eggs and hatched larvae of olive flounder, Paralichthys alivaceus were investigated. Fertilized eggs and hatched larvae were exposed to aqueous solution with 100, 200, 400, 800 and 1,000 ppm of nominal formalin concentration. They were kept in sea water of 16, 18 and 22$^{\circ}C$, respectively. Survival rate and hatchability of fertilized eggs were high in control groups more than formalin treated groups in 16, 18 and 22$^{\circ}C$, respectively (P<0.05). A similar effect that survival rate of hatched larvae was also observed for control and treatment groups. On the other hand, fertilized eggs treated with 400 ppm formalin, were all death in kept in 22$^{\circ}C$. These results suggest that high-dose of formalin in fertilized eggs and hatched larvae in olive flounder, Paralichthys olivaceus was inhibited the normal embryogenesis for fertilized eggs and growing for hatched larvae. Also, these inhibited effects was promoted in higher temperature.
본 연구는 넙치 (Paralichthys olivaceus) 자어에 대한 요각류 Paracyclopina nana의 먹이가치를 평가하기 위해 두섭식 단계 (rotifer 섭식 단계와 Artemia 섭식 단계)로 나누어 각각 12일 및 16일 동안 수행되었다. Rotifer 섭식 단계 실험에서, 넙치 자어의 생존과 성장은 부화 12일째 rotifer만 공급했을 때 보다 P. nana (nauplii) 단독으로 공급했을 때 더 높게 나타났다. Arteima 섭식단계 실험에서, 부화 30일째 넙치자어의 성장은 P. nana (C4-adult) 단독 공급실험구와 혼합공급(P. nana+Artemia) 실험구가 다른 실험구에 비해 높게 나타났으나 넙치 자어의 생존은 모든 실험구가 유의적인 차이를 보이지 않았다. P. nana nauplius와 성체(C4-adult)의 n-3 HUFA 함량은 각각 4.0%와 5.4%였다. 결과적으로, 기수산 요각류 P. nana는 해수어 종묘생산을 위한 초기생먹이로 효과적인 것으로 판단된다.
1991년(年) 12월(月)에서 1992(년)年 4월(月) 사이에 제주도내 종묘배양장에서 사육중이던 넙치자어에서 소화관이 백탁되거나 궤양을 일으키는 질병이 발생하여 대량폐사를 일으켰다. 병든 자어의 소화관으로부터 Vibrio 속(屬) 세균을 분리하였고, 형태학적(形態學的), 생물학적(生物學的) 및 생화학적(生化學的) 성상(性狀)을 조사한 결과, 본병의 원인균을 Vibrio sp. INFL group으로 동정하였다. 본병은 rotifer 등(等)의 먹이생물을 매개로 하여 경구감염시킨 결과 자연감염 증상이 재현되었다. 분리균이 잘 발육할 수 있는 온도의 범위는 $25\sim30^{\circ}C$, 식염농도의 범위는 2.0~4.0% 그리고 pH는 6.0~8.0이었다. 분리균은 oxytetracycline, nalidixic acid, kanamycin 및 novobiocin 등에 감수성을 나타냈으나 ampicillin, erythromycin, spiramycin 및 sulfa-drug에는 내성을 나타내었다.
본 연구는 Paracyclopina nana의 먹이생물로써의 우수성을 핵산과 소화효소 활성을 기준으로 넙치 Paralichthys olivaceus 자어를 대상으로 밝히기 위한 것이었다. 실험은 P. nana 단독구(C 실험구), Artemia nauplii 단독구(A 실험구) 그리고 혼합구(M 실험구)로 나누어서 실시하였다. 넙치 자어의 체장은 부화 28일째, P. nana 단독 공급구에서 높게 나타났다. 건조중량당 핵산 함량은 C, M 실험구에서 A 실험구보다 함량이 빠르게 증가하였으며, RNA/DNA ratio는 C 실험구가 M, A 실험구보다 감소 경향이 빨랐다. 이들 자어의 생존률은 실험구에 따른 차이는 없었지만, 비색소침착률은 C, M 실험구에서 낮게 나타났으며, 실험 종료 시 변태율은 C 실험구에서 가장 높게 나타났고, A 실험구에서 유의적으로 가장 낮게 나타났다. $\alpha$-amylase 활성은 모든 실험구에서 증가하는 활성의 경향을 보였다. TAP 활성은 A 실험구에서 26일째 이후 9 mU/larva의 활성으로 높게 나타났으나, 다른 실험구에서는 $5{\sim}6$ mU/larva로 증가하지 않았다. $TAP/{\alpha}-amylase$ 활성의 비에서 A 실험구는 실험기간 동안 유의적으로 변화가 없었으나, C, M 실험구는 유의적으로 낮아지는 경향을 보였다. 결과적으로 실험구들의 성장, 핵산 함량의 변태와 관련된 시기적 증감 현상, 그리고 C, M 실험구에서 지속적으로 낮아지는 $TAP/{\alpha}-amylase$ 활성비를 보았을 때, 넙치 자어의 가장 높은 성장률을 볼 수 있었던 요각류인 P. nana를 공급하는 것이 이 시기의 효과적인 사육 방법인 것으로 판단된다.
We investigated the characteristics of embryonic and abnormal organ development in haploid olive flounder, Paralichthys olivaceus, by comparing egg development and histological sections in haploid and diploid individuals. After the mid-blastula transition, abnormal development was observed in haploid fish, including delayed epiboly and malformation of the germ ring and embryonic body. In haploid flounder, Kupffer’s vesicles are irregularly shaped and of variable size compared to diploids. The embryonic body of haploids was shorter and broader than that of diploids and the tail length and size were variable. Most haploid embryos failed to hatch and the few larvae that did, did not survive for more than 6 h. The histological analysis of haploid larvae revealed deformed development in diverse organs, including the eye, otic vesicles, notochord, and neural tube. These results may be related to an abnormality in the axial system of haploid larvae. This study confirmed that the abnormalities of haploid olive flounder were similar to the reported characteristics of haploid syndrome. The abnormalities are caused by delayed epiboly and involution and deformity of Kupffer’s vesicle during egg development.
We investigated the toxicological effects of Aroclor 1254 on the fertilized eggs, embryos and larvae of the olive flounder Paralichthys olivaceus. The survival rate and hatching success of the embryos decreased significantly in treated groups in an Aroclor 1254-dose-dependent manner. Significant differences were found at ${\geq}5{\mu}g/L$ Aroclor 1254 compared to the control group. Hatching success occurred at ${{\leq}}10{\mu}g/L$ Aroclor 1254, which was not significantly different to the control. Embryo malformation increased significantly at ${\geq}1{\mu}g/L$, and included yolk-sac and tail-flexure abnormalities. There was a significant decrease in the survival rate of the larvae at ${\geq}5{\mu}g/L$, which was accompanied by the malformations described above. Notably, concentrations as low as $1{\mu}g/L$ caused a significant increase in abnormalities in the larvae, including incidences of multi-focal hemorrhages, pericardial and yolk-sac edema, inhibition of swim bladder inflation and severe developmental delay. The responses to Aroclor 1254-induced toxicity were generally similar among fertilized eggs, embryos and larvae from three separate flounder hatcheries: Cheju Island, Yeosu and Chungnam, South Korea. These results indicate the high acute toxicity of Arolcor 1254 concentrations of which as low as $1{\mu}g/L$ in olive flounder larvae can affect unhatched embryos. To conclude, the average $LC_{50}$ values for Aroclor 1254 in the embryos and larvae were 50.92 and $3.08{\mu}g/L$, respectively. Additionally, the average $EC_{50}$ values, based on the rate of damage were 14.72 and 5.6$1{\mu}g/L$, respectively.
넙치, Paralichthys olivaceus의 자어의 생존과 성장에 미치는 암모니아의 급성 및 만성독성 영향을 단기 독성시험법에 준하여 생물검정시험을 실시하고 자어의 성장단계별 암모니아 내성 및 성장에 미치는 영향농도를 산출하였다. $96hr-LC_{50}$ 부화후 7일이 경과한 자어가 $0.300mg\;NH_3/\ell$, 21일된 것은 $0.572mg\;NH_3/\ell$로 증가하다가 부화후 23일째에는 $1023mg\;NH_3/\ell로 증가하여 넘치 자어는 성장단계의 초기에 암모니아의 독성에 민감하고 성장하면서 강한 내성을 보이는 것으로 나타났다. 부화후 경과일수와 비이온성 암모니아의 농도(X)에 대한 $96hr-LC_{50}(Y)$과의 관계식은 $Y=0.0516+0.034{\cdot}X(r=0.854)$였다. 부화 후 1, 3, 5일째의 자어에서 $24hr-LC_{50}$은 부화후 경과일수가 길어질수록 높았으나, 노출시간이 지속되이도 $LC_{50}$은 매우 완만하게 감소하여 threshold $LC_{50}$ 각각 $0.293mg\;NH_3/\ell,\;0.248mg\;NH_3/\ell$ 이었다. 부화 후 16일째의 자어를 암모니아 농도별로 7일간 노출시킨 후의 생존율은 대조구의 경우 $96.7\%,\;0.341mg\;NH_3/\ell$에서는 $83.3\%$였으며, 자어의 체장과 체중은 암모니아 농도가 높을수록 유의하게 감소하였다. 체장에 대한 NOEC와 LOEC는 각각 0.102 및 0.151mg $NH_3/\ell$, 체중에 있어서는 각각 0.151 및 $0.198mg\;NH_3/\ell$으로 체장성장에 미치는 영향이 큰 것으로 추정되었다. 자어의 체장측정치에 대한 변동계수 (CV, coefficient of variation)는 암모니아 농도가 증가할수록 높아져서 고농도일수록 체장성장은 느리고 개체간 체장변이가 많았다.
The cadmium (Cd) toxicological effects on the fertilized eggs, embryos and larvae were investigated in olive flounder, Paralichthys olivaceus water-borne exposed to Cd. The survival rate and hatching success of the embryos significantly diminished in treated groups in dependence of the Cd concentration. Significant differences were found at ${\geq}30{\mu}g\;L^{-1}$ exposed groups compared to the control group. A significant increase of malformation of the embryo was observed at ${\geq}20{\mu}g\;L^{-1}$ exposed groups. They usually include such symptoms as clouded yolk-sac abnormality, fin erosion and spinal curvature. A significant reduction in the survival rate of the larvae was observed in ${\geq}20{\mu}g\;L^{-1}$ exposed groups with accompanied by the disorder. Notably, in larvae, a concentration as low as $10{\mu}g\;L^{-1}$ exposed groups caused significant elevated abnormalities that is incidences of spinal cord deformation, abnormal eyes, deformation of the head region and severe developmental delay.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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